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问：我在做病毒纯化时，需先用超速离心，再用蔗糖密度梯度离心，求助高手用蔗糖密度梯度离心时的转速与超速离心时的转速有联系吗，是相等还是蔗糖密度梯度离心的转速要比超速离心的速度高？若为后者，那又若何决定蔗糖密度梯度离心时的转速？谢谢！ 答：1、病毒的纯化时，先用超速离心，你应该查一下资料，看在多大的转速时能够把病毒离心下来．那么你的这一步的转速应该至少不小于该转速，你这一步离心下来的沉淀中含有病毒和蛋 ...

问：各位战友，想问一下，RNA担取的过程中能用室温离心吗，为什么很多都要用冷冻离心的，冷冻离心的目的是什么呀，由于没有冷冻离心机，想用室温离心，想问一下这对提RNA有影响吗？ 答：室温离心会加速RNA降解，冷冻离心的目的就是降低RNA降解的速度，和将样品置于-80度冰箱保存以及加液氮研磨是同样的道理，都是尽量降低RNA降解的速度。 答：冷冻是为了减少RNA降解。但是感觉如果做RT-PCR的话对R ...

问：请教离心机的r是怎么得来的？说明书上没写，是不是以说明书上说的最大离心力和转速算出来的就是它的r？ 答：离心机的基本原理：物体围绕中心轴旋转时会受到离心力F的作用。当物体的质量为 M、体积为V、密度为D、旋转半径为r、角速度为ω（弧度数/秒）时，可得：F=Mω2r或 F=VDω2r （ω的2次方） 上述表明：被离心物质所受到的离心力与该物质的质量 ...

问：请教各位高手：超滤离心管可以反复使用多少次？使用一次后应该如何保存？用超滤离心可以把盐分彻底清除干净吗？我用的是3.5ml的超滤离心管，加样量正好3.5ml，4000rpm，40min，冷冻干燥后还是发现有很多盐分，这是什么原因？谢谢。 答：1、如果你用离心管浓缩一种蛋白，可以考虑使用，直到滤膜堵住为止。 2、离心管其实是一次性耗材，如果非要反复使用，可以考虑用碱处理一下，然后放到防腐剂里面保 ...

问：我看很多文献中涉及细胞离心时一般都是用多少克力来表示。请问这个单位和离心机的转速如何换算呢？应该与离心机的半径有关吗？特此请教大侠，谢谢！ 答；RCF（相对离心力）=0.00001118XRXN（2）（2为平方）；R为离心管底端到轴心距离；N为转速 例：离心半径12CM，转速2000R/MIN，RCF=0.00001118X12X2000（2）=536.64g 原理：F=W（2）XR----- ...

问：对于裂解、匀浆后的组织匀浆液，采用什么样的离心参数（转速，时间，温度）得到蛋白上清液比较好？ 答：我们实验室采用：4℃ 14000rpf 5min效果很好，但是要注意离心前后都置于冰浴中，以免你要提的物质（如蛋白）降解。 答：做4度10000rpf30分钟。我们实验室都是这么提取组织里的蛋白的。蛋白质的组织液一定要全程冰浴！ ...

问：终止消化过滤后离心，3000转/分 15分钟，离心管碎了，为什么呢？跟离心速度有关么?请大家帮忙分析。 答；如果没有猜错的话，你使用的是垂直离心机，我认为这个和角速度及离心力没有太大的关系，可能是你一次离好几管时，放置在一个大离心杯里的2－3个离心管因离心力相互挤压造成的，或者是大离心杯里的橡胶垫老化变硬，离心时也会挤压离心管。建议离心时，800－1000rpm，5min就可以离下细胞；或者往 ...

问：包含体先用TritonX100(1%)和尿素（2M）分别依次洗涤，12000转/分钟离心20分钟，为何包含体离心后不结实，离心后沉淀分层，下层结实，上层就不结实，请问是何原因？ 答：包含体洗净后应该是白色. 包含体抽提液应该是无色透明的. 但有时包含体洗不干净会略显黄色。 答：包含体应该很容易就离心下来的，分层很有可能就是细胞碎片（黄色的），多洗几次看黄色的那层会不会变少。 ...

问：FICOLL离心后分界面不清楚一般是什么原因？ 答：原因有很多种： 1.FICOLL没有室温平衡； 2.血液稀释时没有充分混匀； 3.加血的时候就分层不清； 4.血液抗凝不充分，细胞成块，建议采好血后室温放置半小时~1小时期间不时的混匀； 5.个体差异，同一种实验条件，不同来源血可能情况不一； 6.离心速度过小以致尚未完全分层，或离心期间速度不稳定； 7.降速太快，降速时间应5min以上。 ...

