全部

试剂： RNA提取缓冲液（CTAB）：2% CTAB（W/V），2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP（W/V），100 mM Tris-HCl（pH8.0DEPC处理的水配置），25mM EDTA 0.5g/L 亚精胺Spermidine，2.0M NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）。由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制 ...

Introduction: The phage lysate from the plate contains bacterial DNA and RNA as well as phage DNA encased in the phage coat. The following procedure digests bacterial RNA and DNA precipitates the pha ...

1. suspend a single plaque in 1 ml PSB2. adsorb 10 min at 37°C: 0.1 ml eluted phagundefined/0.1 ml MgCa/0.1 ml saturated K802 culture grown in NZY broth/0.2% maltoseuse 10 ml of this to inoculate 2.5 ml ...

Inoculate 5 ml of lambda-broth in a glass culture tube with a single colony of an appropriate host strain of E. coli. Incubate the culture on a roller at 37°C overnight. Transfer the culture to ...

1. Grow a fresh overnight culture of lambda host cells (we use K803 for EMBL3) in LB or T-broth fortified with 10mM Mg++ .2. Mix a small amount (1 to 20μl aim for an M.O.I. of +0.01) of high titer ...

Purpose: Mini-prep method for lambda phage DNA purification from lysates. Time required: 4 hours once the lysate is in hand Special supplies required: BioRad Econo Columns (Cat.# 731-1550) Whatman ...

一. 液体培养法 1. 将指定之寄主细菌以液体培养法于适当温度下培养，一般培养16~24小时 2. 将噬菌体原液100 μl 与寄主细菌悬浮液300 μl均匀混合，静置15分钟使其感染。 3. 将混合液接至含10 ml新鲜液体培养基的试管中，于适当温度下振荡培养约8~24小时，培养时间依噬菌体之不同而异。 4. 将培养液移入离心管中，以10000 rpm (5000 g)离心10分钟 ...

材料： 1. 缓冲液和溶液：氯仿；NaCl（固体）；聚乙二醇（PEG 8000）；SM 2. 酶和缓冲液：胰Dnase I (1mg/ml)；胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6） 3. 离心机和转子：Sorvall GSA 转子或相当型号 4. 专用设备：量筒（2L） 5. 载体和菌株：大肠杆菌培养物，经λ噬菌体感染和裂解 方法： 用PEG沉淀噬菌体 ...

一、目的： 1. 了解噬菌体效价的含义及其测定原理。 2. 学会检查噬菌体的方法。 3. 掌握用双层琼脂平板法测定噬菌体效价的操作技能。 二、原理： 噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清，或在含有 ...

材料： LB或NZCYM顶层琼脂或琼脂糖，含有X-gal。对于3ml顶层琼脂，加40ul 2%X-gal。X-gal要在临用前才加入已冷却的顶层琼脂（47℃）中。 大肠杆菌铺平板细菌。只有不是β-半乳糖苷酶的过量表达株，可采用任何支持特异性λ噬菌体裂解生长的大肠杆菌。细菌染色体上单拷贝lacZ基因的存在不影响噬菌斑的检测。 方法： 1. 将λ噬菌 ...

肝癌是死亡率仅次于胃癌、食道癌的世界第三大常见恶性肿瘤。目前常用的肝癌诊断方法有影像学和生物标志物法，但是这些诊断方法的灵敏性和准确率都不够，以至于只有约30%的肝癌能被早期诊断出来。寻找灵敏高效的肝癌早期诊断方法对于肝癌的治疗有重大意义。 microRNA在1993年首次被发现。许多研究表明，在肝癌和癌旁正常组织之间存在microR ...

传统的光学显微镜使用的是场光源，标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰；激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点光源对标本内焦平面的每一点扫描，标本上的被照射点，在探测针孔处成像，由探测针孔后的光电倍增管（PMT）或冷电耦器件（cCCD）逐点或逐线接收，迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔， ...

