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一、问：这段时间一直在做生物碱，流动相选择的是乙睛：0.02mol/l磷酸二氢钾（26：74），现在实验做完了，最后冲柱子。先长时间乙睛：水冲柱，再用甲醇：水冲柱，最后用甲醇冲柱。柱压一直很高，请问各位，是否不该这样冲柱？该怎样解决？ Jimmy_ok：乙睛和甲醇没有多大区别的，只是乙睛黏度小，对于柱子保护有利，当然价格也高些，个人感觉完全可以用甲醇替代冲柱（当然实验室有钱就另说了）。从你的流动相 ...

按柱子说明书的方法去做即可，进口柱一般都有详细说明。不同品牌的柱子可能不尽相同。我的phenomenex色谱柱说明书上把氰基柱列为正相柱（其实也可用于反相色谱），保存时用异丙醇或正己烷。柱效下降时的清洗程序为：用做正相柱时其清洗过程为氯仿、异丙醇、二氯甲烷10倍柱体积依次冲洗；用做反相柱时其清洗过程为5%乙腈水溶液、四氢呋喃、95%乙腈10倍柱体积依次冲洗。 氨基柱的使用： 需要注意的是，氨基柱的 ...

1)． 严格过滤色谱纯流动相，根据需要选择不同的滤膜。 2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气20～30分钟。 3)． 打开色谱工作站，连接好流动相管道，连接检测系统。 4)． 有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，冲洗时速度不要超过10ml/min。 5)． 调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大， ...

一台品质优良的液相色谱系统应从以下几个方面考虑： 一．主要技术指标优异 首先是如何看指标。液相色谱仪的指标很多，有泵的、检测器的、色谱柱等等。我们认为要看主要技术指标，根据国家标准，仪器的主要指标有噪音，漂移，最小检测浓度，定性定量重复性等。这些指标都要放在系统，回路里去看，去比较。就是需要把各单元装置都要联接好，如接好色谱柱，进样阀，并且要通上流动相。因为您在分析中也都是联接好以后才可以进行分析 ...

某些国产仪器在公布其技术指标时，大多只写了“噪音和漂移”的指标。用户觉得指标都差不多，但却忽略了另外二个较为重要的指标：“最小检测浓度和光程”，这二个指标有什么作用呢？它们代表了什么含义？ 这里来解释一下： 最小检测浓度是考验仪器的灵敏度。最小检测浓度数值大，仪器的灵敏度就小，不能反应真正的噪音和漂移水平。例如：有些仪器的最小检测浓度小于1&time ...

1、认真阅读色谱柱使用说明书； 2、使用填充良好的色谱柱； 3、尽量减少压力波动，避免机械及热冲击； 4、使用保护柱及在线过滤器； 5、经常以强溶剂冲洗色谱柱； 6、充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分； 7、用稳定的固定相（C18最稳定）； 8、在中等pH值操作时（6～8）， 用有机缓冲溶液； 9、色谱柱使用温度最好小于40℃； 10、硅胶基质的的色谱柱，应保持流动相的pH值范围 ...

一、保留值与分离度重现性不好原因分析 二、造成色谱峰（ 不对称）拖尾的原因1．色谱柱本身填装问题筛板堵塞或填料塌陷；2．柱头有污染；3．样品超载；4．样品溶剂不合适；5．柱外效应；6．化学或二次保留（硅羟基）效应；7． 缓冲容量不足或不合适；8． 重金属污染。 三、如何解决峰形拖尾的问题A. 与化学有关的拖尾问题1．流动相中，加入30mM的三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）， 未知 ...

色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是最佳条件），只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： 最好使用流动相溶解样品。 　　b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 ...

（一）保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温，必要时需配置恒温箱； 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱； 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液； 4.柱污染 每天冲洗柱； 5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相； 6.柱快达到寿命 采用保护柱。 （二）保留时间缩短 1.流速增加 检查泵，重新设定流速； 2.样品超载 降低样品量； 3.键合相 ...

1、流动相的抽作要求： 高效液相级色谱醇，二次蒸馏水，缓冲盐一定要过滤；　　流动相脱气至关重要（可采用抽滤，超声波脱气等方法）。 2、吸滤头： 特殊情况下可拆下滤头抽取以判断其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流动相通过吸滤头打出以判断其是否堵塞。若有堵塞情况可用异丙醇超声波清洗；清洗不成功则需要更换。 3、单向阀： 如遇到泵压不稳或流动相不能抽取，则可能是单向阀出现问题，卸下用异丙醇超声波清洗，清洗时 ...

