一、仪器设备 凝胶成像分析系统 ChemiGenius2。 二、仪器结构 见下图 三、原理 样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。 样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会 ...
一、 技术简介 活体生物荧光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项分子、基因表达的分析检测系统。它由敏感的CCD及其分析软件和作为报告子的荧光素酶(luciferase)以及荧光素(luciferin)组成。利用灵敏的检测方法,让研究人员能够直接监控活体生物体内肿瘤的生长及转移、感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。传统的动物实验 ...
体内荧光成像技术利用一架灵敏的照相机,检测活的整体小动物荧光团的荧光发射,从而获得清晰的图像。为了克服活组织的光子衰减,通常优先选取近红外区(NIR)的长波发射荧光团,包括广泛应用的小分子靛炭菁染料。NIR探针的数目最近随着有机、无机和生物荧光纳米颗粒的采用而不断增加。在体内荧光成像领域,成像策略和报道基因技术方面的最新进展包括一些改善探针特异性和亲和性的新技术以及调制和放大高灵敏靶点区域信号的新 ...
1、肿瘤细胞培养问题: 问:我养的肿瘤细胞,传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢?我总觉得细胞形态不好,但长的还挺快! 答:初代培养的细胞在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右,细胞增殖 ...
近年来兴起的活体生物发光成像技术随着背部薄化、背照射冷CCD技术的产生而产生,并随着该CCD技术的发展而发展。由于具有更高量子效率CCD的问世,使活体生物发光技术具有更高的灵敏度,可以方便的应用到肿瘤学、基因表达和药物开发等各方面。 从市场分析的角度,xenogen公司首先利用了先进的CCD技术来检测活体动物的生物发光,但是该技术的核心部件CCD并不是该公司的核心。进入该领域的技术和价格壁垒是CC ...
抗体(antibody,Ab)是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的终末B细胞--浆细胞合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗体是具有4条多肽链的对称结构,其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链),含450?550个氨基酸残基,相对分子质量在55000?70000之间;2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链),含210个氨基酸残基,相对分子质量约24000 ...
小分子抗原现在做的最多的是农药和兽药,这方面的文献也很多。以前查过一些材料,作者觉得小分子抗原能否制备出高性能的单克隆抗体主要以下几点决定。 1、对于半抗原结构的选择,如果待测物本身含有NH2,COOH,OH等活性基团,可以利用待测物活性基团加入间隔臂,然后联入载体蛋白就可以成功合成人工抗原,制备特异性良好的抗体。 但大部分待测物上并不含有活性基团或活性基团对药物的特异性和极性影响很大,所以大部分 ...
一、抗原多肽设计的基本原则 为了使生产抗体获得最佳效果,仔细地设计抗原多肽是很有必要的,设计应满足一个基本条件:在免疫过程中,该抗原既不会产生过强的免疫反应,同时又能产生出对感兴趣的蛋白有结合能力的抗体。尽管抗原设计是一个很复杂的课题,有诸多需要注意的细节,已超过了我们所能提供的范围,根据我们所积累的经验,有几点关键的基本设计原则可以提供给大家参考: 1、确定抗体的用途(应用)新开展一个研究项目, ...
1.3.1 总DNA提取 参照文献,用CTAB法提取植物总DNA。 1.3.2 PCR体系及反应条件 双重PCR反应体系:1×buffer,2.5mmol/L MgC12,0.25mmol/L dNTP,primers(0.4 μmol/L ZY1-35S,ZY2-EPSPS和0.4 μmol/L ZY3-NOS,ZY4-NOS),1.5units of Taq DNA P ...
The number of infertile couples has increased in recent years and is now estimated at 15–20% of all couples worldwide. Since its introduction into reproductive medicine in 1978 in vitro fertili ...
The following is an outline of the method that I use to manufacture injection needles for ES cell injection. I use high quality borosilicate glass obtained from World Precision Instruments (see vendor ...
Solutions CPRG Assay Buffer 50 mM KPO4 pH 7.5 5 ml 1M KPO4 pH 7.5 1 mM MgCl2 0.1 ml 1M MgCl2 up to 100 ml with Q store at room temperature 1M KPO4 pH 7.5 250 ml 1M KH2PO4 (monobasic) 68.05 g up ...
活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP,Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这 ...
1、使用范围 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。 朗伯-比耳定律 A =ECL 2、注意事项 ①空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊。如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液。 ②测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池。 ③在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个 ...
一、色谱的发展历史 色谱(chromatography)是一种分离的技术,随着现代化学技术的发展应运而生。20世纪初在俄国的波兰植物化学家茨维特(Twseet)首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中,植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同,因此在玻璃管中呈现出不同的颜色,这样就可以对各种不同的植物提取液进行有效的成分分离。到1907年,茨维特的论文用俄文公开发表,他把这种方法命名为chrom ...
离子色谱仪器一般由流动相输运系统、进样系统、分离系统、抑制或衍生系统、检测系统及数据处理系统等几部分组成。 一、离子色谱流动相输运系统 离子色谱仪器的输运系统包括贮液罐、高压输液泵、梯度淋洗装置等,与高效液相色谱的输运系统基本相似。 1、贮液罐 溶剂贮存主要用来供给足够数量并符合要求的流动相,对于溶剂贮存器的要求是: (1)必须有足够的容积,以保证重复分析时有足够的供液; (2)脱气方便; (3) ...
脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征,从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障。由于体外 ...
材料: 小鼠 器具: 饭盒、纱布、小剪子、小镊子、大镊子、大烧杯、平皿、研磨玻片、滤网、离心管(15/50ml)、6孔培养板、吸管、移液管、手套、微量加样器 试剂: DMEM(含血清)、无血清DMEM培养基、胰酶、PBS 准备: 酒精擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束。 操作步骤: 1、将小鼠断颈致死,置75%酒精泡2-3秒钟,取肝脏,置于盛有PBS的平皿中。 2、 ...
器械: 饭盒、烧杯、弯头解剖剪(2)、小镊子(2)、平皿(4)、毛玻片、滤网、离心管(15ml)、移液管、培养瓶、废液缸、PE手套、橡胶手套、冰盒 溶液: PBS、DMEM(含血清)、DMEM(free)、胰酶 动物: 小鼠 准备: 用酒精棉球擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束,提前半小时将培养液、胰酶37℃温浴。 培养过程: 1、两个圆皿中加入5ml的PBS培养液 ...
1、材料 猪甲状腺由锦州市屠宰场提供。F-12培养基(sigma公司);胎牛血清(天津血液研究所);胰蛋白酶(sigma公司);胶原酶Ⅳ(sigma公司);牛TSH (sigma公司) 2、方法 杀猪后迅速取出甲状腺1~2个,置于盛有75%酒精的烧杯中,用冰盒送至实验室(1小时以内)。立即置于pH为7.4的PBS缓冲液(含青链霉素)中,反复漂洗,直至漂洗液清澈透明。去除包膜及结缔组织,用 ...

