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儿茶酚胺类或其它体液加压物质注射等。这类模型造成的高血压时间短，不适于长时间的研究。应复制慢性实验性高血压模型。除遗传性高血压动物模型较能模拟人类高血压病的自然过程外，其它各类慢性实验性高血压动物模型（如神经原型、肾型、内分泌型和饮食型等），大多要经过一定的手术、药物或其他附加因素处理，与人类高血压病的临床不完全一致，但是对于筛选有效降压药仍然是十分重要的实验手段。实验中常用的动物为大白鼠和狗，猴 ...

模型建立方法： 将体外原代培养处于对数生长期的B16-F10黑色素瘤细胞，胰酶消化，用RPMI-1640培养液洗2遍，调至1×106/ml悬浮于RPMI-1640培养液中（台盼兰染色检测活性95％以上）。经眼球后静脉丛每鼠注射0.1ml含0.1ml 1×105个B16-F10黑色素瘤细胞悬液。 模型特点及功用： 可用于研究黑素瘤肺转移的治疗研究。 模型建立和使用注意事项： ...

目前，转基因技术可以器官选择性地对生殖细胞和体细胞进行目的基因导入或敲除并在此基础上完成转基因动物模型，应用这一技术可以发现一种或多种基因在胶质瘤发生发展中的单独及协同作用，为胶质瘤分子病理学和进一步的表达调控研究提供理论依据。从表达调控的角度来讲，阐明胶质瘤分子遗传学的异常演变对于确定治疗靶的十分重要。 生殖细胞修饰策略之一是通过基因转染的方法在实验鼠体内特定细胞类型中表达目的基因，伴随基因转染 ...

良好的（值得信赖）肿瘤动物模型对于评价抗肿瘤免疫治疗的疗效是至关重要的。目前肿瘤免疫学研究的趋势正逐渐远离传统的制备肿瘤模型的凡是，因为传统的肿瘤种植模型并不能充分地模拟人类肿瘤的发生。针对这种情况，已有许多转基因小鼠肿瘤模型的报到，这些转基因小鼠能自发地发生某种特定的肿瘤。这些模型通常采用了下列的技术，如采用组织特异性的启动子来启动SV40大T抗原或组织特异性的原癌基因的表达；通过基因打靶去除肿 ...

复制动物肿瘤的方法很多，如将实验动物用放射线照射或静脉、局部注射放射性同位素；使用各种化学致癌剂（烷化剂、多环芳香烃类、芳香胺类、氨基偶氮染料、亚硝胺类）；使用植物毒素（如苏铁素、黄樟素等）；使用金属（如铬、镍、砷、镉等）；使用RNA和DNA肿瘤病毒；使用多种致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最强者为黄曲霉素）等，均可诱发成各种肿瘤。 诱发性肿瘤模型其数量在诱发性动物模型中占首位。一般是利用致癌物质通过 ...

裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。 l楼主看来是做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注射0.1-0.2ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。 是牵涉 ...

建立理想的动物肿瘤移植模型是进行肿瘤防治研究的重要前提! 目前公认的胃癌造模的方法为采用完整组织块的(皮下移植法) “胃囊 法”，但传统的造模方法目前尚存在操作复杂)成活率低等缺点!本研究拟采用OB胶粘贴法更简便地建立人胃癌裸鼠原位移植模型. 点击下面的链接下载全文： ...

摘要 目的：以免为对象，建立电刺激致心脏骤停模型 方法：新西兰大耳白兔，用频率120Flz、波宽2．8ms、电流20mA的方 波刺激5s，使心脏骤停。电刺激的同时关掉呼吸机。3rain后打开呼吸机维持通气，等待心脏复苏。对不能自行复苏的心脏进行挤 压人工复苏。心脏复苏后连续观察120rain。并分别于实验前、心脏骤停时和复苏后记录血压、心电图的变化及血中自由基的含量 测定 结果：心脏骤停时血压骤降 ...

Cardiovascular disease remains one of the major causes of death and disability in the Western world. Tissue engineering offers the prospect of being able to meet the demand for replacement of heart va ...

1、做液闪仪测心肌细胞线粒体ANT转运酶活性检测，请问有没有非超声破膜的方法（没超声破碎仪）？ 2、若提得线粒体，如何看它有没有活性呢，用詹那绿B 就可以么？ 3、液闪仪大概需要多少样本量？ 丁香园网友dhh认为： 提取新鲜心肌组织细胞内线粒体的方案： 1、心肌组织切碎后在4℃介质（0.25 mol/L蔗糖、10 mmol/L Tris-HCl pH7.4，0-4℃）中制备心肌组织匀浆。匀浆经75 ...