1．HPLC的日常操作条件： 温度：10～30℃； 相对湿度<80%；最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 2．泵的保养： 1)使用流动相尽量要清洁； 　　2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗； 　　3)流动相交换时要防止沉淀； 　　4)避免泵内堵塞或有气泡。 3．进样器的保养： 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。 4．柱的保养： 1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或 ...

新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱） 1．将卡套架套入柱芯；　　2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套；　　3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片；　　4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧；　　5．然后依同样的顺序连 ...

免疫电泳（immunoelectrophoresis ）是将电泳和琼脂扩散结合起来，用于分析抗原组成的一种定型方法，具有灵敏快速的优点。该实验可分为如下两个步骤： 1.电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离。由于各种可溶性蛋白分子的大小、质量与所带电荷不同，在电场的作用下，其带电分子的运动速度具有一定的规律，因此通过电泳能够把混合物中的各种不同成分分离开。 2.琼脂扩散 电泳后在琼脂槽中 ...

基于膜的检测试剂研发人员应该严格考虑影响蛋白质在硝酸纤维素膜上结合众多因素，其中包括原材料的固有属性和处理过程等。 随着胶体金标记技术的发展、研发人员对胶体金快速检测技术深入研究，市场上基于膜的快速免疫层析检测产品的种类迅速增多。 虽然免疫层析产品的包装设计种类繁多，实际上目前主流的商品化检测试剂盒主要下面两种形式。最常用的检测形式为侧向层析 或者层析定量，这种检测形式通常应用于诊所或者由直销客户 ...

引言 色谱柱是HPLC分离过程的核心。一支稳定、高效的色谱柱对建立普适性强、重现性好的方法是必不可少的。不同供应商的色谱柱，甚至来源相同、认为完全一样的色谱柱之间，可能也会存在很大差异，尤其是不同的色谱柱在塔板数、谱峰的对称性、保留值、峰间距以及使用寿命方面会有所不同，而这些不同对建立理想的HPLC方法会产生很大影响。本章中，我们将提供一些有关色谱柱担体、固定相及柱填料的信息供读者参考；讨论色谱柱 ...

在新型免疫诊断产品的开发阶段，为保持蛋白质试剂在干燥和溶解状态下稳定而进行的实验至关重要。 对于IVD厂家来说，保持产品的质量和可信度是至关重要的。为确保他们生产出高质量的产品，公司实行严格的质量保证体系， 关键步骤符合国际质量体系标准，如原材料采购、生产、软件验证。 另一个同样重要的任务是确保在产品生产出来后一段长时间内，最终用户都能享受到高质量产品。公司为保证产品质量，在运输、仓储和产品使用过 ...

问：哪个公司的色谱柱好？ chromexpert： 色谱柱从大的分有气相用、液相用、毛细管电泳柱等。 气相柱：气相柱又分为填充柱和毛细管柱。　　进口柱主要有：Agilent、J&W等，种类众多、价格较贵。　国产柱：兰州化物所，北大化学系研制的色谱柱性能较好。　　国产柱已完全能与进口柱媲美。 液相柱：进口柱：agilent、waters、岛津等，价格较贵。waters的口碑最好。　　国产柱： ...

免疫诊断产品开发的基础——蛋白质，是一种生物大分子，它根据希腊神话中一位多变的艺术形象——Proteus（希腊海神）而命名。如同他们共通的名字所展示的那样，蛋白质具有改变自身构型的能力，不过这也导致了其活性的丧失。因此，例如抗体、凝集素、酶等蛋白质试剂所具有的特异性结合、催化反应功能，对在预处理、贮存、使用加工等操作过程中存在的潜在有害影响非常敏感。 ...

毛细管电泳是电泳技术和现代微柱分离相结合的产物，它具有效率更高、速度更快、样品和试剂消耗量特少的特性。

中药的真伪优劣直接关系到人民用药的安全和有效。在检验中药真伪方面通常采用的检测手段有形态鉴别、理化鉴别和光谱色谱分析等。而作为色谱技术一个分支的薄层色谱由于其独具的长处而被广泛应用于中药分析。自从《中华人民共和国药典》（1990年版一部）起，薄层色谱鉴别除有化学对照品作为鉴别药材的指标成分对照品以外，鉴于单一化学对照品不能反映药材的整体特征，一些多种植物共存的化学成分没有专属性，以及没有化学对照品 ...