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标准品是标记免疫分析定量的依据。标准品的正确与否直接影响样品的测定结果。如果在连续测定中，或各实验室之间使用的标准品不一致，则可影响到实验结果的可比性。为此，对标记免疫分析所使用的标准品应满足如下要求。 1、化学结构：原则上标准品应与被测物具有完全相同的化学结构，包括相同的立体化学结构。但在实际工作中，用化学结构完全相同的物质作标准品是十分困难的。这是由于一方面来源有限，另一方面有些被测物本身的化 ...

最近 葫芦丝走天下兄 2f8c1兄在帖子中都谈到 让痉挛肌群做离心性收缩解决痉挛问题， 降低肌张力的方法 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=148&id=10613816&sty=3&keywords=%C0%EB%D0%C4%D0%D4%CA%D5%CB%F5瘫痪的运动分析与环境矫正 http://www.dxy.cn/bbs/pos ...

这幅图很精辟的解释了凋亡的内涵，所以放在第一张，各位慢慢体会。

细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。 一、Brachet反应一显示细胞内的DNA和RNA （一）原理 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且 ...

Kerr（ 1972）最先提出凋亡的概念，与细胞坏死的区别是： • ①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体； • ②凋亡小体内有结构完整的细胞器； • ③不引起炎症； • ④线粒体无变化，溶酶体活性不增加； • ⑤内切酶活化，DNA有控降解，凝胶电泳图谱呈梯状； • ⑥凋亡通常是生理性变化，而细胞坏死是病理性变化。 细胞程序性死亡（prog ...

基本原理 当一个粒子（生物大分子或细胞器）在高速旋转下受到离心力作用时，此离心力“F”由下式定义，即： F = m·a = m·ω2 ·r a — 粒子旋转的加速度， m — 沉降粒子的有效质量，ω—粒子旋转的角速度， r—粒子的旋转半径( cm )。 通常离 ...

问：细胞离心时要用多少转速及转多久比较合适，不会伤到细胞？谢谢。 答：消化离心一般1000转/3分钟，或800转/5分钟。 答：动物细胞， 其离心速率一般为300xg (约1000rpm)，5 - 10 分钟， 过高之转速，将造成细胞死亡。RPM和G是不同的概念，用G更科学；同样的离心力，转子半径不一样，RPM相差很大（与R平方成正比）。 答：细胞离心一般500G作用10分钟以内不会有太大问题（根 ...

线粒体和细胞核的制备与观察 利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来。（差速离心技术） 线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆，在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中（选用离心机的一定转速），球心颗粒的沉降速度取决于它的密度、半径和悬浮介质的黏度。在一均匀的悬浮介质中离心一定时间， ...

一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化学组成、理化特性及其功能的主要手段。 匀浆（Homogenization）低温条件下 ...

DNA测序原理和方法 DNA序列测定分手工测序和自动测序，手工测序包括Sanger双脱氧链终止法和Maxam-Gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今DNA序列分析的主流。美国PE ABI公司已生产出373型、377型、310型、3700和3100型等DNA测序仪，其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。本实验介绍的是ABI PRISM 310型DNA测序仪的测序原理和操作规 ...

1. GenBank属于一个序列数据库的国际合作组织，包括EMBL和DDBJ。是NIH遗传序列数据库，一个所有可以公开获得的DNA序列的注释过的收集。GenBank同日本和欧洲分子生物学实验室的DNA数据库共同构成了国际核酸序列数据库合作。唯一人类基因序列集合（UniGene），人类基因组基因图谱，分类学浏览器，同国立癌症研究所合作的癌症基因组剖析计划（CGAP）等数据库。GenBank以指数形式 ...

在过去的几年中，许多生物的基因组完成了测序工作，如何对如此庞大的原始序列信息进行分析和应用，正是现在最为棘手的问题。大量的基因预测软件和在线工具应运而生。如何广泛而深入地了解并能有的放矢地利用这些工具，已经成为21世纪分子生物学家的必修课。 随着大规模EST和cDNA序列信息的获取，那些基于表达序列同源范围的程序，在基因组注释中的作用日益显著。即使在稀少基因或组织特异性表达的基因中，基因组序列的相 ...

DNA测序的方法有很多种。目前最常见的是双脱氧终止法了。在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶。测序时分成四个反应，每个反应除上述成分外分别加入2，3-双脱氧的A，C，G，T核苷三磷酸（称为ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTP），然后进行聚合反应。在第一个反应物中，ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链，由于其3位的羟基变成了氢，所以不能继续延伸。 ...

DNA序列测定是分子生物学领域最重要的技术之一，是了解基因结构和功能的基础。DNA测序技术的不断完善和仪器自动化程度的不断提高，为大型基因组测序奠定了基础，当今大多数蛋白质序列都是通过基因或cDNA的核苷酸序列推导出来的。DNA测序方法主要有双脱氧链终止法（Sanger法）和化学降解法（Maxam－Gilbert法）。目前不管是传统的手工测序法，还是仪器自动测序法均使用前者，而仪器自动测序法以其快 ...

DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答：溶解DNA测序样品时用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应需要一个最佳的酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后在进行了测序反应时DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在溶解DNA测序样品时使用TE Buffer。的确，TE Buffer能增加DNA样品保存期间的稳定性， 但TE Buf ...

鸟枪法测序的操作方法 1、用限制酶切下目的片段的大片段Insert DNA 并用Agarose凝胶电泳进行回收。 2、对回收的大片段DNA用物理方法 (如超声波等) 进行切断处理，然后用T4 DNA Polymerase对小片段 DNA进行末端平滑化。 3、 进行Agarose电泳，切胶回收1 kbp ~ 2 kbp的小片段DNA。然后用BcaBest DNA Polymerase在DNA的 3' ...

1、流式细胞仪的分析速度： 一般流式细胞仪每秒检测1000～5000个细胞，大型机可达每秒上万个细胞。 2、流式细胞仪的荧光检测灵敏度： 一般能测出单个细胞上＜600个荧光分子，两个细胞间的荧光差＞5%即可区分。 3、前向角散射（FSC）光检测灵敏度： 前向角散射（FSC）反映被测细胞的大小，一般流式细胞仪能够测量到0.2μm～0.5μm。 4、流式细胞仪的分辨率： 通常用变异系数CV ...

常见传染病包括细菌性、病毒性传染病，常见寄生虫病实验动物细菌性传染病病原: 1人兽共患病病原菌是一级动物必须排除的病原菌. 2动物致病菌和条件致病菌是二三级动物要求排除的病原菌. 主要病原菌 (一)志贺菌属(Shigella) (二)沙门菌属(Salmonella) (三)波氏杆菌属(Bordetella) (四)巴氏杆菌属(Pasteurella) (五)分枝杆菌属(Mycobacterium) ...

流式细胞仪（flow cytometry，FCM）是集激光技术、电子技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器，具有灵敏度高、重复性好、特异性强、方法灵活、分析速度快等优点。我院自2000～2002年用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪，结合科研医疗开展了淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8、CD19、CD56）分析、白血病免疫分型、DN ...

流式细胞术（flow cytometry，FCM）自70年代中期就成为研究细胞生物学的重要技术，至今己被广泛应用于肿瘤学、免疫学、血液学、药物学等领域。FCM能对大数量的单个细胞同时进行多个物理和化学参数检测，其中包括细胞的大小、细胞内颗粒、细胞复杂性和细胞的相对荧光强度等。 我科使用美国BD公司生产的FACSC-ALIBUR流式细胞仪已有1年多，我们认为该仪器的性能稳定，操作简便，电脑软件设计较 ...