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1.Cryopreservation of Cell Lines The aim of cryopreservation is to enable stocks of cells to be stored to prevent the need to have all cell lines in culture at all times. It is invaluable when dealing ...

In general terms cultured cells require a sterile environment and a supply of nutrients for growth. In addition the culture environment should be stable in terms of pH and temperature. Over the last t ...

1.Primary Cultures Primary cultures are derived directly from excised normal animal tissue and cultured either as an explant culture or following dissociation into a single cell suspension by enzyme d ...

Purifying Large E. coli Restriction Fragments from Pulsed-Field Gels DNA Preparation E. coli chromosomal DNA is prepared following the method of Heath et al. ( J. Bacteriol. 174 1992). Cells ...

Large numbers of cell lines look identical. Cell lines with very different origins and biological characteristics typically cannot be separated on grounds of morphology or culture characteristics. Inf ...

1.Risk Assessment The main aim of risk assessment is to prevent injury protect property and avoid harm to individuals and the environment. The performance of risk assessment is a legal requirement und ...

各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，这里主要介绍碳水化合物的代谢试验 1．糖（醇、苷）类发酵试验 （1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解 ...

1.Laboratory Design Perhaps one of the most under-rated aspects of tissue culture is the need to design the facility to ensure that good quality material is produced in a safe and efficient manner. Mo ...

ECACC and Human Genetic Research The European Collection of Cell Cultures (ECACC) was first established within CAMR Salisbury UK in 1984 and has grown to be one of the largest animal cell culture coll ...

细胞培养基本概念 细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞，也可以是细胞群。 细胞培养目的与用途 1、科学研究：药物研究开发与基础研究 药物研究与开发 (1) 新药筛选：如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。 (2) 疫苗研究与开发：如病毒性疫苗的研究与开发（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、肿瘤疫苗 ...

无菌操作技术 体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室，若实验者粗心大意，技术操作不规范也会导致污染。因而为在一切操作中最大可能地保证无菌，每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠。 Terms to remember 消毒(disinfection)和消毒剂(disinfectant) 灭菌(sterilization) 防腐(antis ...

韩雪梅证实“小黑焦虫”为硅的化合物 我院肿瘤研究室韩雪梅副研究员领导的科研小组，利用多学科先进技术和方法，经过几年研究，在国内外首次证实，目前广泛影响细胞培养的污染物“小黑焦虫”，乃是一种非生命物质——硅的化合物，并初步提出了解决这一问题的方法。参加成果鉴定会的专家们一致认为，这一发现是我国细胞培养工作史中的重大突破，为组织培 ...

Marc 145细胞培养和维持有关资料综述 一、 细胞及培养 1、Marc145细胞 上皮样细胞，来源于猴肾细胞，从母细胞（MA 104细胞）克隆而得到，可连续培养。 2、生长培养基 DMEM（高糖型，含4500mg/L D－葡萄糖、L-谷氨酰胺，和110mg/L丙酮酸钠，不含碳酸氢钠）＋5－10％新生牛血清+ 1%双抗（青霉素和链霉素）的培养液。 3、冻存液 生长培养基＋10% DMSO 4、细 ...

HepG2细胞培养的相关条件 HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性，还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。 1.HepG2细胞的复苏条件 1.1 复苏温度的选择 唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏：快速将所冻存细胞40℃水浴摇床60转/ min慢摇至其溶解，溶解 ...

足细胞来源： 丁香园网友yulinlong的观点为： 很多细胞中心就有卖的，或者有的公司可以代理ATCC公司的就可以。 有的文献用的永生化细胞系是他们自己建的系或者别人建系赠予的，你也可以考虑向国内或者国外去请求馈赠。有的会给的。 丁香园网友wenyueqiang的观点为： 美国爱因斯坦大学的PETER MUNDEL有 足细胞培养方法： 大鼠原代足细胞： 丁香园网友gaoxueyan99的观点为： ...

Q：准备用FITC，PE和APC进行三标，检测三标细胞占待检测细胞的百分比。预实验摸抗体浓度时，用单标管与相应的同型对照管比较，在二维散点图上，发现部分指标除在检测通道上偏移，在无关通道上散点也有偏移，我想这就应该是补偿需要做的事情了吧。根据预实验的结果，我发现荧光的部分干扰现象，如PE检测影响APC和FITC，FITC影响APC，而APC不影响PE和FITC等。我的问题：1，很奇怪的是FITC和 ...

血小板在各种诱导剂作用下释放其颗粒内容物，产生生物学效应，在初期止血过程中发生粘附-变形-释放-聚集等反应，这些血小板的基本反应，统称为血小板活化反应。血小板活化的检测对血小板相关疾病的诊断有重要价值。然而，检测的方法常常是有争议的，通常是由于方法本身不完善或应用不当导致医源性血小板激活，影响临床诊断的价值。这就要求建立一种灵敏、精确、快速、简便，最好可用于临床常规检测血小板活化的方法。近几年来， ...

Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂，可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化， Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯，成为脂溶的Fluo-3留在细胞内，当Fluo-3与细胞内游离 钙结合后，其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上，当用480nm波长激发时，其荧光强度与游离钙离子 浓度成正比.具体如下，① 钙荧光探针负载；取细胞悬液，加Fluo-3-Am至 ...

钙离子是机体的重要元素，同时作为细胞内第二信使通过与钙调蛋白（Calmodulin，CaM）结合激活多种蛋白激酶（如腺苷酸环化酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶等）及诸多蛋白水解酶和核酸酶，从而参与包括细胞代谢、细胞周期等多种细胞功能的调节，在细胞的许多生命活动中担当着重要的角色。因此，钙离子测定在医学实验研究中有着重要意义。 　　钙离子测定技术得益于两种近代实验技术，一是钙激活蛋白及荧光指示剂（或称荧 ...

由于可溶性MHC单体分子与TCR的亲和力很低，解离快，而多价分子可与一个特异性T细胞上的多个TCR结合，使其解离速度大大减慢。为此Altman等提出借助生物素—亲和素级联反应放大原理构建MHC I类分子四聚体。该方法通过基因工程技术把长度为15个氨基酸残基的生物素酶底物肽(Bio A substrate peptide，BSP)加在MHCI类分子如HLA-A2重链的羧基端形成融合蛋白， ...