液相芯片技术是20世纪90年代后期发展起来的被喻为后基因组时代的芯片技术。液相芯片技术将流式检测技术与芯片技术有机地结合在一起，一方面大大延伸了流式检测平台，以微球体代替细胞作为反应载体，这个相当开放的反应体系可进行蛋白、核酸等等生物大分子的检测，不仅从细胞水平深入到分子水平，其检测范围也得到了前所未有的扩展；另一方面也使芯片技术取得重大的突破：在保持高通量检测的同时，将反应体系由液相－固相反应 ...

光学显微镜是一种利用光学透镜产生影像放大效应的显微镜。 由物体入射的光被至少两个光学系统（物镜和目镜）放大。首先物镜产生一个被放大实像，人眼通过作用相当于放大镜的目镜观察这个已经被放大了的实像。一般的光学显微镜有多个可以替换的物镜，这样观察者可以按需要更换放大倍数。这些物镜一般被安置在一个可以转动的物镜盘上，转动物镜盘就可以使不同的目镜方便地进入光路，物镜盘的英文是Nosepiece，又译作鼻轮 ...

一、在细胞及分子生物学中的应用 1. 细胞、组织的三维观察和定量测量 共聚焦显微镜的分辨率超过普通光学显微镜，染色过程简便，可以在活细胞上进行无创伤性的染色，最大程度地维持细胞的正常形态。多种自发性的荧光染料，已被广泛地用于诸如RNA、DNA细胞核、线粒体、内质网、肌动蛋白、细胞膜等结构的标记。运用免疫荧光技术，将不同波长的两三种荧光物质标记在内部不同结构的相应抗体上，以这几种荧光物质特定的光谱 ...

叶绿素是一种二羧酸酯，在碱作用下，发生皂化反应；在弱酸作用下，叶绿素中镁可被H取代而成为褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则成为绿色的铜代叶绿素，叶绿素具有荧光，故从与入射光相垂直的方向观察叶绿素溶液呈血红色。叶绿素的化学性质不稳定，易受强光氧化，特别是当叶绿素与蛋白质分离后，破坏更快。 器材与试剂 器材：FS分液漏斗、移液管、试管与试管架、量筒、烧杯、酒精灯、滴管、药匙等。 ...

绿色植物的光合作用是在叶绿体中进行的，了解叶绿体色素的组成和性质对于理解光合作用的本质很有帮助。叶片中叶绿素含量与光合强度以及氮素营养又有密切关系。因此，测定叶绿素含量便成为研究光合作用与氮代谢必不可少的手段，在作物育种、科学施肥、看叶诊断中有着广泛的应用。 原理 当溶剂沿支持物不断向前推进时，由于叶绿体中不同色素分子结构不同，在两相(流动相与固定相)间具有不同的分配系数，因此它们移动速率不同。 ...

绿色植物的光合作用是在叶绿体中进行的，了解叶绿体色素的组成和性质对于理解光合作用的本质很有帮助。叶片中叶绿素含量与光合强度以及氮素营养又有密切关系。因此，测定叶绿素含量便成为研究光合作用与氮代谢必不可少的手段，在作物育种、科学施肥、看叶诊断中有着广泛的应用。 一、叶绿体色素的提取 原理叶绿体中含有叶绿素(叶绿素a与b)和类胡萝卜素(胡萝卜素和叶黄素)，这两类色素均不溶于水，而溶于含有水的有机溶剂 ...

激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器，与传统的光学显微镜相比，大大地提高了分辨率，能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品，通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值，Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标，对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本，不会对标本造成物理化学特性的破坏，更接 ...

显微镜是一种借助物理方法产生物体放大影像的仪器。最早发明于16世纪晚期，至今已有四百多年的历史。现在，它已经成为了一种极为重要的科学仪器，广泛地用于生物、化学、物理、冶金、酿造、医学等各种科研活动，对人类的发展做出了巨大而卓越的贡献。随着现代光电子技术和计算机的高速发展，显微测量技术在上业、国防、科技均得到了广泛应用。本文就对显微镜的发展及分类作个概述。 一、显微镜的历史 光学是研究光波传播规律 ...