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遗传学定律验证

【实验目的】 通过两对相对性状的遗传杂交实验,分析杂种后代的性状表现,验证遗传学规律。 【实验原理】 自有组合定律:在减数分裂过程中,位于非同源染色体上的两对等位基因在形成配子时,每对等位基因既随同源染色体的分离而分离,又随非同源染色体的重组而自由组合,形成四种基因型的配子,其比例相等。 连锁交换定律:配子形成的过程中,减数分裂时有一部分细胞中同源染色体的两条非姐妹染色单体间发生了交换。 【 ...

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果蝇形态和生活史观察

【实验目的】 了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。 【实验原理】 自二十世纪初至二十世纪三十年代,果蝇作为遗传学实验材料就被广泛的应用。不仅验证了孟德尔的分离规律、自由组合规律,还发现了性连锁遗传。特别是1910年果蝇白眼突变体的发现,通过设计的伴性遗传实验,证明了控制白眼性状的基因是座落于X染色 ...

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大肠杆菌诱变处理与营养缺陷型筛选

【实验目的】 1.了解应用物理、化学因素对细菌进行诱变的方法。 2.初步掌握诱变产生营养缺陷型菌株的筛选与鉴定的技术。 【实验原理】 在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,可诱发基因突变。如果突变后丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长,称为营养缺陷型。实验室获得营养缺陷型菌株通过经过以下几个步骤:诱变处 ...

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果蝇诱变

实验目的:采用物理法、化学法、生物法等多种实验手段,使果蝇发生诱发突变,通过其遗传现象找出突变的规律和特点。学会自主设计实验,培养独立思考和团队合作精神,模拟科研训练。 实验材料: 黑腹果蝇(Drosophila)   物理诱变剂的种类   典型的物理诱变剂是不同种类的射线,常见的有X射线,r射线和中子,此外还有紫外线和β射线。   X射线是种波长为1000-100埃的电离射线,是最早的 ...

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国际知名生物芯片技术公司及其研发重点

现在全世界已有几十家公司专门从事芯片的研究和开发工作,而且已有较为成型的产品和设备问世。其中基因芯片的商业化开发相对成熟,美国的Affymetrix公司是世界上最有影响的基因芯片开发制造商。目前Affymetrix公司已开发全套的生物芯片技术相关产品,包括研究应用系列芯片及相关试剂和试剂盒、工具数据库及芯片分析软件工具、芯片制备系列平台仪器及其零配件、扫描检测仪器、杂交反应设备、生物芯片相关技术手 ...

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质粒的大量提取之细菌的培养及收集

在制作酶谱、测定序列、制备探针等实验中需要高纯度、高浓度的质粒DNA为此需要大量提取质粒DNA。 许多年来,一直认为在氯霉素存在下扩增质粒只对生长在基本培养基上的细菌有效,然而在带有pMBl或ColEl复制子的高拷贝数质粒的大肠杆菌菌株中,采用以下步骤可提高产量至每500ml培养物2-5mg质粒DNA,而且重复性也很好。 1、 将30ml含有目的质粒的细菌培养物培养到对数晚期(OD600约0.6) ...

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质粒大量提取之煮沸裂解法

该法 可与随后的纯化步骤如氯化钯-溴化乙锭梯度平衡离心等步骤联合使用。建议该法只用于经氯霉素处理的培养物,未处理的培养裂解后过于粘稠,不利于操作。当从大肠杆菌HB101或其衍生质粒(包括TG1)中大量提取质粒时,不宜采用煮沸法。这些细菌释放大量糖类,在氯化铯-溴化乙锭梯度中与闭环DNA形成密度大致相同的区带。这些糖类还抑制以DNA为模反或底物的酶。 试验步骤: 1、 将500ml 培养物的细菌 ...

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Wazard大量DNA纯化系统

碱法大量提取DNA往往需要很长的时间。Promega公司的Wiazrd大量DNA纯化系统既简单又快速只需要离心和真空抽干这个系统可以从500ml培养液中在3小时以内获得1mg以上的高质量的质粒DNA(200-20000bp)。该系统不需要酚和氯仿抽提纯化后的DNA溶于水或TE缓冲液中,不含任何盐份,可以直接用于DNA序列分析和酶切反应,也可以用于在核酸酶抑制剂(如RNasin)存在的条件下进行体外 ...

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人类X染色质的观察

一、 实验目的 掌握观察与鉴别X染色质的简易方法,识别其形态特征及所在部位,为进一步研究人体染色体的畸变与疾病提供参考条件。 二、 实验原理 1、发现 1949年,加拿大学者Barr等人在雌猫的神经元细胞核中首次发现一种染色较深的浓缩小体,而在雄猫则没有这种结构。进一步研究发现,除猫外,其他雌性哺乳动物(包括人类)也同样有这种显示性别差异的结构。而且不仅是神经元细胞,在其他细胞的间期核中也可 ...

