The following is an outline of the method that I use to manufacture injection needles for ES cell injection. I use high quality borosilicate glass obtained from World Precision Instruments (see vendor ...
Solutions CPRG Assay Buffer 50 mM KPO4 pH 7.5 5 ml 1M KPO4 pH 7.5 1 mM MgCl2 0.1 ml 1M MgCl2 up to 100 ml with Q store at room temperature 1M KPO4 pH 7.5 250 ml 1M KH2PO4 (monobasic) 68.05 g up ...
活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP,Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,让研究人员能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这 ...
1、使用范围 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。 朗伯-比耳定律 A =ECL 2、注意事项 ①空白溶液与供试品溶液必须澄清,不得有浑浊。如有浑浊,应预先过滤,并弃去初滤液。 ②测定时,除另有规定外,应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池。 ③在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个 ...
一、色谱的发展历史 色谱(chromatography)是一种分离的技术,随着现代化学技术的发展应运而生。20世纪初在俄国的波兰植物化学家茨维特(Twseet)首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中,植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同,因此在玻璃管中呈现出不同的颜色,这样就可以对各种不同的植物提取液进行有效的成分分离。到1907年,茨维特的论文用俄文公开发表,他把这种方法命名为chrom ...
离子色谱仪器一般由流动相输运系统、进样系统、分离系统、抑制或衍生系统、检测系统及数据处理系统等几部分组成。 一、离子色谱流动相输运系统 离子色谱仪器的输运系统包括贮液罐、高压输液泵、梯度淋洗装置等,与高效液相色谱的输运系统基本相似。 1、贮液罐 溶剂贮存主要用来供给足够数量并符合要求的流动相,对于溶剂贮存器的要求是: (1)必须有足够的容积,以保证重复分析时有足够的供液; (2)脱气方便; (3) ...
脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征,从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障。由于体外 ...
材料: 小鼠 器具: 饭盒、纱布、小剪子、小镊子、大镊子、大烧杯、平皿、研磨玻片、滤网、离心管(15/50ml)、6孔培养板、吸管、移液管、手套、微量加样器 试剂: DMEM(含血清)、无血清DMEM培养基、胰酶、PBS 准备: 酒精擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束。 操作步骤: 1、将小鼠断颈致死,置75%酒精泡2-3秒钟,取肝脏,置于盛有PBS的平皿中。 2、 ...
器械: 饭盒、烧杯、弯头解剖剪(2)、小镊子(2)、平皿(4)、毛玻片、滤网、离心管(15ml)、移液管、培养瓶、废液缸、PE手套、橡胶手套、冰盒 溶液: PBS、DMEM(含血清)、DMEM(free)、胰酶 动物: 小鼠 准备: 用酒精棉球擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束,提前半小时将培养液、胰酶37℃温浴。 培养过程: 1、两个圆皿中加入5ml的PBS培养液 ...
1、材料 猪甲状腺由锦州市屠宰场提供。F-12培养基(sigma公司);胎牛血清(天津血液研究所);胰蛋白酶(sigma公司);胶原酶Ⅳ(sigma公司);牛TSH (sigma公司) 2、方法 杀猪后迅速取出甲状腺1~2个,置于盛有75%酒精的烧杯中,用冰盒送至实验室(1小时以内)。立即置于pH为7.4的PBS缓冲液(含青链霉素)中,反复漂洗,直至漂洗液清澈透明。去除包膜及结缔组织,用 ...
Material and method: Material : 1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。 2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。 3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。 4、36电动恒温水浴。 5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清,转换生长因子(TGF-β1)(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒(10ug/m ...
1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁 2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟 3、生理盐水漂洗1次 4、D-hanks液漂洗1次 5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜 如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上 ...
实验材料: 眼科剪刀1把 眼科镊子2把 1×PBS约200ml M199培养液 离心机 5ml小皿 10ml大皿 实验步骤: 1、在超净台内用10ml的离心管分装5ml的1×PBS(已高压灭菌)。 2、手术台上取患者发生动脉粥样硬化改变的病变动脉,分放入准备好的PBS中,拿回实验室在超净台中,无菌条件下剥去外膜,用手术刀片刮去内膜,留下中膜并将其剪成1×1mm大 ...
取材及胶质细胞的混合培养 1、P2 SD大鼠经低温麻醉后以碘酒和75%乙醇消毒,无菌操作下,断头放入预冷的D-Hanks液中,在解剖显微镜下取大脑皮层并除去脑膜。 2、剪碎组织成1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min,中间摇晃一次。 3、随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的MEM+10%FBS(Glial Medium,GM)的离心管内终止消化液作用5min。 4、吸 ...
液体配制: 硼酸硼砂缓冲液:0.05M四硼化钠45ml,0.2M硼酸55ml,pH8.4; 胰酶-EDTA消化液:胰酶-0.125g;EDTA-0.2g;D-Hanks平衡盐液定容至100ml 所用的培养板、培养瓶或玻片预先经100μg/L多聚赖氨酸硼酸盐缓冲液于37℃包被4h,三蒸水洗三遍晾干备用。 操作步骤如下: 1、孕16d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤,依 ...
一、实验器材: 手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。 二、实验试剂: 无Ca+2和Mg+2的PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM加10%FCS。 三、实验动物: 孕期14至16天的孕鼠 四、实验步骤: 1、处死孕 ...
一、材料 所需液体:Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液。 试剂 Trypsin SDS DMEM 均购于 Sigma Chemical Co.小牛血清购于杭州四季青生物制品有限公司,其余均为国产分析纯。 取鼠:标准SD大鼠,鼠盆用棉铺好,取鼠。 物品:白大衣、饭盒 小剪子、小镊子(4套)(一套剪皮肤、一套开胸取心,一套剔除心缘纤维组织,一套剪碎心脏 ...
材料 相差显微镜,荧光显微镜,手术器械,雄性SD大鼠,体重250-450 g,戊巴比妥钠,200目尼龙网,小牛血清(或胎牛血清,则更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D-Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g/L,NaCl 8.0 g/L,NaHCO3 0.35 g/L,Na2HPO4.7H2O 0.06 g/L或Na2HPO4 ...
1.方法原理 2.薄层板 2.1手工自制板 2.1.1 玻璃板的要求 2.1.2 制作方法 2.2商品化供应的预制板和高效板 2.2.1板的尺寸 2.2.2预制板和高效板的预洗及活化 3.样品点样 3.1点状点样和条带点样 3.2样品点样位置 4.层析 4.1展开室 4.1.1直立式双槽展开箱 4.1.2 水平展开室 4.1.3 自动展开室(AMD) 4.2溶剂 4.3展开室状况 4.3.1方法A ...
一、保存 大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前,冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化,在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解 ...