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液相蛋白芯片技术及其在免疫诊断和分析领域的应用进展

液相蛋白芯片技术由美国纳斯达克上市公司Luminex研制开发并于2O世纪9O年代中期发展起来,是在流式细胞技术、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)技术和传统芯片技术基础上开发的新一代生物芯片技术和新型蛋白质研究平台。液相蛋白芯片技术推动了功能基因组时代的蛋白质研究,相关的仪器、分析软件以及试剂盒研发备受瞩目并已形成一定的市场规模。现拟 ...

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动物人工呼吸机(DHX-150)(图)

1、【仪器名称】:动物人工呼吸机(DHX-150)。 2、【仪器型号】:DHX-150。 3、【生产厂家】:成都仪器厂。 4、【检测适用范围】:该呼吸机适用于大白鼠、豚鼠、仓鼠、兔、猫、猴及狗等实验动物因使用麻醉剂或打开胸腔后不能进行自主呼吸时帮助动物进行被动呼吸,以使生物机能实验顺利进行。 5、【仪器使用优点、缺点】:本动物呼吸机为可调容量正压呼吸机,以步进电机为动力,通过单片机自动控制,将气体 ...

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动物运动轨迹记录分析系统(图)

1、【仪器名称】:动物运动轨迹记录分析系统(ETHOVISION系统)。 2、【仪器型号】: ETHOVISION系统有三种规格:   1)ETHOVISION BASIC,记录一只动物在一个区域内的活动,黑白图像。   2)ETHOVISION PRO,可以记录两只动物在多达16个区域内的活动,黑白图像。   3)ETHOVISION COLOR-PRO,可以记录16只动物在多达16 ...

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Purification of Antiserum or Ascites by Protein A/G Chromatography

一、Required Materials and Equipment 1、Protein A or G agarose gel column (10 ml or 5 ml of packed beads; see guidelines below for choice of protein A or protein G) 2、Ice-cold Tris-buffered saline (TBS) ...

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同时检测多种病原之快速诊断鉴定技术(xMAP)

一、前言 对于人类重要疾病病原或动植物有害生物的首次鉴定确诊,通常需依循柯霍氏法则(Koch's postulates)进行,依此法则需满足四项条件:(一)在病患或罹病之动植物上能找到相同的病原;(二)由罹病体分离出来的病原应能纯化或培养;(三)纯化或培养出来之病原接种到实验动物体或相同之动植物时,仍会引起相同之疾病或病征;(四)发病后仍可自接种之实验动物体或动植物中分离出相同病原。但如每次确定病 ...

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Purification of mAb (IgG)

一、Materials 1、Antibody 7E3 2L sup grown in flasks frozen and thawed overnight. 2、BioRad Affi-Gel Protein A MAPS II Buffers cat. #1530-6160 ($161.00) 3、50 mM Tris pH7.8 4、40 g ammonium sulfate for e ...

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多色微球液相芯片技术的原理及其应用

多色微球液相芯片是一个多功能的液相分析平台,其有机整合了有色微球、激光技术、应用流体学、快速信号处理和数据分析系统,故特异度和灵敏度较高。目前,该技术已广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析及受体与配体的识别分析等领域中。 一、原理及优势 1、原理 多色微球液相芯片技术的分析基础是由微小的聚苯乙烯粒子组成的微球。这种微球结合了两种不同颜色的荧光染料(红色和橙色),当微球被635nm的激光照射后,能 ...

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Coupling Antibodies to Protein A or G

1、use 2 mg of antibody per ml wet beads (use appropriate antibody/protein A or G combination) 2、mix antibodies with beads and bind at room temperature for at least 1 hr (on roller) 3、wash the beads tw ...

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Antibody Purification

This protocol includes an ammonium sulfate cut affigel blue chromatography and affinity chromatography. 一、Solutions 1、Affigel Blue Prewash 0.1 M acetic acid 5.7 ml glacial acetic acid 1.4 M NaCl 81 g ...

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Protein G Purification of Antibodies

一、Reagent and Materials 1、Hi-Trap Protein G Column (Pharmacia Biotech #17-0404-01) 2、20 mM Sodium Phosphate Buffer pH 7.0 1.084 g NaH2PO4 anhydrous 3.273 g Na2HPO4.7H2O q.s. to 1 liter with di-H2O ...

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Affinity Purification Of Antibodies

一、Conjugation of carrier (BSA) to peptide 1、Dissolve pure BSA 20mg/ml in 10mM phosphate pH 7.0. 2、Dissolve MBS-SMCC 25mg/ml in NNdimethylformamide. 3、Mix 20ml SMCC and 200ml BSA (500mg:4000mg or 1:8) ...

