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0 128);"Buffers: 0 128);"TBS: 25 ml of 1 M Tris-7.5 30 ml of 5 M NaCl bring volume up to 1000 ml with ddwater 0 128);"TBS-T: TBS + 0.5 ml of Tween 20 0 128);"5X SDS-PAGE running buffer:&n ...

Semi-dry Transfer Apparatus Biorad Cat# 170-3940 or equivalent Power Supply 0 - 100 VDC (adj. current to 1 Amp) Immobilon-P transfer membrane 0.45 µm pore size; cut to same size as gel (Millip ...

Wash XCell box blotting module and trays with soap and water before proceeding. 0 128); font-weight: bold;"Reagents:Transfer buffer25 mM Tris HCl190 mM Glycine10% Methanol 0 0); text-decoration: unde ...

SDS电泳技术首先在1967年由Shapiro建立，1969年由Weber和Osborn进一步完善。当在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS后，则蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小，其它因素可以忽略不计。 SDS是一种阴离子去污剂，它能破坏蛋白质分子之间以及其它物质分子之间的非共价键。在强还原剂如巯基乙醇或二硫苏糖醇的存在下，蛋白质分子内的二硫键被打开并解聚成多肽链。解聚后的蛋白质 ...

1. Load gel in apparatus as described by manufacturer. 2. Transfer proteins according to above ensuring that the NCM is toward the positive electrode. When using the Hoefer apparatus be sure to eit ...

This protocol was developed for the BIORAD protein gel and transfer apparatus. The buffers can be used with any electrophoresis/transfer system.

GeorgiaTimes"CARBONATE WESTERN TRANSFER SOLUTIONS Dunn Anal. Biochem. 1986: 157 GeorgiaTimes"1.5L GeorgiaTime ...

GeorgiaTimes"Blotting with BSA GeorgiaTimes"Blot in 5% mile/ 1X PBST (or 1X TBST) --60'/Rt GeorgiaTimes"Wash 2X for 5' in 1XPBST GeorgiaTimes"10Ab in 1% BSA/1X PBST --60'/Rt Geor ...

1. While your SDS-PAGE gel is running make your transfer buffer and chill to 4°C. Check that you have a frozen buffer dam is ready (stored in freezer next to Shikha top shelf to the right s ...

蛋白质序列分析和结构预测

1. Run an SDS gel as usual. (It's nice to run a lane of prestained markers which will transfer on to the blot and control for the transfer).2. Transfer: make 4 liters of transfer buffer. Cut 3 pieces ...

D电泳分析和高通量自动化质谱仪进行人视网膜蛋白的分析鉴定。方法人视网膜组织在广东省眼库获取。基于视网膜蛋白的不同溶解度，可以用顺序提取法将不同的视网膜蛋白分离。在2-D电泳中，视网膜蛋白质按等电点（PH3-10）和分子大小被分离，部分作银色进行观察分析。另用Colloidal Coomassie 蓝进行染色，用PROTEINEER SP系统将96个大分子蛋白斑点筛选切除，PROTEINEER DP ...

1、保存在2-8度干燥环境，避光。 2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水，混合的容器尽可能接近最终容积。 3、将干粉加入到室温15到30度的水中，轻柔搅拌，勿用热水。 4、冲洗出包装袋内所有干粉。 5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。 6、用水稀释至最终的容积，搅拌直至溶解。不要过分混合。 7、调整pH值比最后的培养用的pH值要低0.2到0.3（过滤后pH值一般要升高0.1到0.3）：用1N NaO ...

一、原理 在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。 细胞复苏时速度要快，使之迅速通过细胞最易受损的－5～0℃，细胞仍能生长，活力受损不大。 目前常 ...

TOSOH公司是世界上专门从事生产生物样品分离介质的公司之一，其最著名的产品是TSK-GEL色谱柱及其填料，已经在世界范围内非常多的实验室和工厂使用。大量的数据表明该产品非常适合生物及相关样品的分析分离。 TSK-GEL SW系列凝胶色谱柱 TSK-GEL SW系列色谱柱的填料是以刚性的球形硅胶为基质，在其表面通过共价键化学键合亲水团而成。TSK-GEL SW系列色谱柱的填料具有高性能尺寸排阻色谱 ...

推荐书籍：《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1）我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。 请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助溶剂提取后，可以用GST做亲和层析，但效率只有50~60%左右。洗脱完融合蛋白不需要助溶剂，但 ...

一、超临界流体色谱的定义 使用超过临界温度和临界压力的流体（Supercritical Fluid）作流动相进行分析的色谱法称为超临界流体色谱法。即流动相不是气体、也不是液体，而是单一态的流体。 二、超临界流体色谱（SFC）的特点 SFC方法的产生及其发展，是由它本身的特点所决定的，具有与GC及LC方法显著不同之处而居独到。 1、本方法的流动相是超临界流体，具有与液体相近的密度，因此它有强的溶解性 ...

从重液滴通过另一液体滴落，溶质在两相中间实现分配的原理出发，进行设备与过程的研发转变，20 世纪 60 年代发明了连续液/液的高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography，HSCCC)技术，目前已广泛应用于生物、医药、天然产物、环境分析、食品等领域的分离、分析和用于质控的指纹图谱的制定工作。高速逆流色谱主要利用有机/水两相系统分离和纯化天然药物制备 ...

高速逆流色谱属于逆流色谱的范畴，逆流色谱是新型的分离手段，它的主要分离原理是利用样品在固定相和流动相之间的差异也就是分配比不同而进行分离的，值得注意的是逆流色谱的固定相和流动相都是液体，其主要优点是没有传统色谱的死吸附，样品的回收率高等特点。 逆流色谱源于逆流分溶法，也就是用实验室经常使用的分液漏斗进行连续的液液萃取，根据样品在两种互不相溶的溶剂中分配比不同而进行分离。 逆流色谱早期发展的方法有液 ...

问：现在我用的南京建成的试剂盒来测脂肪酶，可是结果可以说是乱七八糟，一点也不稳定，这个问题也咨询过几位师兄，也有类似情况发生。不知道各位战友有没有碰到过这种情况？可有解决办法或者其他的测定方法？能否传授一下小弟？不胜感激！ 答：我也用过南京建成的试剂盒，结果和你一样，看来试剂盒测脂肪酶还很不成熟。你可用常规方法（聚乙烯醇橄榄油乳化法），方法简单可靠，到处都能查到此方法。 答：乙烯醇的办法我试过， ...