名称:大鼠灌注取脑 标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠 灌注取脑 目的: 完整取出大鼠脑部(取材) 操作步骤 流程:1)麻醉 2)开胸 3)心脏左心室穿针剪开右心耳 4)生理盐水冲水 5)4%多基甲醛固定 6)取脑 7)保存或切片. 1 多聚甲醛的配置: 一般方法为:4%多聚甲醛PBS缓冲液配法:称取40g PFA溶于装有500ml DEPC水的玻璃容器(烧杯或烧瓶)中,持续加热磁力搅拌至60~ ...
问:本人正在做 L-丙氨酸苄酯的合成反应。请各位给点建议?具体方法或文献更好! 答:我只做过氨基保护了的、羧基游离的氨基酸。 1、Cs2CO3代替Na2CO3 2、PhCH2Cl一定要用重蒸过的。用PhCH2Br更好。 3、反应过程保持碱性(9-10)。 答:很简单,L-丙氨酸8.9(100mmol)tosl.ho219.9(105mmol)苄醇100ML 苯或甲苯50ML 回流2小时分水到理能 ...
名称:转基因小鼠模型的建立(SOP) 关键词:转基因小鼠 目的:在动物体研究转化基因 原理: 转基因动物是指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因称为转基因。转基因技术则是指制备转基因动物所需的一套技术,它涉及外源基因的构建、载体和受体的筛选、基因导人技术、供转基因胚胎发育的体外培养系统和宿主动物等许多方面。 当制备转基因动物时,外源基因可能只整合到 ...
名称:测定大鼠心肌AGEs含量标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠心肌;AGEs含量 目的:观察糖基化终末产物的生成量,用于判定药物对糖尿病心肌病大鼠的疗效。 主体内容: 制备心肌匀浆组织后→离心(3000rpm,10min,4℃)→弃上清,沉淀物用去离子水洗3次,加入5ml氯仿-甲醇(2:1)→放入摇床内,4℃振荡过夜后,加入2ml甲醇,0.5ml去离子水&rarr ...
问:请教一下诸位学习生化的高手:1. 必需氨基酸的一个主要特点是不是人体不能合成。2. 必需氨基酸包括那几种。我查了一下网上有7中到10种的不同说法。记得读书时书上是8种,这是怎么回事?3. 儿童的必需氨基酸与成人是否相同?有人说儿童的会多一些,如精氨酸对儿童就是必需氨基酸。谢谢了先。 答:应该是8种,定义:必需氨基酸是人体必不可少,而机体内又不有合成的,必须从食行中补充的氨基酸,称必需氨基酸。 ...
名称:内皮素-1诱导的局部脑缺血大鼠模型标准操作规程(SOP) 关键词:ET-1 局部脑缺血 SD大鼠 目的:本操作规程是关于利用内皮素-1诱导局部脑缺血大鼠模型对药物治疗脑缺血效果进行评价的具体操作规程。 原理:利用ET-1强烈的收缩血管效应,并在MCA附近位置注射,制作局部脑缺血模型。 主体内容:首先,大鼠通过腹腔内注射2%的戊巴比妥钠(40mg/kg)被麻醉,同时保持呼吸畅通。如果需要可补充 ...
名称:二袖套法大鼠肝移植标准操作规程(SOP) 关键词:大鼠;肝移植 目的:建立大鼠肝移植模型 主体内容: 1.术前准备 材料 供体最好为200~250 g雄性大鼠,受体最好为250~300 g雄性大鼠。 肝下下腔静脉及门静脉袖套管采用输液管制成袖套管提前作划痕以利于固定。胆管套管采用硬膜外管 显微器械一套 灌注液,保存液,肝素生理盐水 2.手术 取肝 供体术前不禁食用10%水合氯醛3ml/ kg ...
名称:大鼠肺动脉压检测方法 关键词:大鼠肺动脉压检测 目的:建立直接检测大鼠肺动脉压的方法 背景知识: 肺动脉高压是临床常见疾病近年来肺动脉高压的研究已成为许多学者瞩目的领域.但与检测系统动脉压不同肺动脉压的检测难度较大(特别是在小动物).本法应用自制末端呈弧形的PV-1肺动脉插管建立了直接检测大鼠Ppa的方法. 主体内容: 1.制备大鼠肺动脉导管:取长度约15cmPV-1管在其末端1cm处用火焰 ...
名称:重症急性胰腺炎动物模型制备 关键词:重症急性胰腺炎 目的:制作重症急性胰腺炎动物模型 背景知识:这是我师兄的课题中的部分,技术很成熟 原理:SAP的发病机理复杂,主要有胰酶异常激活、白细胞过度激活、胰腺微循环紊乱等学说,在造成胰腺损伤的同时,激活胰腺内的炎症细胞使其释放炎症介质,这些炎症介质逸入血液循环激活机体其他炎症细胞,释放大量的炎症介质,引起瀑布反应(cascade),促成全身炎症反应 ...
