全部

1 、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀，免疫反应6～24h，使抗原与抗体充分结合，甚至达到平衡，然后再加入标记抗原，与抗体反应12～24h，最后分离B与F，这称为顺序饱和分析法。 应用顺序饱和加样，可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素（TSH）放射免疫分析时，将标记物延至第2天加入，发现其灵敏度增加两倍。如果缩短最后的温育时间，仍可取得满意的结果。所以一般认为，在顺序饱和 ...

固相pH梯度的优缺点　　固相pH梯度可窄至pH0.1的范围，因此分辨率极高，可达0.001pH；pH梯度稳定，不漂移；灵活性大，可随意选择pH梯度和斜率；重复性好；加样容量大；样品中盐的干扰小；对碱性蛋白质也能很好的分离，无边缘效应，故可用很窄的胶条（如5mm宽）聚焦，特别适合于双向电泳的第一相，但固相pH梯度灌胶技术复杂，只能使用聚丙烯酰胺凝胶，电泳时候需要高电压，电泳时间长，窄范围pH测定困难 ...

INTRODUCTION Phosphoproteins and peptides can be bound with high specificity to immobilized metal ions such as Fe3+ Ni2+ and Ga3+. This technique can be used with either on-line or off-line MS analysi ...

内容提要 用免疫印迹法检测134例SLE患者多肽抗体谱，阳性率71.7%，其中Sm抗体37.3%，RNP抗体21.6%，SS-A抗体24.6%，SS-B抗体20.1%，核糖体20.1%。本法对SLE诊断、分型有一定临床价值。 系统性红斑狼疮（SLE）的血清学特征是出现多种自身抗体，尤其是识别细胞核内各种可抽提核抗原（ENA）是近年来抗核抗体（ANA）研究的一项重大进展。我们应用免疫印迹技术（IBT ...

摘　要: 目的　探讨ENA 多肽抗体谱与L E 细胞(L EC) 检查在SL E、ITP 及肾炎之间检测结果的关系。方法　对同一病人应用免疫印迹法检测ENA 多肽抗体谱以及用改良血块法检查L E 细胞共136 例(SL E 78 例、ITP 22 例、肾炎36 例)。结果 在52 例L EC 阴性SL E 患者中 ENA 多肽抗体谱总阳性率为80.0% (42/52) ; 在26 例L ...

提　要　应用免疫印迹技术( IBT ) 对临床63例常见免疫性疾病进行了检查。其中 疾病组48例 主要为SL E 等自身免疫性疾病 对照组15例。同时观察了荧光ANA、dsDNA、LBT 的结果。疾病组抗ENA 抗体阳性率为58. 3% 同一患者可有2～ 3种抗体。FANA 阳性率为54. 2% dsDNA 阳性率为18. 8% LBT 阳性率为50% 对照组1例阳性(6. 7%)。SL ...

【摘要】　目的　探讨免疫印迹法检测自身免疫性疾病ENA 多肽抗体谱的临床应用价值。方法应用免疫印迹法对系统性红斑狼疮(SL E) 、混合性结缔组织病(MCTD) 、干燥综合征(SS) 、弥漫性硬皮病( PSS) 、多发性肌炎/ 皮肌炎( PM/ DM) 、类风湿关节炎(RA) 等140 例自身免疫病患者进行可提取性核抗原( ENA) 多肽抗体谱检测。一次性同时检测抗Sm、抗U1 RNP、抗SSA、 ...

摘要:为探讨抗ENA 多肽抗体谱检测在诊断系统性红斑狼疮(SLE) 病人中的应用采用间接免疫荧光法测定ANA、抗ds- DNA、免疫印迹法( IBT) 测定ENA 多肽抗体结果抗ENA 多肽抗体谱阳性率为7119 % ANA 阳性率为8618 % 抗ds -DNA 阳性率为6711 %。抗ENA 多肽抗体谱检测灵敏度高特异性强方法简便并与ANA 检测互补提高诊断阳性率对SLE 的诊断有一定的临床价 ...

摘　要:　综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 ...

用蛋白质快速层析系统(FPLC)的几种层析技术对啤酒中的含氮化合物组成进行了研究。利用Suprose6/Superose12体积排阻柱对啤酒经透析得到的蛋白质成分分析表明 啤酒多肤物质的分子量范围分布相对较广 包括不连续分布的高分子量组分万(30万、50万)、分子量6万、4万的中分子组分和分子量在5000----2万连续分布的低分子量组分。又对分子量大于4万和界于4----6万的组分进行了进一步离 ...

本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术，综和近年来国内外的一些研究结果，结合实际应用的例子，分析了各种分离纯化方法的优点，同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。

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问：G418筛选预实验用未转染的细胞做，选10-14天内细胞死亡的最小浓度，然后将更高一级别的浓度应用于转染的细胞，是这样吗？ 答：G418是一种细胞毒性药物（氨基糖苷类抗生素），依不同浓度，对细胞有一定的抑制或杀伤作用，而拟转染的质粒上带有G418的药代酶，能降解G418，从而使细胞获得对G418的耐药性。也就是说转染后的细胞可以耐受G418，而未转染成功的细胞不能耐受G418，因而被杀灭或抑制 ...

问：我的细胞缺氧达到12 h后，观察细胞形态还是很好，24h好像还不明显，48h好像都坏死了。正常不应该要这么长时间吧，是不是混合气有氧还是密闭容器不够密？ 答：我们实验室在做缺氧时用的是1%的氧气，这样的情况下细胞需要持续缺氧48h以上才可见损伤的。对于细胞缺氧而言，单纯的缺氧一般达不到很好的损伤目的，所以现在多做的是缺氧和缺糖同时处理，因为细胞只有在缺糖的条件下才对缺氧损伤敏感，建议可以试试。 ...

凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。 一、基本理论 (一) 分子筛效益 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下 ...

Hahn Lab last modified 9/30/98 1. In microfuge tubes spin down 0.1 ml of uninduced cells grown to near saturation or 0.15 ml of IPTG induced cells. Remove YT (or LB) media with a pipetman or drawn out ...

Preparation of PAGE gels. 1. Clean glass plates with ethanol and assemble casting stand see Biorad instruction manual 2. Mix solutions for lower gel in order shown ie. TEMED last and pour into plates ...

近日用水浴锅控温处理细胞，摸索出一个小方法，比较实用，故贴出以供借鉴： 以往为恒温常把器皿包埋在水底，或漂在水面，这样不是操作不便就是控温不好，为此我终于想出了一个两全的方法：器材要求有较大容积水浴锅，比较好的大塑料袋，塑料袋平放水中，底部用适当面积较重的金属平板放入塑料袋中使之底部侵入水中，塑料袋要够长，开口能拉在水面以上，这样就构成了一个水下平台，可从塑料袋中向平台上取放瓶皿等，水会紧紧的把瓶 ...

SDS-PAGE: gel electrophoresis of proteinsTECHNIQUE is to set up gel plates before you mix the gel mixes. Use the THIN spacers and choose a comb--number of wells varies. Make both resolving gel and sta ...

1. To use commercial BRL boxes: Clean the plates with soap and hot water wipe dry scrub with ethanol wipe dry and clamp them together with spacers in between. The notched spacers interlock to form a t ...