ayao0问：前几天学习做细胞脂质体转染 看师姐是用的加血清的培养基，整个过程比以前的方法简单方便了很多 不用过四个小时就去换液，可以过了48个小时看转染效率很不好，以前也有人用这种方法做过，很成功。 到底这种新的方法行不行的通，做的时候需要注意哪些问题 丁香园网友kikie认为： 用的是invitrogen的lipofectamine2000，说明书上明确说可以用含血清的培养基： Prepare ...

pazj：我的细胞转染48h后在荧光显微镜观察，细胞形态还正常，消化传代以后加G418做稳转，加药以后头两天看，细胞形态还是正常的，但是第三天开始就缩小成小圆点了，感觉就和加胰酶消化后的细胞形态，不知道这个时候细胞是死是活？我还要继续加药吗？还是重新做转染？ 丁香园网友lanniaoxxx认为： 这种情况应该是细胞死亡的形态表现。建议仔细回想步骤，并查找文献，重新做转染 丁香园网友wlnju认为： ...

bioangelwx15问： 本人刚做慢病毒赶染实验，有些问题还不懂，想请教下大家，病毒感染细胞时是不是只要病毒的量够就行了呢？是不是病毒滴度大就少加病毒液，滴度小就多加呢？当然，前提是我要保证感染的细胞有充足的氧气供应，即使病毒液多加也有氧气供应，只是我不知道病毒浓度大小对感染细胞的效率有影响么？也就是说当病毒总量一定，病毒滴度大感染时加的量少和病毒滴度小，感染时加的量大，感染效率会不会一样呢？ ...

问： 有些细胞生长周期很长（如83hours），如果转入诱导其凋亡的质粒后，生长会更慢，细胞数目会更少，这类细胞用什么方法比较容易得到稳定细胞株？希望有经验的战友给予帮助，非常感谢！ 答： 如果你转入的是有诱导凋亡的基因，那么这时是得不到稳定细胞株的。建议你改用诱导表达型的载体，先筛选得到稳定的细胞株，然后在实验的过程中，当你需要激活基因表达时，只需要加入诱导剂（比如强力霉素等），这时你就可以观察 ...

问： 最近做细胞转染，预筛选稳定克隆，载体为pEGFP-N1，pIERS 现在是平行做几个基因，转然后，只有空载体和一个基因可以看到绿色荧光，其余均没有，这会是什么原因呢？怎么补救啊？ 答： 需要考虑的问题有： 1.你的细胞和转染的方法，是不是你的细胞本身就很难转染，有些细胞用脂质体转染率很低的。在求助时最好告知细胞和具体的转染方法和试剂。 2.质粒的纯度和质量：看你使用那种试剂盒提取的，我们的经 ...

问：我要用上清液做Elisa，但是上清液中的蛋白浓度不够，请问有什么方法可以把蛋白浓缩一下? 答：蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段，现介绍几种常用的浓缩技术。 1、透析袋浓缩法 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂 ...

qdshlyykqk： 我最近对肿瘤细胞转染GFP，其中不含有其他外源性基因。转染后短期内发现阳性细胞非常多，可是随着时间及细胞的增殖，培养孔内的细胞总数在不断的增加，但是发绿色荧光的细胞反而较以前少了（培养液中一直加着G418）。另外，转染后进行有限稀释单克隆的筛选，筛出来的单细胞长成克隆（大约1周）是发光的，但到两周的时候，荧光却消失了。请问这是什么原因？如果我想筛选出整合到宿主细胞染色体中的 ...

maoliping70：pEGFP-N1为载体表达的核蛋白要确证表达于核内的方法为用PI染色，PI只与核酸结合，在488nm激发下发红光，而GFP发绿光，红光与绿光重叠发黄光。还有以下疑问： 1.作为对照的pEGFP-N1空载体转染细胞后表达的GFP蛋白为27KD，能自由通过核孔复合体，也就是说GFP在核内也有表达，那会与PI重叠发黄光影响测定吗？ 2.有提出GFP在细胞固定时，会从细胞漏出，那细 ...

feiqi：最近我从别人处拿到一种稳定转染的细胞，他让我用G418稳定细胞系，但是我不知道我所拿到的细胞是否真的稳定转染了我所需要基因，怎么进行鉴定？谢谢！ 丁香园网友kevinfong认为： 第一，看看是不是G418抗性的。第二，采用Western检测你所需的基因是否表达，但必需和内源性的比较，如果这个细胞本身不表达你的目的基因那就不需要比较了。第三，你也可以提基因组做PCR看目的基因是否整合， ...

tydyhan： 我一直做细菌这块，对病毒操作不是很懂，请教大家： 建立表达某基因的重组逆转录病毒载体的B16细胞系 含某基因的重组逆转录病毒载体已获得，需转染PA 317包装细胞，通过G418筛选获得表达某基因的重组逆转录病毒。Polybrene进行转染B16细胞，筛选阳性转化克隆，获得稳定表达的B16细胞株。这里怎么具体进行操作?? 丁香园网友adychen认为： １、首先最好选择的是带ＥＧＦ ...