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        Purification of mAb (IgG)

        一、Materials 1、Antibody 7E3 2L sup grown in flasks frozen and thawed overnight. 2、BioRad Affi-Gel Protein A MAPS II Buffers cat. #1530-6160 ($161.00) 3、50 mM Tris pH7.8 4、40 g ammonium sulfate for e ...

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        多色微球液相芯片技术的原理及其应用

        多色微球液相芯片是一个多功能的液相分析平台,其有机整合了有色微球、激光技术、应用流体学、快速信号处理和数据分析系统,故特异度和灵敏度较高。目前,该技术已广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析及受体与配体的识别分析等领域中。 一、原理及优势 1、原理 多色微球液相芯片技术的分析基础是由微小的聚苯乙烯粒子组成的微球。这种微球结合了两种不同颜色的荧光染料(红色和橙色),当微球被635nm的激光照射后,能 ...

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        Coupling Antibodies to Protein A or G

        1、use 2 mg of antibody per ml wet beads (use appropriate antibody/protein A or G combination) 2、mix antibodies with beads and bind at room temperature for at least 1 hr (on roller) 3、wash the beads tw ...

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        Antibody Purification

        This protocol includes an ammonium sulfate cut affigel blue chromatography and affinity chromatography. 一、Solutions 1、Affigel Blue Prewash 0.1 M acetic acid 5.7 ml glacial acetic acid 1.4 M NaCl 81 g ...

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        Protein G Purification of Antibodies

        一、Reagent and Materials 1、Hi-Trap Protein G Column (Pharmacia Biotech #17-0404-01) 2、20 mM Sodium Phosphate Buffer pH 7.0 1.084 g NaH2PO4 anhydrous 3.273 g Na2HPO4.7H2O q.s. to 1 liter with di-H2O ...

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        Affinity Purification Of Antibodies

        一、Conjugation of carrier (BSA) to peptide 1、Dissolve pure BSA 20mg/ml in 10mM phosphate pH 7.0. 2、Dissolve MBS-SMCC 25mg/ml in NNdimethylformamide. 3、Mix 20ml SMCC and 200ml BSA (500mg:4000mg or 1:8) ...

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        Protein A Purification of Antibody

        一、Reagents 1、Affi-gel Protein-A Agarose (BioRad #153-6153) 2、MAPS II Binding Buffer (BioRad # 153-6161) 3、0.314 g/ml diH2O 4、MAPS II Elution Buffer (BioRad #153-6162) 5、0.023 g/ml diH2O 6、MAPS II Re ...

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        液相蛋白质芯片检测血清C反应蛋白方法的建立

        【摘 要】目的 建立液相蛋白质芯片检测血清C反应蛋白(CRP)的方法,探讨该方法诊断冠心痛的临床应用价值。方法 用聚苯乙烯荧光微珠,将抗CRP单克隆抗体包被在微珠上,将另一针对CRP不同抗原表位的单克隆抗体生物素化;包被好的微珠加入到96孔板中,将待测血清分别加入各孔,用CRP标准品建立标准曲线,各孔中加入生物素化抗CRP单抗和PE荧光素标记的链霉亲合素。在Bio-Plex液相蛋白质芯片分析仪上检 ...

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        细胞融合实验方案

        Fusion is an important procedure to produce monoclonal antibodies (MoAb). 一、PROTOCOL 1、prepare the culture of myeloma cells and maintain the concentration of the cells at the level of less than 10^6 c ...

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        液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的应用比较

        【摘 要】目的 比较液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的临床应用效果,并探讨液相蛋白芯片应用于临床检验的可行性。方法 分别用液相与固相蛋白芯片方法检测45例临床送检样本的AFP、CA125、CA242及CEA,对两种方法的操作步骤、有效检测范围、参考临界值及检测结果进行比较。结果 与固相蛋白芯片相比,液相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的操作至少节省1h,标本用量节省8 ...

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        嵌合抗CD20Fab’抗体片段诱导Raji 细胞的凋亡机制

        【摘要】目的 探讨嵌合抗CD20抗体Fab’片段的抗肿瘤机制。方法 应用MTT法检测Fab’片段对Raji细胞生长的抑制作用,用Annexin V-FITC和PI测定Fab’片段对Raji细胞凋亡的诱导作用,用RT-PCR和Western blot检测Raji细胞中bcl-2表达的变化。结果 嵌合抗CD20Fab’片段对Raji细胞具有明显的抑制作用 ...

