主要试剂: 核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子,从而抑制DNA酶的活性,防止PCR扩增产物降解。 核酸分离一般用连续缓冲体系,常用的有: 1) ...
指示剂: 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色,它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移速率分别与2Kb和1.6Kb的双链线性DNA大致相似。 指示剂一般与蔗糖、甘油或聚蔗糖400组成载样缓 ...
前言自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成(SPPS)方法以来,经过不断的改进和完善,到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。 固相合成的主要设计思想是:先将所要合成肽链的羟未端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基 ...
一、实验目的 掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。 二、实验原理 RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%--1.4%的凝胶,不同的RNA条带也能分开,但无法判断其分子量。只有在完全变性的条件下,RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时,一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时,配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。 三、实验材料 ...
按照卫生部《全国艾滋病检测工作管理办法》要求,中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心参比实验室于2007年8月7日至9月14日组织了本年度全国HIV抗体诊断试剂临床质量评估,现将评估情况报告如下: 一、参评实验室 参加本次试剂评估工作的有艾滋病参比实验室和9个省级疾控中心的艾滋病确证中心实验室,包括安徽、北京、广东、广西、贵州、河南、湖南、四川、新疆。评估工作由同一批技术人员、使用同一批设备在 ...
A. DAY 1 PROCEDURE •ABSORPTION OF THE POLYCLONAL AND PREIMMUNE SERUM The Goat Anti-Mouse (GAM) NGF polyclonal antibody recognizes 2.5B NGF and the Goat IgG (GIG) preimmune serum serves as a ...
A. Abstract This protocol can be used for detection of gangliosides.Spicific antibodies to gangliosides are added to cells and allowed to bind to the cell surface. The nonbound antibody is washed away ...
This modification of qualitative ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) is used for either screening detection of anti-platelet antibodies or for detection of platelet-associated Ig (PAIg) (shown h ...
A. You will need the following solutions PBS (Phosphate-Buffered Saline Ca/Mg free) : Solute 1x 10x NaCl 8 ...
The ELISA protocols for detection of the antibody binding to an antigen-coated microtitre plate are standard laboratory techniques and will not be described here. We will just mention that most recomb ...
A.Materials 1.NUNC-Immuno Plate IIF. 2.Horseradish Peroxidase-Streptavidin (Zymed; 43-4323) 3.PBS or Balanced Salt Solution (BSS). Do not use RPMI or any medium that contains bioti ...
The indirect ELISA is used primarily to determine the strength and/or amount of antibody response in a sample whether it is from the serum of an immunized animal or the cell supernatant from growing h ...
A. Reagents 1. DMEM:10% FBS 2.DMEM:10% FBS:1% HEPES (DFH) 3.10X Substrate Buffer pH 6.0 36.6 gCitric Acid monohydrate113.5 gPotassium dibasic phosphateDissolve in 900 ml ...
1. Reagents Sodium Borohydride (NaBH4) - 1 mg/mlCarbonate:Bicarbonate Buffer pH 9.6 Sodium Periodate (NaIO4) - 1 mM 2.14 mg/10 ml Acetate Buffer 10mM Acetate Buffer pH 4.50.82 g sodium acetate in 90 m ...
A. Reagents PBS PBS:0.1% BSA:0.05% Tween 20 (PBT) PBS:2% BSA 10X Substrate Buffer pH 6.036.6 g Citric Acid monoh ...
多肽药物在治疗上的重要性越来越引起广大药学工作者的重视。根据肽链的构成可将多肽分为同聚肽(Homomeric)和杂聚肽(Heteromeric)两大类前者完全由氨基酸组成后者是由氨基酸部分和非氨基酸部分组成的如糖肽。根据肽键的结构又分为直链肽和环肽。其中直链肽的研究最为广泛和深入尤其在直链肽的合成技术方面无论是液相法还是固相法都已成熟。虽然许多直链肽体外具有很好的生物活性和稳定性但是进入体内后活性 ...
Agarose gel electrophoresis (2) is employed to check the progression of a restriction enzyme digestion to quickly determine the yield and purity of a DNA isolation or PCR reaction and to size fraction ...
Q:SDS-PAGE电泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原 ...
1. Rinse gel on glass plate briefly with distilled water. 2. Wash gel in fresh 50% ETOH-12% HAc with shaking 3 times 1 hour each. (Fix IEF gel ON in 10% TCA). 3. Wash gel four times with 10% ETOH-5% H ...
薄层色谱法作为一种快速简便的色谱技术已在中草药分析、毒物分析等众多领域中广泛应用。在传统薄层色谱法中,展开剂依靠毛细作用通过薄层吸附剂来完成对组分的分离,因此其分离时间不可控,而且随着展开距离的增加,溶剂前沿的移动逐渐减慢,被分离组分的扩散也越来越严重。针对此情况,分析学家对薄层系统进行了改进,发展了薄层色谱的一个重要分支强迫流动薄层色谱(FFPC)。FFPC是通过外力强迫展开剂在吸附剂中运动,它 ...

