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如何从海水中分离噬菌体

从海水中如何分离一种噬菌体?这是一道以前的研究生考题希望大家help me! I hope this could solve your problem:Marine phage genomics-review.pdf (345.3k) ...

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Preparation of G+A Marker

Procedure Add the following to a sterile microcentrifuge tube: Labeled target DNA (3-6ng) 1-8ul Calf Thymus DNA (0.5ug/ul) ...

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RNA 提取策略及RT-PCR技术

第一部分RNA 提取策略一、提取原理1、RNA降解的原因:内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素,最常见的就是毛发尤其头发,灰尘,唾液,塑料手套这四个兄弟。针对它们我们应该戴帽子,口罩,橡胶 ...

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Maxam-Gilbert Sequencing

A modified abbreviated version of the Maxam-Gilbert sequencing is described. A complete description including the methods to prepare and isolate asymmetrically labeled fragments of DNA and to prepare ...

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real -time PCR体系的优化

实时定量PCR以其精确、快速、方便,越来越多的应用在科研、临床及检验检疫的各个领域。但是定量PCR是对精确性要求很高的实验,实验的条件对实验结果的影响非常大。在此谈谈体系优化的问题,希望对做相关试验研究的战友有所帮助1.基本参数的优化: 1)MgCl2的浓度:在PCR反应中,MgCl2的浓度对酶的活性是至关重要的,不仅如此,合适的MgCl2的浓度还能在反应中得到较低的Cp(crossingpoin ...

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叶绿素含量的测定(分光光度法)

叶绿体色素的提取、分离、理化性质的鉴定以及叶绿素含量的测定的试验操作

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Chemical Sequencing of DNA

The method below works well for Sequencing of DNA of greater than ~40 bp. Typically about 150 bases of sequence can be read from analysis on a 6-8% urea acrylamide gel. For sequencing of short oligonu ...

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PCR佐剂手册

A variety of PCR additives and enhancing agents have been used to increase the yield specificity and consistency of PCR reactions. Whilst these additives may have beneficial effects on some ampl ...

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SSH抑制性消减杂交文库构建方法介绍

SSH是一项可以快速获取两个不同生物材料中差异表达基因的分子生物学技术,是快速筛选差异表达基因的有效方法,也是寻找新基因的重要手段。该技术尤其适合以genome尚不完全清晰的物种或者以特殊材料为研究对象的科研工作者。是基因芯片技术的有效补充。 基本流程:通过差减文库构建,文库验证和筛选(逆向斑点杂交),获得阳性克隆,对阳性克隆测序及生物信息分析,可判定差异基因的情况。另外结合RACE技术可进一步克 ...

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噬菌体扩增及滴度测定

请教有关噬菌体分离扩增测滴度纯化等的相关问题,首先是如何从污水或标本中获取,可能这些问题比较傻,但是本人是新手,敬请指教,不要取笑!谢谢! 下面这篇文章是讲如何从污水中分离噬菌体的,肯定会对你有帮助http://highered.mcgraw-hill.com/sites/dl/free/0072487445/92720/Exercise37.pdf 我们实验室的噬菌体扩增及测滴度方法: 第一 ...

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实时定量PCR完全手册

方法简介所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线。RT-qPCR是由 ...

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差示反转录PCR[mRNA差异显示技术]

mRNA差异显示技术是由美国波斯顿Dena-Farber癌症研究所的Liang Peng博士和Arthur Pardee博士在1992年创立的。它也称为差示反转录PCR(differential display of reverse transcriptional PCR)简称DDRT-PCR。mRNA差异显示技术是将mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术,具有 ...

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碘化物缓冲液提取噬菌体单链DNA

碘化物缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0) 1 mM EDTA 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的?我怎么没有提出DNA来,不知道是为什么?用的是NEB手册上写的方法。 1. 按上述方法进行噬菌斑扩增,在第一步离心后,将500 µl含噬菌体上清转入一新鲜离心管。 2. 加200 µl PEG/NaCl,颠倒混匀,室温放置10 ...

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光合作用基础知识讲座系列三:原初反应(图)

光合作用的实质是将光能转变成化学能。根据能量转变的性质,将光合作用分为三个阶段:1.光能的吸收、传递和转换成电能,主要由原初反应完成;2.电能转变为活跃化学能,由电子传递和光合磷酸化完成;3.活跃的化学能转变为稳定的化学能,由碳同化完成。

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PCR佐剂

Various authors recommend DMSO and glycerol to improve amplification efficiency (higher amount of product) and specificity (no unspecific products) of PCR when used in concentrations varyi ...

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光合作用基础知识讲座系列四:电子传递和光合磷酸化

原初反应使光系统的反应中心发生电荷分离,产生的高能电子推动着光合膜上的电子传递。电子传递的结果,一方面引起水的裂解放氧以及NADP+的还原;另一方面建立了跨膜的质子动力势,启动了光合磷酸化,形成ATP。这样就把电能转化为活跃的化学能

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如何冷冻干燥噬菌体

我们实验室的噬菌体想冷冻干燥保存,冷冻干燥机都买好了,但是没有规范的操作流程及注意事项,不知道哪位专家可以提供一份详细的资料?非常感谢! 我公司开展做平板培养基生产后,平板里水汽很大,却没有好的解决方案,不知道哪位专家可以提供一些这方面的资料?非常感谢! 在倒平板前的培养基应在三角瓶中灭菌等降温至40-50度时再在无菌操作下倒入平板内这样平板内的水份就不会太多了. 冷冻干燥保藏法 (1)准备安瓿管 ...

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光合作用基础知识讲座系列五:碳同化

简介了碳同化。植物利用光反应中形成的NADPH和ATP将二氧化碳转化成稳定的碳水化合物的过程,称为碳同化。根据碳同化过程中最初产物所含碳原子的数目以及碳代谢的特点,将碳同化途径分为三类:C3途径(C3 pathway)、C4途径(C4 pathway)和CAM(景天科酸代谢,Crassulacean acid metabolism)途径。

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