问：我的样品析出后，悬浮在母液中，不便将母液吸出，我就离心，母液中有氯仿，会腐蚀离心管吗？我这样操作行吗？ 答：不会腐蚀。离心管是聚四氟乙烯材料的，性质十分稳定。 答：我觉得离心效果不会很好，因为离心后的上层液也是浑浊的，可能有损失！ ...

问：我要在肿瘤细胞中提取一种酶.按药理实验技术操作：PBS洗涤后的细胞加入TMN buffer(10mM Tris.HclPH7.5 ，1.5mM MgCl2，10mM NaCl)，冰浴10min，加入 3% sarcosyl 后冰浴15min，时常振摇.2500 g离心20min，沉淀为絮状，且溶液呈粘稠状。无法去上清取沉淀。重复了几次都是一样的结果，我不知道怎么回事，请大家帮我分析一下。 答： ...

根据调亡的生化特征的检测方法 一、琼脂糖凝胶电泳 1）常规的琼脂糖凝胶电泳 方法一： 1．收集细胞（5×106）1000r/min，离心5min，去上清。 　　2．PBS洗一次，1000r/min，离心5min，去上清。 　　3．加细胞核裂解液500μl重悬细胞，50℃水浴，3～5h，不时振摇或37℃过夜。 　　4．加0.5ml平衡酚抽提，上下颠倒几次混匀，6000r/m ...

大豆的蛋白含量较高而且营养丰富，一般含蛋白30%——50%。大豆蛋白含有8种人体必需氨基酸，且比例比较合理，只是赖氨酸相对稍高，而蛋氨酸和半胱氨酸含量较低。目前大豆蛋白已成为一种重要的蛋白资源，特别是大豆分离蛋白含蛋白质90%以上，是一种优良的食品原料。大豆分离蛋白主要由11S球蛋白（Glycinin）和7S球蛋白（β-con-glycinin）组成，大约占整个大 ...

1、用异硫氰酸胍提取 提病毒的详细步骤，可参考（我提过N次做定量PCR都没问题）： 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管　　2、加600ul异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200ul氯仿，颠倒混匀　　3、13000rpm离心15min　　4、在第3步离心快结束时，另取同样多eppendorf管，加入400ul -20度预冷的异丙醇　　5、取第3步离心的 ...

1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。 2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。 3、重复2。 4、加入5ml DNA提取缓冲液，(10m mol/L Tris-cl，0.1 mol/L EDTA，0.5% SDS)，混匀。5、加入25ul 蛋白酶K，使终浓度达到100ug/ml，混匀，50℃水浴3h。 6、用等体积的酚抽提一次，2500r/min 离心收集水相。用等体积的（酚，氯仿，异戊醇）混 ...

（一）试剂准备 1．TRIzol试剂。　　2．氯仿　　3．异丙醇　　4．75%乙醇（DEPC H2O配制）　　5．DEPC H2O （二）操作步骤 1． 样品处理：　　（1）培养细胞：收获细胞1-5×107，移入1.5ml离心管中，加入1ml Trizol，混匀，室温静置5min。　　（2）组织：取50-100mg组织（新鲜或-70℃及液氮中保存的组织均可）置1.5ml离心管中，加入1 ...

狂犬病概述：狂犬病俗称疯狗病，又名恐水病，是由狂犬病病毒引起的犬、猫和其他动物及人畜共患的一种急性传染病。病的特征是，发病犬、猫表现狂燥不安、意识紊乱、攻击人畜，最后麻痹而亡。 一、流行狂犬病毒属于弹状病毒科狂犬病毒属，RNA型。病畜及带毒的野生动物是本病的传染病。病毒主要存在于病畜的唾液内，在临床症状出现前10-15天，以及临床症状消失后6-7天，唾液中均含有病毒。主要通过咬伤的伤口发生感染。现 ...

流行性出血热 本病由流行性出血热病毒感染引起的以发热、出血和肾脏损害为主要临床表现的人兽共患性烈性传染病。在野外主要是黑线姬鼠和褐家鼠，对实验动物来讲，主要感染大鼠。受感染的大鼠可向外界排毒，污染环境，从而危及动物饲养管理和动物实验人员的健康。 临床症状：大鼠感染后不表现临床症状，也不发生死亡。但多数动物可发生病毒血症，终生排毒。 病理变化：大鼠无可见的病理改变。人工感染乳小鼠和地鼠，可见广泛性充 ...

1 高效液相色谱仪的系统组成、工作原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相） 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器 ...

1、毕氏酵母氯化锂转化法 （1）试剂 1M LiCl（用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌；必要时用消毒去离子水稀释） 50% PEG3350（Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制，滤膜过滤除菌，用较紧的盖子的瓶子分装） 2mg/ml salmon sperm DNA / TE（10mM Tris-Cl pH8.0 1.0mM EDTA）-20℃保存 注：醋酸锂对毕氏酵母无效，仅氯化 ...