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        液相芯片微流器件制备方法综论

        【摘要】 微流器件的制备是 液相芯片技术一项重要的相关技术。 分别简要地介绍了硅、玻璃和石英基片的机械加工法、光刻和蚀刻法与高分子基片的激光烧蚀法制备微流器件的原理和方法,以及实验结果。 【关键词】液相芯片 微流器件 机械加工 光刻和蚀刻 激光烧蚀 中图分类号: TH7 9&n ...

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        以肿瘤相关的血管新生为靶点抑制肿瘤的生长和转移的抗体

        血管新生(angiogenesis)是一个受严格调控的多步骤过程,导致从已存在的脉管系统形成新的血管,对肿瘤的生长及转移,均是必需的。通过抑制新血管生成,中断肿瘤的营养供给,达到治疗目的,它代表了近年来一种治疗肿瘤及其它与病理性血管生成有关的人类疾病的新策略。 血管内皮生长因子(VEGF)作为内皮细胞特异性的促分裂原是其重要的正调节因子,其生物活性被两种高亲和力的酪氨酸激酶受体,即Flt-1(VE ...

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        单链丝状噬菌体展示系统

        一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位点可供外源序列插入,即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋白质融合到PIII的N端时,噬菌体仍有感染性,但若融合到后一位点则会切去N端而丧失感染性,这 ...

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        多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统的建立

        【摘 要】目的通过建立多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,以期达到早期发现、早期诊断肿瘤的目的,提高肿瘤的治疗效果。方法根据Luminex公司所提供的实验流程进行荧光微球表面捕获抗体的包被,并对耦联效率和交叉反应进行鉴定,利用重组人肿瘤标志物蛋白纯品构建多指标联合检测的液相芯片的标准曲线,并与常规检查方法酶联免疫吸附实验(ELISA)进行对比。结果鉴定结果证实抗体包被成功有效,且无交叉反应的发生 ...

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        嵌合抗CD20 Fab诱导Raji细胞凋亡

        【摘要】为了研究嵌合抗CD20基因工程抗体Fab的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制,本研究利用3H掺入法测定嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞生长的影响,结果显示嵌合抗CD20 Fab对Raji细胞的生长具有抑制作用;利用流式细胞仪测定嵌合抗CD20 Fab诱导Raji细胞凋亡作用,结果显示嵌合抗CD20 Fab可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD20 Fab通过诱导Raji细胞凋亡的 ...

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        ZH-蓝星B脑立体定位仪(图)

        1、【仪器名称】:ZH-蓝星B脑立体定位仪。 2、【仪器型号】:ZH-蓝星B。 3、【生产厂家】:淮北正华生物仪器设备有限公司。 4、【检测适用范围】:它是利用颅骨外面的标志或其它参考点所规定的三度坐标系统,来确定皮层下某些神经结构的位置,以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、注射药物、引导电位等研究。动物脑立体定位仪是神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域内的重要研究设备,用于对神经 ...

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        鼠源单克隆抗体人源化进展

        摘要:应用单克隆抗体技术抗肿瘤的导向治疗是恶性肿瘤的生物治疗方法之一。本文先介绍了单克隆抗体的特点和构型及研究现状,而后从非结合型单抗、单克隆抗体偶联物(包括化学免疫偶联物、放射免疫偶联物、免疫毒素、抗体导向酶-前体药物疗法)和其它(抗体-细胞因子融合蛋白、微型双特异性抗体)等几方面分别介绍了抗肿瘤导向治疗研究进展,并对未来提出了展望和指出了今后的研究方向。 自从1975年Kohler和Milst ...

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        应用液相芯片分析肝细胞癌及癌旁组织小分子RNA表达谱差异

        【摘 要】目的运用液相芯片技术研究肝细胞癌(HCC)及毗邻癌旁组织中小分子RNA(miRNA)表达谱差异。方法常规抽提20例HCC及对照癌旁组织中总RNA,采用含有114种miRNA的液相芯片及配套的Luminex 100检测系统进行miRNA差异表达谱分析;选取部分筛选出的差异表达miRNA,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot分析其相对应的靶mRN ...

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        离体组织灌流浴槽(图)

        1、【仪器名称】:离体组织灌流浴槽。 2、【仪器型号】:SP-A12。 3、【生产厂家】:美国。 4、【检测适用范围 】:离体组织灌流。 5、【仪器使用优点、缺点】:通过控制组织液循环温度及养分含量,使组织保持存活,并在各种药物或其他外部环境条件变化时检测分析组织生化生命指标的变化,使用简单。 6、【仪器外观描述或者图片】: 7、【仪器维护及保养知识】:用完之后一定要将里面的液体清除,并清洗干净, ...

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