全部

从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物学活性。 一、原理 根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。 二、试剂和器材 1、tsk deae spw离子交换层析柱 ...

NMR（Nuclear Magnetic Resonance）为核磁共振。是磁矩不为零的原子核，在外磁场作用下自旋能级发生蔡曼分裂，共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程。核磁共振波谱学是光谱学的一个分支，其共振频率在射频波段，相应的跃迁是核自旋在核蔡曼能级上的跃迁。 基本原理 自旋量子数I不为零的核与外磁场H0相互作用，使核能级发生2I+1重分裂，此为蔡曼分裂。核磁共振是1946年由美国斯坦福大 ...

一、病毒性疾病(一) 小鼠肝炎病毒(Mouse hepatitis virus MHV)属冠状病毒科。自然宿主为小鼠，也容易感染裸鼠与免疫缺陷小鼠。可引起多种型式的病症，发病时无症状或昏睡，皮毛粗刚，厌食，或有神经症状。传染途径依不同型分为飞沫传染或经口传染。 造成研究干扰有导致免疫抑制或免疫刺激，抑制淋巴球增殖反应，抑制小肠淋巴组织Peyer’s Patch中B细胞免疫球蛋白的分泌。 ...

一、原理 葡萄球菌a蛋白（SPA）具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SPA-sepHarose cl-4b 柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 二、试剂器材 1、spa-sepharose cl-4b （pharmacia-sigma） 2、磷酸缓冲液0.1mol/l pH8.6＋0 ...

一、原理 deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50）为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白（等电点为pH6.85～7.5），其余均属酸性蛋白。pH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被deae- sephadex a-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通过柱层析， ...

核磁共振（NMR）在体内药物分析中，可用于药物及其代谢物的结构鉴定、代谢途径归属、定量分析以及药物与内源性物质相互作用的研究等。与其它分析方法相比，具有如下优点： ①简便性：无需对样品进行繁杂的提取或衍生化，减少了由此带来的误差； ②无损伤性：对取样量有限的生物样品经NMR分析后还可用于其它处理，甚至可对生物整体进行无损伤分析； ③连续性：NMR可对整体生物系统进行动态监测而不扰乱生物体内的各种平 ...

实施微生物和寄生虫控制的意义 实验动物携带的微生物及寄生虫有严格的控制，尤其是可引起实验动物爆发烈性传染性疾病的病原微生物，及引发严重侵袭病的寄生虫。即使是一般性的病原微生物和寄生虫的携带，都必须严格控制。目的是保证实验动物的品质，防止出现：一、动物及实验的损失。一些疾病，如鼠痘、犬细小病毒出血性肠炎、兔球虫病等会导致动物大批量的死亡，动物群体的健康素质下降，正在进行的科学实验被迫中止，造成难以计 ...

1、 血清加3倍体积的蒸馏水，调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下，加预冷的酒精（-20℃）到最终浓度为20%，保持在-5℃。产生的沉淀（a），含有大多数种类的免疫球蛋白。 2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15～20mol/l NaCl溶液（冷）中，加有0.05mol/l醋酸调节 pH到5.1，产生的沉淀（b），包括大部分的IgA和IgM，IgG留在上清液内。 3 ...

核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance），是指具有磁矩的原子核在静磁场中，受电磁波（通常为射频电磁振荡波RF）激发，而产生的共振跃迁现象。 1945年12月，美国哈佛大学珀塞尔（E. M. Purcell）等人，首先观察到石腊样品中质子（即氢原子核）的核磁共振吸收信号。1946年1月，美国史丹福大学布珞赫（F. Bloch）研究小组住在水样品中也观察到质子的核磁共振信号。两 ...

设计了一种零死体积的二通式柱尾结构和一种使匀浆填料均匀进入色谱柱管内的储料池，研究了制备内径在0.5 mm～1.0 mm的不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱的方法。详述了以不同牌号、规格的反相ODS类固定相制备的不同柱长的色谱柱的性能。通过折合板高/折合流速关系和不对称因子对柱性能进行了评价，结果表明，该方法制备的色谱柱柱效达到理论值的75%以上、RSD为6%，稳定性也很好。将其应用于抗癫痫药物和氯 ...

精制抗体的方法很多。一般采用综合技术，避免蛋白变性。如分离IgG时，多结合使用盐析法与离子交换法，以求纯化。提取IgM的方法也很多，如应用凝胶过滤与制备电泳法，或离子交换与凝胶过滤等。 一、原理 蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜层减弱乃至消失 ...

电化学发光免疫测定(electrochemiluminescence immunoassay，ECLl)是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。ECLI中标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同，是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光2个过程。ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应，而CL是通过化合物混合启动发光反应。在电化学发光免疫测定中应 ...

免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵提纯为基础，再经过层析柱的方法来提高免疫球蛋白及其各成分 ...

一、概念 电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassayECLI)。ECLI 是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术。电化学发光法源于电化学法和化学发光法，而ECLI 是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物，是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，包括了电化学和化学发光二个过程。ECL 不仅可以应用 ...

化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤，即化学激发和发光。因此，一个化学反应要成为发光反应，必须满足两个条件：第一：反应必须提供足够的能量（ 170 ～ 300KJ ／ mol ） ，第二，这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态，并且有足够的荧光量子产率。到目前为止，所研究的化学发光反应大多为氧化还原反应，且多为液相化学发光反应。 化学 ...

一种物质由电子激发态回复到基态时，释放出的能量表现为光的发射，称为发光（luminescence）。发光可分为三种类型：光照发光、生物发光和化学发光。 1、光照发光（photoluminescence）发光剂经短波长入射光照射后进入激发态，当回复至基态时发出较长波长的可见光（见第十七章）。 2、生物发光（bioluminescence）典型例子为萤火虫发光。反应底物为萤火虫光素（fireflylu ...

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物 ...

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物 ...

一、腹水 腹水重组后可加入少量叠氮纳等来阻止细菌生长。腹水应当冻存。单抗最好能够小包装保存以避免反复冻融。若要保存较长时间，则不要在4℃。和血清不同，腹水中含有蛋白酶，会使抗体效价下降，因此加入蛋白酶抑制剂可以选择。 二、纯IgG 不要稀释抗体后来保存，除非加入羊血清，BSA等后。IgG会和玻璃，塑料等粘附。当IgG的浓度小于0.1 mg/ml 会很快被吸收并变性，而失去活性。且反复冻融纯IgG肯 ...

【摘要】化学发光免疫测定方（Chemiluminescence immumo—assay，CLIA）重复性好、操作简便、快速、无放射性危害，临床很有价值。特异性阻断试验证明CLIA技术检测血清中抗原或抗体特异性强。敏感性试验结果表明CLIA方法检测血清中抗原或抗体的最低限度为0.05ng/ml，明显高于ELISA法和RIA法。 【关键词】化学发光标记免疫测定；酶联免疫吸附技术；放射免疫 ...