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1 分离方法 　　采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段，如层析、叫泳等。 1.1 高效液相色谱（HPLC） HPLC的出现 ...

等电聚焦 等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上，电聚焦的优点是：有很高的分辨率，可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开；一般电泳由于受扩散作用的影响，随着时间和所走的距离加长，区带越走越宽 ...

Upstate公司在世界上最先开发出步骤优化简洁的商业化ChIP分析试剂盒，保证实验的准确性和可重复性，同时Upstate提供广泛可行的ChIP级别应用抗体。ChIP基本试剂盒和特定蛋白 质ChIP级别应用抗体结合完成一个完整的染色质免疫沉淀分析。在过去的数年中，Upstate提供的ChIP分析试剂盒和ChIP级别应用抗体得到了全世界科学家的认可，文献应用极为广泛。 Upstate最新推出EZ C ...

蛋白 浓缩方法基本有： 丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸铵沉淀法；（低温）有机溶剂沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超滤法；透析法；离子交换层析和冷冻干燥法…… 1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白 质变性。 ...

摘　要：　叶绿体基因的表达在许多方面与原核基因表达相似，所以最早的理论认为叶绿体基因的表达与原核相似，是在转录起始水平上的调控，进一步的研究认为叶绿体基因表达调控是在不同水平上进行的如：转录水平的调节、转录后调节与修饰、翻译和翻译后修饰等。 关键词：　叶绿体；叶绿体基因组；表达调控 叶绿体基因组的特点是具相同或相关功能的基因组成复合操纵子结构。这一特点有利于叶绿体基因的表达与调控，例如rpoB-r ...

原理和应用： Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上，结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品，并第一次引入了内标的概念，极 大地提高了结果的准确性，可靠性和重复性。在DIGE技术中，每个蛋白点都有它自己的内标，并且软件全自动根据每个蛋白点的内标对其表达量进行校准，保证所检测到的蛋白丰度变化是真实的。DIGE技术可检测到样品间小于1 ...

ProQuest™ Two Hybrid System with GateWay™ Technology基于酵母，用于检测蛋白间相互作用。通过使用三种报告基因和低拷贝数的载体，ProQuest™系统可以得出最低假阳性的可信结果。另外，ProQuest™"诱饵"和"猎物"载体是GateWay™兼容的， ...

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然，不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组(proteome)。同理，不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也 ...

（一）基本原理 混合样品的气流通过固定相时，根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。 利用气相色谱层析技术做为微生物诊断的工具已成功地用于微生物的分类和鉴定。该法敏感性强，能够分离和检测到毫微克的水平。它具有快速的特点，常在数十分钟甚至数小时就可以对传染病做出早期诊断。其结果稳定，重复性好，但不足之处是操作中各因素不易控制，方法不易标化等。 （二）气相色谱仪的基本部件 1． 载气 常 ...

在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、吸附层析 1、吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄 ...

表达分析、分子生物学研究以及新的分析软件工具将会推进生物系统水平的研究。 文/EricChan西雅图RosettaBiosoftware数据分析师译/李亚萍 在基因表达研究中，广泛的基因分析可以对生理状态或者是一个细胞表型有关的基因进行系统监测。可以利用高通量分析在数据输出和获取数据快捷两方面的优势，对药物发现过程中的药靶候选基因进行鉴定，在假设驱动的研究中，该技术也提供了必须的系统背景知识。一旦 ...

Contributor: Suprya Jayadev Date: April 111996 1)Weigh out the appropriate amount of DEAE sephadex and place in a 15 ml conical tube. 2)Wash resin three to four times with zenopure water.Mix gel with ...

三级结构主要针对球状蛋白质而言的 是指整条多肽链由二级结构元件构建成的总三维结构，包括一级结构中相距远的肽段之间的几何相互关系骨架和侧链在内的所有原子的空间排列。在球状蛋白质中，侧链基团的定位是根据它们的极性安排的。蛋白质特定的空间构象是由氢键、离子键、偶极与偶极间的相互作用、疏水作用等作用力维持的，疏水作用是主要的作用力。有些蛋白质还涉及到二硫键。 如果蛋白质分子仅由一条多肽链组成，三级结构就是 ...

This procedure is used to break cells that contain a protein to be purified.This procedure is valid only for the use on Appling's lab sonicatior. PREPARATION 1.Place your sample in a 15ml elongated p ...

Fusion Protein Isolation 融合蛋白分离纯化 Peter Novick LabDepartment of Cell Biology Yale University School of Medicine http://info.med.yale.edu/cellbio/Novick/Second/Protocols/Fusion.pdf 1.Start a 5 ml overn ...

1x 40min - overnight 50% MeOH 12% Acetic Acid 1x 30min ...

Summary WCE Extracts are prepared from strain SHY282 (TFC4-Flag-EE (HpaI)).TFIIIC complex is first purified by flag affinity: TFC4 contains a single copy of the flag epitope.The flag purified TFIIIC i ...

Reagents: ChIP sonication Buffer (1% Triton X-1000.1% Deoxycholate50 mM Tris 8.1150 mM NaCl5 mM EDTA): 10 ml 10% Triton X-100 1 ml 10% Deoxycholate 5 ml 1 M Tris-Cl pH 8.1 1 ml 0.5 M EDTA 3 ml 5 ...

Lysis buffer. The choice of lysis buffer depends on what the cells were labeled with and whether you want to obtain an active kinase.The lowest background is obtained with RIPA buffer without EDTA.EDT ...

蛋白质立体结构原则 1.由于C=O双键中的π电子云与N原子上的未共用电子对发生“电子共振”，使肽键具有部 分双键的性质，不能自由旋转。 2.与肽键相连的六个原子构成刚性平面结构，称为肽单元或肽键平面。但由于α-碳原子与其他原子之间均形成单键，因此两相邻的肽键平面可以作相对旋转。此单键的旋转决定两个肽键平面的位置关系，于是肽键平面成为肽链盘曲折叠的基本单位 ...