30%磷酸水溶液通过酸反应和强表面活性剂/洗涤剂的共同作用,可以有效地清洁不锈钢及其它润湿的部件。这一方法比更常用的硝酸“钝化”绝对更有效、且较少损害(特别是对日常使用低紫外波长的应用来说)。这一磷酸清洗步骤不是起钝化作用,但它是系统钝化前清洗的第一步。一般来说,对于阳离子的离子色谱分析或配有氧化方式的电化学检测器以外的应用不需要钝化系统。因为有真空脱气机(每个通道体积为8 ...
电泳前半小时进行以下工作: 1.检查冷凝系统,确认管道连接密闭,不漏气。 2.在电泳槽内加入约2.2升合适的电泳液。 3.接通主机和冷凝泵电源,开启主机开关,主机自检结束后,开启冷凝系统开关按“set temp”键调节需要的电泳温度,按“actual temp”显示实际温度。调节泵的速度为“100”左右。 半小时后: 4 ...
原理 在pH8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,在电泳时,由于电渗作用的影响,抗体球蛋白不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质带负电荷,将抗原置于负极,将血清抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。 本法由于抗原抗体分子在电场作用下定向运动,限制了自由扩散,增加了相应作用的抗原抗体的浓度,从而提高了敏感性,它较琼脂扩散 ...
【原理】 以醋酸纤维薄膜为支持物,用缓冲液润湿后,将微量血清样品点于膜上,再在电泳槽中进行电泳,可将血清蛋白分离成清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白五条区带,将薄膜置于染色液中,使蛋白质固定并染色后,可看到清晰色带,也可将色带分别于碱溶液中进行定量测定,再计算血清中各种蛋白质的含量百分数。 在正常情况下,这些蛋白质各占一定的百分比,在某些病理情况下, ...
高效液相色谱作为一种高效、快速的分离分析技术,具有灵敏度高、选择性好的特点,能解决医药分析领域中的诸多复杂问题。如何正确使用及排除故障,将直接影响整个高效液相色谱仪的质量和分析结果的可靠性。 本公司使用的LC-10AD岛津高效液相色谱仪,其主要由LC-10AD泵、SPD-10A紫外检测器、N2000色谱工作站组成。而故障常发生于泵和紫外检测器。 一、泵的故障及排除方法 1、泵压力变化较大或没有流动 ...
毛细管电泳(capillary electrophoresis CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE) 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦 Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳 ...
一、原位杂交( In Situ HybridizationISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分泌学、免疫学等领域及治疗评估和 ...
信号放大时间分辨荧光分析技术是一种新型的超微量的标记分析技术。它是以生物信号放大为基础,以镧系元素螯合物为标记物,以时间分辨和波长分辨为测量方法,充分利用了酶标记分析和PCR扩增等分析技术优点的技术。它的独特优点是非同位素和超灵敏度。本综述介绍了TRFA的特点以及酶放大、二次酶放大、铕纳米颗粒、滚动循环放大、免疫PCR和荧光淬灭分析等信号放大时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用。信号放大时间分辨荧光分析技术在生物分析中极其广泛的应用,显示出具有很好的发展前景。
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项 1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。其既有分子筛作用,在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。虽然价位很高,但由于性能颇佳,可再生利用,所以倍受亲睐。此外上柱样品损失很少,对处理小样品较好,这也是我们实验室常用的原因之一。 2 Sephadex LH20 的原理。 Seph ...
荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关,与其(受激发时)转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素 ...
注意 此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH>7.0)或酸性溶剂(pH<2.0)会导致柱子损坏。在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。 1.简介 此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。 反相(C8,C18,ODS,RP-8和RP-18)通常用于反相条件(水相)。 ...
正如人的心脏一样,高效液相色谱仪中的高压恒流泵必须能可靠的运转。但是要做到长时间低维护的可靠运转,就需要对泵有足够的了解,并注意与之有关的事项。 一、通常的设计 二、常见的问题 2.1气泡 2.2固体杂质 2.3密封圈的磨损 《高效液相色谱仪泵的维护与操作》下载 点击这里下载 ...
本文由生物秀根据华东理工大学生物工程学院的酶工程课件整理而成 一、实验流程 二、实验安排 第1次 菌体超声破壁、离心、包涵体复性、 装离子交换柱 第2次 测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次 浓缩、透析前、后样品测活、定蛋白 装分子筛柱 第4次 分子筛层析,并对收集样品进行测活、定蛋白等 第5次 对分离纯化各样品进行蛋白电泳分析,并绘出分离纯化表 三、实验操作 第1次: 菌 ...
《色谱柱和色谱系统的故障检修》下载 点击这里下载 ...
HPLC日常维护办法之一:压力异常 操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象,并在右侧的列表中参考相应的解决方法。 ...
一、目的: 1.学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。 2.掌握聚丙烯酰胺园盘电泳的操作技术。 3.比较醋酸纤维薄膜电泳与本法分离血清蛋白质的效果。 二、原理: (一)盘状电泳原理 盘状电泳是在区带电泳原理的基础上,以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物,采用电泳基质的不连续体系(即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性及电位梯度的不连续性),使样品在不 ...
液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装: 1、液相色谱柱的结构: a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英 ...
1. 色谱柱中的流动相会排干吗? 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可 ...
配件 典型的配件由螺丝和卡套组成——分别为连接和密封管子而设计。尽管功能简单,描述和使用它们却有些复杂。要确切描述一个配件,需要考虑以下几件事情:接收孔的形状(锥孔或平低孔);适用什么尺寸的管子;螺丝的螺纹,如10·32、1/4·28等。配件也可由度量单位分类或由材料类型分类。 不锈钢配件 不锈钢配件在使用中和设备中虽然受到限制,但它们仍然是许多 ...
要保持泵的良好操作性能,必须持续保持系统的清洁,确保使用的溶剂和试剂的质量,流动相进入流路前必须进行过滤和脱气。 预防泵故障需要持久不间断的努力: 1)、使用优质试剂和HPLC级溶剂,对泵对色谱柱都有好处; 2)、流动相和溶剂在使用前使用优质材料过滤; 3)、对流动相和溶剂进处理脱气; 4)、每次开始使用时要排气放空,工作结束后从泵及色谱柱中洗去缓冲液或有害物;不让水及腐蚀性溶剂等有害物质滞留泵及 ...