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生物芯片和微流控芯片的区别

似乎现在有的人对于生物芯片与微流控芯片的区别不是很明白,特此将比较一下两者的区别: 生物芯片和微阵列芯片的意思应该是一样的,但是生物芯片并不是一个被广大学者认同的名词,主要是一些媒体在报道的时候为了简单和通俗使用了这个词,所以专业上来讲,生物芯片应该叫做微阵列芯片。其发展历史比较悠久,而且现在已经有商品化的产品。 微流控芯片是通过微加工的方法制作出微米级别的通道,通过通道的设计将分析的各种基本过程 ...

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孟德尔豌豆实验(图)

上图描述了孟德尔的经典实验之一,这里他用豌豆杂交实验说明了他的遗传概念。 孟德尔认为子一代的遗传性状来自于亲代父本和母本,然后再把这些性状传给子二代,而不是在子代那里混合起来的。 纯合的父本(圆豌豆)和纯合的母本(皱豌豆)杂交,每个亲代产生一种配子,S 或 s,杂交之后产生的子一代的基因型都是Ss,而表型都是圆豌豆。 当子一代进行自交时,它产生两种卵细胞,S和s,还有两种精子,S和s。这些配子按照 ...

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电化学生物传感器研究进展

摘要:电化学生物传感器对临床医学和遗传工程的研究具有深远的意义和应用价值,已逐渐成为分子生物学和生物技术研究重要领域。近年来,关于它的性能和检测方法的优化研究也越来越多。本文主要介绍电化学生物传感器的原理、分类及最近几年来国内外的一些研究进展。 传感器与通信系统和计算机共同构成现代信息处理系统。传感器相当于人的感官,是计算机与自然界及社会的接口,是为计算机提供信息的工具。 1962年,Clark提 ...

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定量PCR常见问题解答

1.定量PCR仪的开关机顺序是怎样的? 按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验。关机顺序:确认实验已经结束后,首先关闭信号收集软件,然后关掉定量PCR仪主机的电源,最后关闭电脑。 ...

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定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术

定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板量的定量。 广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型: (1)外参法+终产物分析。所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。这种类型没有对样本进行质控监测,易出现 ...

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电化学生物传感器

传感器与通信系统和计算机共同构成现代信息处理系统。传感器相当于人的感官,是计算机与自然界及社会的接口,是为计算机提供信息的工具。 传感器通常由敏感(识别)元件、转换元件、电子线路及相应结构附件组成。生物传感器是指用固定化的生物体成分(酶、抗原、抗体、激素等)或生物体本身(细胞、细胞器、组织等)作为感元件的传感器。电化学生物传感器则是指由生物材料作为敏感元件,电极(固体电极、离子选择性电极、气敏电极 ...

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果蝇实验技术

一、实验原理 果蝇(fruit fly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genus Drosophila),约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。用果蝇作为实验材料有许多优点: 1. 饲养容易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。 2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代,每个受精的雌蝇可产卵400~500个 ...

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重组子的筛选

根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的 ...

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转化子DNA的快速鉴定法

快速细胞破碎法实验步骤 1、 挑取转化平板上的单菌接种于含相应抗生素的2ml LB中,37℃振荡培养至A590值为0.6~0.8。 2、 取1ml菌液至1.5ml Eppendorf管中,9000rpm离心9min,去尽上清。 3、 加入70μl Cracking Gel缓冲液20%SDS 10ml 250mmol/L EDTA 1.6ml蔗糖27.2g 1.2%溴酚蓝1.67ml,加双蒸水 ...

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转化的要点及疑难解析

1、 存放:超级感受态细胞必须从干冰运送包装箱取出直接放入–80°C冰箱的底部。一定不要用液氮来存感受态细胞。 1) 存放条件:超级感受态细胞对微小的温度改变也极度敏感,因此必须存放在–80°C冰箱的底部。即使是将细胞从一个冰箱转移到另一个冰箱也会导致转化效率的损失。采用BD Falcon 的14ml聚丙烯圆底试管:在转化实验中使用圆底14-ml BD Fa ...

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几种常用转化细胞和转化技术

致癌化学物转化细胞: 转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验 实验步骤: 1、 取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分钟,滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入75cm/培养瓶中,接种密度10~20×106/75cm,37℃培养2~3天,在顺利情况下能迅速长满瓶面。 2 ...

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