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Protein A Purification of Antibody

一、Reagents 1、Affi-gel Protein-A Agarose (BioRad #153-6153) 2、MAPS II Binding Buffer (BioRad # 153-6161) 3、0.314 g/ml diH2O 4、MAPS II Elution Buffer (BioRad #153-6162) 5、0.023 g/ml diH2O 6、MAPS II Re ...

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液相蛋白质芯片检测血清C反应蛋白方法的建立

【摘 要】目的 建立液相蛋白质芯片检测血清C反应蛋白(CRP)的方法,探讨该方法诊断冠心痛的临床应用价值。方法 用聚苯乙烯荧光微珠,将抗CRP单克隆抗体包被在微珠上,将另一针对CRP不同抗原表位的单克隆抗体生物素化;包被好的微珠加入到96孔板中,将待测血清分别加入各孔,用CRP标准品建立标准曲线,各孔中加入生物素化抗CRP单抗和PE荧光素标记的链霉亲合素。在Bio-Plex液相蛋白质芯片分析仪上检 ...

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细胞融合实验方案

Fusion is an important procedure to produce monoclonal antibodies (MoAb). 一、PROTOCOL 1、prepare the culture of myeloma cells and maintain the concentration of the cells at the level of less than 10^6 c ...

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液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的应用比较

【摘 要】目的 比较液相与固相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的临床应用效果,并探讨液相蛋白芯片应用于临床检验的可行性。方法 分别用液相与固相蛋白芯片方法检测45例临床送检样本的AFP、CA125、CA242及CEA,对两种方法的操作步骤、有效检测范围、参考临界值及检测结果进行比较。结果 与固相蛋白芯片相比,液相蛋白芯片检测多肿瘤标记物的操作至少节省1h,标本用量节省8 ...

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嵌合抗CD20Fab’抗体片段诱导Raji 细胞的凋亡机制

【摘要】目的 探讨嵌合抗CD20抗体Fab’片段的抗肿瘤机制。方法 应用MTT法检测Fab’片段对Raji细胞生长的抑制作用,用Annexin V-FITC和PI测定Fab’片段对Raji细胞凋亡的诱导作用,用RT-PCR和Western blot检测Raji细胞中bcl-2表达的变化。结果 嵌合抗CD20Fab’片段对Raji细胞具有明显的抑制作用 ...

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液相芯片微流器件制备方法综论

【摘要】 微流器件的制备是 液相芯片技术一项重要的相关技术。 分别简要地介绍了硅、玻璃和石英基片的机械加工法、光刻和蚀刻法与高分子基片的激光烧蚀法制备微流器件的原理和方法,以及实验结果。 【关键词】液相芯片 微流器件 机械加工 光刻和蚀刻 激光烧蚀 中图分类号: TH7 9&n ...

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以肿瘤相关的血管新生为靶点抑制肿瘤的生长和转移的抗体

血管新生(angiogenesis)是一个受严格调控的多步骤过程,导致从已存在的脉管系统形成新的血管,对肿瘤的生长及转移,均是必需的。通过抑制新血管生成,中断肿瘤的营养供给,达到治疗目的,它代表了近年来一种治疗肿瘤及其它与病理性血管生成有关的人类疾病的新策略。 血管内皮生长因子(VEGF)作为内皮细胞特异性的促分裂原是其重要的正调节因子,其生物活性被两种高亲和力的酪氨酸激酶受体,即Flt-1(VE ...

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单链丝状噬菌体展示系统

一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒,pIII是病毒的次要外完蛋白(minor coatprotein)、位于病毒颗粒的一端,每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白,pIII有两个位点可供外源序列插入,即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋白质融合到PIII的N端时,噬菌体仍有感染性,但若融合到后一位点则会切去N端而丧失感染性,这 ...

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多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统的建立

【摘 要】目的通过建立多种肿瘤标志物联合检测的液相芯片系统,以期达到早期发现、早期诊断肿瘤的目的,提高肿瘤的治疗效果。方法根据Luminex公司所提供的实验流程进行荧光微球表面捕获抗体的包被,并对耦联效率和交叉反应进行鉴定,利用重组人肿瘤标志物蛋白纯品构建多指标联合检测的液相芯片的标准曲线,并与常规检查方法酶联免疫吸附实验(ELISA)进行对比。结果鉴定结果证实抗体包被成功有效,且无交叉反应的发生 ...

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