成人干细胞和再生(第五部分)
成人干细胞和再生(第四部分)
成人干细胞和再生(第三部分)
成人干细胞和再生(第二部分)
成年干细胞和再生(第一部分)
干细胞和衰老的终结(第四部分)
干细胞和衰老的终结(第三部分)
干细胞和衰老的终结(第二部分)
干细胞和衰老的终结(第一部分)
大约 30% 基因编码 MPs,膜蛋白占到新药物~50%的靶点。但MP’s 很难被成功表达,在成功解析出结构的蛋白中,只有<1%是膜蛋白。
Period基因(第三部分)
Period基因
VHCDR3基因文库和VL基因的扩增:设计并合成含有CDR3随机化序列的VHFOR引物。 配制2个50ul PCR反应混合液,1个用于VH基因的扩增。
PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库:用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌TGl株的试剂和设备FDSEQ引物。
构建人VH基因节段文库:配制3个各自独立的50ul PCR反应混合液,包含……在有加热盖的热循环仪内加热反应物到94℃,5分钟……在1.5%琼脂糖胶上胶纯化VH基因文库并用Genecleall试剂盒提取DNA.
再扩增VH基因文库添加3‘限制性位点并克隆创建VH基因节段文库:用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌的试剂和设备。
创建重链改组噬菌体文库:配制50ul PCR反应混合液,包含:Vent聚合酶缓冲液,VentDNA聚合酶。
人VL基因文库的构建:器材和试剂:PCR试剂和设备,cFv基因文库单链模板DNA,制备自pHENl中的天然scFv文库(10ng/u1),Gelleclean试剂盒。
创建轻链改组噬菌体文库:PCR试剂和设备,含有起始scFV基因的载体pHENl单链模板DNA。
平衡法选择高亲和力噬菌体抗体:器材和试剂:链霉亲和素磁珠,磁性1.5ml试管架。

