Definition Amino acids nucleotides polypeptides and other compounds in a colloidal state can be separated by the application of external voltages which cause charged colloid particles to move toward a ...
What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we are separating molecules of DNA that we got from ...
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的 ...
胶回收 1. 提高胶回收量的办法: 1) 增加电泳时的上样量。 2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。 3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。 4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。 5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有利于DNA与膜的结合,不过一般不要多余750μl。 6) 胶回收的关键是通过柱子的 ...
一些注意事项 1.电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3.关于防护,在一般有机玻璃后就足够了,戴上防护面具以保护眼睛,如果你戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者对于 ...
近年来,疯牛病、瘦肉精事件的连续发生,人们震惊之余发现饲料在某种条件下不仅构成了对动物和人类健康的严重威胁,而且造成了意想不到的经济损失和巨大的政治影响。饲料安全作为食品安全中的一个源头环节,成了上至国际组织、政府部门,下至平民百姓,各个层面广泛关注的热点问题。世界上很多国家及非政府组织都积极加人了饲料、食品安全控制行列。各个国家与地区也都加大力度强化相关的组织机构,制定一系列的法律法规,如美国、 ...
摘要:根据多肽固相合成的基本原理, 设计了2 套手工合成装置, 介绍了每套装置的操作方法, 并阐明了各种装置的优缺点和应用范围。
摘要: 蛋白多肽类药物的药代动力学与传统药物不同,目标蛋白多肽给药量小,而各种内源性蛋白含量很高,这种干扰使准确测量目标分子非常困难。此类研究必须以建立灵敏、专一、准确的测定方法为前提。本文综述了近年来研究蛋白多肽类药物的药代动力学各种分析方法,包括生物检定法、同位素标记示踪法、免疫分析法、液相色谱、气相色谱、毛细管电泳、质谱、核磁共振、液相色谱2质谱(LC2MS) 和毛细管电泳2质谱(CE2MS ...
摘要多肽抗生素是生物界中广泛存在的一类生物活性小肽,一般具有抗细菌或真菌的作用,有些还具有抗原虫、病毒或癌细胞的功能。按照化学结构的不同,多肽抗生素可分为5 类: ①具有螺旋结构的线性多肽; ②富含某种氨基酸的线性多肽; ③含有一个二硫键的多肽; ④含有两个或两个以上二硫键的多肽; ⑤羊毛硫抗生素。根据作用机理的不同,多肽抗生素又可分为裂解细胞膜的裂解肽和非裂解肽。多肽抗生素已经开始用于医药、食品 ...
摘要综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法, 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。
摘要目的:介绍多肽、蛋白质类药物缓释剂型的研究进展。方法:综述了近年来埋植剂(细棒型和可注射埋植剂) 及微球注射剂(多肽微球和疫苗微球注射剂) 研究与开发的品种及优缺点;介绍了两种实用的微球制备方法。结果与结论:以生物可降解聚合物为囊材的微囊化技术是开发研制控(缓) 释多肽、蛋白质微球注射剂的有效的途径,且颇有发展前途。
国内目前做肝癌检测试剂盒的公司很多,多数选择AFP.CEA.血清γ—GTⅡ但是这些检测项目和肝癌的相关性不是很高,目前还需要新的,特异性的标志物的出现! 1. AFP AFP是当前诊断肝细胞癌最特异的标志物。AFP是胎儿时期肝脏合成的一种胚胎蛋白,当成人肝细胞恶变后又可重新获得这一功能。由于孕妇、新生儿及睾丸或卵巢的生殖腺胚胎癌亦可出现,入AFP对肝细胞肝癌仅有相对特异的诊 ...
一、目的 为促进我国丙型肝炎病毒抗体诊断试剂质量的进一步提高,研制了第5套丙型肝炎病毒抗体诊断试剂国家参考品。 二、材料与方法 1、样品来源 样品来自国内13省市,从几十万个供血员中进行筛选。选取初筛中可能为抗HCV阳性或ALT异常的样品,及A值在抗HCV EIA试剂临界值附近的弱阳性或高值阴性样品;用多种试剂对收集到的2000多份血样进行复检,从中选出317份进行HCV RNA、抗HCV抗体谱、 ...
临床检验常见的标本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。 一、血液标本 有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。 1、外周血 一般选取左手无名指内 ...
一、拟和曲线 打开EXCEL软件;在工作表中 输入第一行: 浓度值, 如0 10 50 100 400 输入第二行:该浓度下的调整後的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42 选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线 ...
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 一、原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗 ...
1、DNA的分子大小及构型 不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。当琼脂糖浓度太高时,环状DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁 ...
DNA分子带负电,从琼脂糖凝胶的负极向正极泳动,速度依赖于其分子质量。小的紧密的DNA分子的较大伸展片断容易穿过琼脂糖介质。依据所要分离的DNA分子的大小来选择琼脂糖的浓度,例如质量浓度3mg/ml的琼脂糖用来做DNA大片段电泳(>20 000碱基)而0.8%只能电泳小的片断。 要注意以下几点: 1、 用移液抢将样品加至点样孔。每孔点样的体积一般少于25ul,因此吸取每一个样品时,操作要稳当 ...
Q:1.要测定打疫苗三次的抗体的变化,当ELISA标化后,是不是要用同一个抗原的包被浓度,同一个血清的稀释度,然后看OD值的变化?实验动物有多个,实验数据又如何处理呢? A:nanwxd网友观点: 关于是不是要用同一个抗原的包被浓度,同一个血清的稀释度,然后看OD值的变化? 这是肯定的ELISA做得很好的话批间CV都要有10~15%左右,最好用同一个抗原,但对于包被的抗原浓度对OD的影响不是很大, ...
ELISA即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。ELISA的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标 抗原(或抗体),而且 ...

