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保留时间不重现有两种不同的情况：即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常 ...

1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。 2、对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。 3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。 4、带seal-wash的1100，要配制90%水+10%异丙醇，以每分2～3滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。 5、其它主意事项见说明书 ...

一.实验目的（略） 二. 实验原理 SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分 ...

一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 答： 关于漂移问题：　　1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。　　2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。　　3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题　　1． 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定。　　2． 泵中有气泡，可通过排气 ...

一、原理及目的（略） 二、试剂 1、30%丙烯酰胺贮存液：29g丙烯酰胺和1g NN’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中，验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中，4℃保存。 2、1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液 3、10% SDS溶液 4、10%过硫酸铵：新鲜配制 5、TEMED溶液：4℃保存 6、1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液 7、2&ti ...

【关键词】雌二醇 雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，为防止儿童性早熟等问题，食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显变化，所以它可以取代酶标记抗体〔1，2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定 ...

1、使用常规要求 pH：为了保证色谱柱长寿命，硅胶基质色谱柱的使用pH 范围是2～7，超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关，但是偏离2～7范围越远，色谱柱性能下降的越快。 温度：典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与 60℃之间，高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液：生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的pH值，仔细控制避免缓冲溶液与流动相有机溶剂混合时产生沉淀，色谱柱和HPLC系统不能储存在含 ...

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原；胶体金免疫层析法Gold-immunochromatography 【摘要】目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs)，制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤 ...

摘要：目的建立快速测定抗子宫内膜抗体（EMAb）的新方法。方法采用经Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（EMAg），以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫胶体金技术原理，建立斑点免疫渗滤法（DIGFA）检测人血清EMAb.共检测500份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果纯化的人子宫内膜抗原与患者血清 ...

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种高效广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康，能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病，低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。欧盟、美国等许多国家已明确禁止CAP用于生产动物源性食品，并制定了严格的限量标准。加入WTO后，农、兽药残留日益成为各发达国家限制 ...

因为样品中经常会含有能够吸附在色谱柱固定相上的杂质化合物，所以应该经常对色谱柱进行清洗或冲洗。当色谱柱在多次进样后显示出柱效降低时，有必要采用适当的流动相对色谱柱进行处理，冲洗除去吸附在固定相上的污染物和样品残余物。 方法如下： ●将色谱柱从系统上取下，反向连接到输液泵上。色谱柱出口不要连接到检测器上，以免污染检测器流动池。 大多数的硅胶基质色谱柱反相冲洗没有问题，但是聚合物基质色谱柱并不能如此操 ...

摘要：免疫胶体金技术是20世纪80年代发展起来的一种新型免疫标记技术，应用该技术制成的胶体金试纸条具有简便、快速、灵敏、特异性高等优点。文章介绍了胶体金技术的基本原理、制备方法、胶体金技术的特点以及利用该技术制成的胶体金试纸条在兽医临床上的应用。 关键词：胶体金；兽医临床；应用 免疫胶体金技术在人类医学上是一种常用的免疫标记技术，有其独特的优点。近几年来在生物医 ...

质谱，是一种分析方法，原理就是让带电原子、分子或分子碎片按质荷比的大小顺序排列，打出相应的谱线。待分析的样品分子在离子源中离化成具有不同质量的单电行分子离子和碎片离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能并形成一束离子，进入由电场和磁场组成的分析器中；其中离子束中速度较慢的离子通过电场后编转大，速度快的偏转小；在磁场中离子发生角速度矢量相反的偏转，即速度慢的离子依然偏转大，速度快的偏转小；当两 ...

单位：湖北医科大学病毒所临床病毒室，武汉430071 关键词：包埋前免疫胶体金技术；免疫电镜；I型单纯疱疹病毒；病毒抗原 摘要目的：探讨细胞内病毒抗原的超微定位的方法。方法：采用包埋前免疫胶体金方法标记I型单纯疱疹病毒(HSV-1)抗原以研究该病毒在人胚肺细胞(HEL)内的超微定位。结果：发现金颗粒约为5nm，大小均一，在HSV-1囊膜、内质网膜表面 ...

【实验目的】 1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。 2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术，用于分离蛋白质。 【实验原理】 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持物的一种电泳形式。单体-丙烯酰胺和交联剂-甲叉双丙烯酰胺相互作用可形成聚丙烯酰胺，该聚合反应以TEMED作为催化剂，以APS 作为引发剂。 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例可决定凝胶网孔的大小，交联剂所占比重越大，凝胶的网孔 ...

1、故障现象 用户反映YWG C18 10μ（4.6mmX150mm）色谱柱使用20天左右后，柱压升高约1Mpa左右，分离效果变差，用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。 色谱柱分离度不好，柱效不高，可能是用户分析发酵液，简单的过滤后进样分析，其中的蛋白质等可能没有去除完全，致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中，加之对沉淀的蛋白质没有及时冲洗，长时间后，破坏C18官能团，而且客户使用纯水长时间冲洗色谱柱 ...

一、方法 1、H.pylori配体固相硝酸纤维素膜的制备 H.pylor抗原室温融化后，12000r/min离心10min，取上清2mg/ml用0.01mol/L的PB缓冲液（pH7.2）以250μg/ml间隔，经BIO-DOT型XYZ3000点样仪dispenser线形包被于硝酸纤维素膜的观察结果的测试反应区，定义为检测带（T），距离检测带5mm远的质控带（C）用d ...

1、你需要的实验动物品种品系、年龄 2、是否有相应的实验动物动物质量合格许可证 3、发票 4、向对方了解实验动物运输方式（一般是空运）和到货时间5、提前了解到机场接货的程序和地点，做好接货准备（不提前准备的话，很可能因为繁琐的手续浪费大量的时间，导致实验动物滞留机场时间延长，气温、噪音等因素很可能导致实验动物因躁动斗殴、受惊吓等原因死亡） 6、最好有专车接送（理由同上） ...

我们一直用汽车调运大批１５公斤左右的仔猪，虽然路途远，时间长，但运输相当成功，死亡率都控制在２％左右。现将具体运输注意事项介绍如下，供养殖户参考。 1、猪源的组织：一车仔猪可装３００～５００头，要使这些仔猪在最短的时间内同时装起，必须先派人到各养殖场（户）联系，通知他们何时将品种、重量合适，并进行免疫接种的健康无病的仔猪送到装车地点，然后过称上车。需要说明的是养殖场（户）送来的仔猪一般都喂得比较饱 ...

在实验动物的运输过程中，由于恐惧与疼痛、饥渴、疲劳、通风不良、过度拥挤、长时间的旅程而得不到“安宁”等因素会引发动物发生应激反应。发生轻度的应激反应，动物可表现为体重下降、脱水及对疾病的抵抗力降低，严重时可影响动物的质量，甚至导致动物在运输途中衰竭死亡。 在运输的不同阶段，动物表现出的症状也不相同。初期动物在恐惧、疼痛、关禁、拥挤等应激因子的刺激下，表现不安、狂躁和敏感性增 ...