名称:2-AAF/PH(2-乙酰氨基芴灌喂+2/3肝切除)模型制作 关键词:2-乙酰氨基芴,肝切除 目的:制作制作肝卵圆细胞(肝脏干细胞)增殖的模型 背景知识:无 原理:肝脏是个再生能力非常强的器官,一般由肝细胞来完成肝再生,当肝损伤严重时,则启动为卵圆细胞增殖并分化为肝细胞和胆管细胞来完成肝脏再生。内源性肝脏干细胞是指存在于肝脏内具有增殖分化为肝细胞和胆管细胞的能力的一类细胞一般认为卵圆细胞是内 ...
问:咨询一下关于氨基酸保护方面的资料,请问哪里能找到啊,尤其是机理,谢谢。 答:有一本关于多肽保护的书,楼主可以在网上找找,再还有一本就是有机的官能团保护,这二本书可能机理讲得多一点,应会对你有点用处 答:氨基酸保护的很多的,通常-NH2保护,像Boc、fmoc等等。 ...
标题:小鼠肺泡灌洗标准操作规程 关键词: 肺泡灌洗;细胞分类计数;细胞因子 目的:检查小鼠各种病理生理状态(特别是肺部疾病)下,肺部 出现的各种病理改变。 例:哮喘模型中检测嗜酸细胞的分类数有否提高,灌洗 液中各种细胞因子,如IL-4IL-5IL-10IFN-r等水平。 主体内容(操作步骤): 实验的准备 实验的器材、仪器、药品:4℃遇冷的单纯PBS和4℃遇冷的含1%BSA的PBS; 手术器械: ...
名称:大鼠足底光热刺激潜伏期测定标准操作规程(SOP) 关键词:疼痛; 热刺激潜伏期;PWTL 目的及原理:本实验通过测定大鼠对强光照射足底因疼痛而缩足所需的时间来说明动物对痛刺激的敏感程度。 主体内容: 实验准备:热痛刺激仪(以BME-410A型为例),测试架(上铺玻璃平板),环境安静,室温保持在22-26℃,测量时间段一致(如早8点至晚6点之间) 操作步骤 1.实验前5 天每日将大鼠置于实验观 ...
问:复方氨基酸和支链氨基酸是怎样制备的?原料的来源是啥? 答:复方氨基酸是由人工合成的结晶左旋氨基酸根据临床需要以不同方式配制而成。含有14至20种氨基酸,但都包括8种必需氨基酸。可分为两大类:一类是适用于大多数病人的平衡氨基酸溶液,除含有8种EAA外通常含有6-10种非必需氨基酸,第二类复方氨基酸溶液的配方特殊,适用于某些特殊病人,如肾衰、肝病。支链氨基酸包括缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸。 答:氨 ...
问:组成抗原表位的一些氨基酸是疏水还是亲水的?为什么?还有组成信号肽的氨基酸是疏水还是亲水的?为什么?请高手赐教,感激不尽! 答:信号肽序列在10-40个氨基酸残基范围,其中部有一段长度为10-15个氨基酸殘基的由高度疏水性的氨基酸组成的肽链。一般蛋白质是很难通过脂膜的,但信号肽可引导它通过膜到达特定的部位。 组成抗原表位的氨基酸则不一定是疏水的。看看这段话就清楚了: The antigenici ...
问:在多种氨基酸混合后,用摇摆制颗粒,颜色发绿。后用糖衣锅(铜)也变绿,不知道是我 清场不彻底,还是本来就与铜有反应,该怎样避免呢?各位前辈指教。 答:氨基酸具有还原性,可被铜氧化。 答:氨基酸在铜催化下容易发生美拉德反应。 ...
一般用薄层色谱法。标准方法大致如下,供参考。 其它氨基酸:取本品,加水微热使溶解,制成每1mL中含XXXmg的供试品溶液,另取XXXX对照品适量,加水制成每1mL中含XXXmg的对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅤB)试验,吸取上述两种溶液各5uL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-水-冰醋酸(2﹕2﹕1)为展开剂,展开,晾干,在90℃干燥10分钟,喷以茚三酮的丙酮溶液(1→50),在9 ...
问:我在做HPLC测一个氨基酸的量,可是这个氨基酸会降解,所以很难办,不知道是否可以用什么固定剂将它固定,就像固定蛋白一样,向各位请教,急!先谢了。 答:只有蛋白可以固定,氨基酸没有什么固定的方法,不过你可以化学试剂把它修饰一下,让转变成稳定的结构。 ...
问:不好意思,请教一个简单的问题,试剂瓶上标DL××氨基酸,是否含有D-××氨基酸和L-××氨基酸各半? 答:DL氨基酸 应该是外消旋氨基酸,也就是L型与D型氨基酸各一半,旋光度为零的氨基酸。这种氨基酸生产工艺比单一旋光氨基酸简便,价格也便宜。这种氨基酸一般都是化学法生产的,D型跟L型的氨基酸可能大体上等量,也许旋光度并不正好 ...
对错误信号的处理和检测操作的优化的系统化处理方法的导言。 在近些年来,体外诊断产业(IVD)增加了巨大的投入来开发基于膜技术的快速检测试纸条。类似的的检测已经应用在临床和非临床领域。在早期的论文中 已有一篇是关于这些方法得到广泛应用的综述。 虽然基于膜技术的快速检测试纸条是相当简单的,但是此方法的实行的效果 依赖于大量的关键参数,在《体外诊断技术》的早期论文中已经探讨了金标液(gold conju ...