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注意 此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂（pH>7.0）或酸性溶剂（pH<2.0）会导致柱子损坏。在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。 1．简介 此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相（非水）条件。 反相（C8，C18，ODS，RP-8和RP-18）通常用于反相条件（水相）。 ...

正如人的心脏一样，高效液相色谱仪中的高压恒流泵必须能可靠的运转。但是要做到长时间低维护的可靠运转，就需要对泵有足够的了解，并注意与之有关的事项。 一、通常的设计 二、常见的问题 2.1气泡 2.2固体杂质 2.3密封圈的磨损 《高效液相色谱仪泵的维护与操作》下载 点击这里下载 ...

本文由生物秀根据华东理工大学生物工程学院的酶工程课件整理而成 一、实验流程 二、实验安排 第1次 菌体超声破壁、离心、包涵体复性、 装离子交换柱 第2次 测酶活、定蛋白离子交换层析 层析样品进行浓缩、透析 第3次 浓缩、透析前、后样品测活、定蛋白 装分子筛柱 第4次 分子筛层析，并对收集样品进行测活、定蛋白等 第5次 对分离纯化各样品进行蛋白电泳分析，并绘出分离纯化表 三、实验操作 第1次： 菌 ...

《色谱柱和色谱系统的故障检修》下载 点击这里下载 ...

HPLC日常维护办法之一：压力异常 操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。 ...

一、目的： 1．学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理。 2．掌握聚丙烯酰胺园盘电泳的操作技术。 3．比较醋酸纤维薄膜电泳与本法分离血清蛋白质的效果。 二、原理： （一）盘状电泳原理 盘状电泳是在区带电泳原理的基础上，以孔径大小不同的聚丙烯酰胺凝胶作为支持物，采用电泳基质的不连续体系（即凝胶层的不连续性、缓冲液离子成分的不连续性、pH的不连续性及电位梯度的不连续性），使样品在不 ...

液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。 一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3/16英寸的内螺纹（国内外已规范化）。7/16英寸外螺纹与1/4英 ...

1. 色谱柱中的流动相会排干吗？ 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可 ...

配件 典型的配件由螺丝和卡套组成——分别为连接和密封管子而设计。尽管功能简单，描述和使用它们却有些复杂。要确切描述一个配件，需要考虑以下几件事情：接收孔的形状（锥孔或平低孔）；适用什么尺寸的管子；螺丝的螺纹，如10·32、1/4·28等。配件也可由度量单位分类或由材料类型分类。 不锈钢配件 不锈钢配件在使用中和设备中虽然受到限制，但它们仍然是许多 ...

要保持泵的良好操作性能，必须持续保持系统的清洁，确保使用的溶剂和试剂的质量，流动相进入流路前必须进行过滤和脱气。 预防泵故障需要持久不间断的努力： 1）、使用优质试剂和HPLC级溶剂，对泵对色谱柱都有好处； 2）、流动相和溶剂在使用前使用优质材料过滤； 3）、对流动相和溶剂进处理脱气； 4）、每次开始使用时要排气放空，工作结束后从泵及色谱柱中洗去缓冲液或有害物；不让水及腐蚀性溶剂等有害物质滞留泵及 ...

保留时间不重现有两种不同的情况：即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常 ...

1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（如ACN适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。 2、对于手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口，同时搬动进样阀数次，每次数毫升。 3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。 4、带seal-wash的1100，要配制90%水+10%异丙醇，以每分2～3滴的速度虹吸排出，溶剂不能干涸。 5、其它主意事项见说明书 ...

一.实验目的（略） 二. 实验原理 SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分 ...

一、问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 答： 关于漂移问题：　　1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。　　2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。　　3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题　　1． 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定。　　2． 泵中有气泡，可通过排气 ...

一、原理及目的（略） 二、试剂 1、30%丙烯酰胺贮存液：29g丙烯酰胺和1g NN’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中，验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中，4℃保存。 2、1.5mol/L Tris（pH8.8）溶液 3、10% SDS溶液 4、10%过硫酸铵：新鲜配制 5、TEMED溶液：4℃保存 6、1.0 mol/L Tris（pH6.8）溶液 7、2&ti ...

【关键词】雌二醇 雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，为防止儿童性早熟等问题，食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术(GICA)在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显变化，所以它可以取代酶标记抗体〔1，2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定 ...

1、使用常规要求 pH：为了保证色谱柱长寿命，硅胶基质色谱柱的使用pH 范围是2～7，超出此范围的色谱柱寿命与功能团结构有关，但是偏离2～7范围越远，色谱柱性能下降的越快。 温度：典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5℃与 60℃之间，高温使用会缩短柱寿命。 缓冲溶液：生物样品分离通常要求使用缓冲溶液控制流动相的pH值，仔细控制避免缓冲溶液与流动相有机溶剂混合时产生沉淀，色谱柱和HPLC系统不能储存在含 ...

关键词：乙型肝炎病毒表面抗原；胶体金免疫层析法Gold-immunochromatography 【摘要】目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs)，制成免疫层析检测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤 ...

摘要：目的建立快速测定抗子宫内膜抗体（EMAb）的新方法。方法采用经Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（EMAg），以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫胶体金技术原理，建立斑点免疫渗滤法（DIGFA）检测人血清EMAb.共检测500份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果纯化的人子宫内膜抗原与患者血清 ...

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种高效广谱抗生素，对多种病原菌有较强的抑制作用，常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康，能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病，低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。欧盟、美国等许多国家已明确禁止CAP用于生产动物源性食品，并制定了严格的限量标准。加入WTO后，农、兽药残留日益成为各发达国家限制 ...