This is a collection of procedures and lore associated with staining mammalian tissue for bacterial beta-galactosidase. Unfortunately I can't attribute much of the development work since I was general ...
2mm tail biopsies are collected in 1X PBS (see recipes below) in a 1.5ml microfuge tube. Be sure to include a known +/+ (lac-Z negative) biopsy as a control. Replace 1X PBS solution over biopsy with 2 ...
流式细胞仪(flow cytometer,FCM)是进行流式细胞分析的仪器,它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论、细胞荧光化学技术及单克隆抗体技术于一体,被誉为实验室的“CT”。 流式细胞术则是一种在功能水平上对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析和分选的检测技术,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的 ...
在元素周期表中,一个元素占据一个位置。后来,科学家又进一步发现,同一位元素的原子并不完全一样,有的原子重些,有的原子轻些;有的原子很稳定,不会变,有的原子有放射性,会变化,衰变后成了另一种元素的原子。我们把这些处于同一位的元素但有不同性质的原子称为同位素。同位素中有的会放出射线,因此称放射性同位素。放射性同位素具有以下三个特性: 第一,能放出各种不同的射线。有的放出α射线,有的放出&b ...
Introduction 过去,研究人员为了确保凝胶结果完美需要进行辛苦的工作,通过不断重复进行保存凝胶,或者凝胶存档(a record of the gel)的工作,在记录他们辛辛苦苦得来的凝胶结果上花费了许多时间和精力。然而今天的我们已经不再需要如此手工化的操作了,我们可以利用许多商品化的凝胶成像系统快速而准确的记录下实验结果,并且可以方便地获得分析和组织实验的数据。而且凝胶成像系统也已经不仅 ...
一、图像摄取: 1. 启动电脑系统,打开灯箱开关; 2. 双击显示屏上的Bio-cap图标,进入图像摄取主画面; 3. 放入要摄取图像的样品(胶片、电泳胶等),按下步分别摄像; A、 核酸凝胶样品(要用紫外光板的),先移动CCD至暗箱到右边,单击画面的“integration time”钮,调整爆光时 ...
一、毛细管电泳的概述: 毛细管电泳又称高效毛细管电泳,它是在熔融的石英毛细管(内径为25~100m)中进行电泳,其管内填充缓冲液或凝胶,是近年来进展最快的分析方法之一。 毛细管电泳是电泳技术和现代微柱分离相结合的产物,它具有效率更高、速度更快、样品和试剂消耗量特少的特性。 毛细管电泳仪的基本结构: 1、 高压电极槽与进样机构 2、填灌清洗 ...
1.气路系统 由于气相色谱仪的检测器具有极高的灵敏度,其氢火焰离子化检测器(FID)可达到2×10-11g/s(正十六烷/异辛烷);热导检测器(TCD)可达到2000mV·mL/mg(正十六烷/异辛烷)。因此,保持气路系统的清洁、畅通、无泄漏,对于气相色谱分析的准确度和重现性有着极其重要的作用。 1.1 气源 无论是钢瓶气体还是气体发生器的气体,都必须经过气体过滤器才能进 ...
生物素-亲合素系统(Biotin-Avidin—System,BAS)是70年代末发展起来的一种新型生物反应放大系统。随着各种生物素衍生物的问世,BAS很快被广泛应用于医学各领域。1979年Guesdon利用生物素和亲合素间具有高度亲合力的特点,建立了标记亲合素和生物素法(LAB/BA)与桥联亲合素—生物素技术(BRAB)。1981年Hsu首次报告了改进的亲合素&mdash ...
毛细管电泳(capillary electrophoresis CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE) 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦 Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳 ...
毛细管电泳技术也称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)。是从传统电泳发展而来的新型高效的分析分离技术。1967年Hjerten最先提出区带电泳。1974年Virtanen提出用200—500µm内径的毛细管作电泳分离。 1981年Jorgenson和Lukace首先提出在细管径 ...
HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比,也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素 ...
均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。测定时将待测样品、酶标记物、特异性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行。依据实验原理可分为竞争结合法和非竞争结合法两种类型。 1、酶扩大免疫测定技术 ...
均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与酶结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。测定时将待测样品、酶标记物、特异性抗体和底物溶液加在一起,待抗原—抗体和酶底物反应平衡后,即可直接测定结果,无需分离步骤,整个检测过程都在均匀的液相内进行。依据实验原理可分为竞争结合法和非竞争结合法两种类型。 1、酶扩大免疫测定技术 ...
酶免疫分析(Enzyme ImmunoassayEIA)是标记免疫分析中的一项重要技术是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。作为经典的三大标记技术之一酶免疫技术在检验医学中得到广泛应用并不断得到更新,不断和其他先进技术如荧光、发光技术以及仪器自动化相融合,日臻完善许多自动化仪器实际上是EIA技术和其他现代化技术的复合 ...
一、仪器设备 凝胶成像分析系统 ChemiGenius2。 二、仪器结构 见下图 三、原理 样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。 样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会 ...
一、 技术简介 活体生物荧光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项分子、基因表达的分析检测系统。它由敏感的CCD及其分析软件和作为报告子的荧光素酶(luciferase)以及荧光素(luciferin)组成。利用灵敏的检测方法,让研究人员能够直接监控活体生物体内肿瘤的生长及转移、感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。传统的动物实验 ...
体内荧光成像技术利用一架灵敏的照相机,检测活的整体小动物荧光团的荧光发射,从而获得清晰的图像。为了克服活组织的光子衰减,通常优先选取近红外区(NIR)的长波发射荧光团,包括广泛应用的小分子靛炭菁染料。NIR探针的数目最近随着有机、无机和生物荧光纳米颗粒的采用而不断增加。在体内荧光成像领域,成像策略和报道基因技术方面的最新进展包括一些改善探针特异性和亲和性的新技术以及调制和放大高灵敏靶点区域信号的新 ...
1、肿瘤细胞培养问题: 问:我养的肿瘤细胞,传多少代以后不能用、需要重新复苏新的呢?我总觉得细胞形态不好,但长的还挺快! 答:初代培养的细胞在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10-50次左右,细胞增殖 ...
近年来兴起的活体生物发光成像技术随着背部薄化、背照射冷CCD技术的产生而产生,并随着该CCD技术的发展而发展。由于具有更高量子效率CCD的问世,使活体生物发光技术具有更高的灵敏度,可以方便的应用到肿瘤学、基因表达和药物开发等各方面。 从市场分析的角度,xenogen公司首先利用了先进的CCD技术来检测活体动物的生物发光,但是该技术的核心部件CCD并不是该公司的核心。进入该领域的技术和价格壁垒是CC ...