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复制动物肿瘤的方法很多，如将实验动物用放射线照射或静脉、局部注射放射性同位素；使用各种化学致癌剂（烷化剂、多环芳香烃类、芳香胺类、氨基偶氮染料、亚硝胺类）；使用植物毒素（如苏铁素、黄樟素等）；使用金属（如铬、镍、砷、镉等）；使用RNA和DNA肿瘤病毒；使用多种致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最强者为黄曲霉素）等，均可诱发成各种肿瘤。 诱发性肿瘤模型其数量在诱发性动物模型中占首位。一般是利用致癌物质通 ...

蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学George Stark。Neal Burnette于1981年所著的AnalyticalBiochemistry中首次被称为Western Blot。最开始做印迹的是一个叫Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southern blot，后来出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个对蛋白质，人们分别把这两种技术的称为Northern和Western，与这两个技术的发明人没有关系了。

一、原理 SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即单核苷酸多态性，是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。据估计，在人类基因组中，大约每千个碱基中有一个SNP，无论是比较于限制性片段长度多态性(RFLP)分析还是微卫星标记(STR)，都要广泛得多。SNP是我们考察遗传变异的最小单位据估计，人类的所有群体中大约存在一千万个SNP位点 ...

早期的基因组DNA甲基化分析技术，如SssI甲基转移酶分析法、氯乙醛反应法、免疫学抗体技术等，已经不能满足现代表观遗传学研究的需求。今年来常用的基因组甲基化的方法有以下两种。

动物疾病模型的复制，是用人为的方法，使动物在一定的致病因素（物理的、化学的、生物的）作用下，造成动物组织、器官或全身一定损害，出现某些类似人类疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病，通过这种手段来研究人类疾病的发生、发展规律，为研究人类疾病的预防、治疗（包括新药物试用）提供理论依据。所以动物疾病模型的复制，在医学科学研究中占有十分重要的地位。 目前我国生物医学科学研究中，动物疾病模型主要 ...

1. 对每个基因设计并检测两到四个siRNA序列 为了找到潜在靶位点，扫描靶基因中的AA序列。记录每个AA 3’端19个核苷酸作为潜在siRNA靶位点。潜在靶位点需通过GENBANK数据库的BLAST分析，去除那些与其它基因明显同源的靶位点。如果可能，siRNA应根据mRNA低二级结构的区域设计。 2. 选择低GC含量的siRNA Ambion公司研究发现GC含量在40-55%的si ...

在一个典型的native PAGE方法中，复合物被CN-PAGE或BN-PAGE分离。然后可以用其它分离方法如SDS-PAGE或等电聚焦做进一步分离。随后切割凝胶，蛋白复合物每一个部分都被分开。蛋白的每个条带可以消化后做肽链指纹图谱或重新测序。这样就可以提供一个蛋白复合物中单个蛋白的重要信息。

1.环境保持安静 2.豚鼠临界温度为低温-15℃，高温32℃，温度中性范围30～31℃，豚鼠适宜温度为18～29℃。因此饲养室温度应控制在18～29℃的范围内，最适为18～22℃，湿度40～70％。 3.较早期的饲养一般采用的方法为池养，即在地面上用水泥或铁丝网、木板等做成围栏，长和宽各为一米，高为0.4米，即可饲养豚鼠。其优点是容易操作，成本低; 带不锈钢笼的冲水笼架，分层饲养可节省空间，便于 ...

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Western杂交时，为确认蛋白是否转至PVDF膜上，可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。 1. 氨基黑染色 染液：0.5% Amido Black (w/v) 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid. 染色：将PVDF膜置于染液中染色数钟，ddH2O 脱色。 2. 考马氏亮蓝染色 染液：0.1% Coomassie Brilliant ...

测微尺的使用: 测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺，两尺配合使用。目镜测微尺是一块圆形玻璃，中心刻有一尺，长5~10mm，分成50~100格。每个所代表的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。镜台测微尺是在一块载玻片的中央，用树胶封固一圆形的侧微尺，长1~2mm，分成100或200格。每格实际长度为0.01mm（10μm）。当用目镜测微尺来测量细胞的大小时，必须先用镜台 ...

原理 补体能使溶血素（抗绵羊红细胞抗体）致敏的绵羊红细胞（SRBC）发生溶血，当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时，溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此，将新鲜待检血清做不同稀释后，与致敏红细胞反应，测定溶血程度，以50%溶血时的最小血清量判定终点，可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比100%溶血灵敏、准确。 材料 1.待检人血清：静脉抽血，待凝后立即分离血清进行测定或-70℃保存。 2. ...

1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点： ① 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错 ...

T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶，它可以催化平端DNA片段的连接（Sgaramella和Khorana1972;Sgaramella和Ehrlich1978），由于DNA很容易成为平端，所以这是一个极为有用的酶学物性。有了这样的物性，才能使任何DNA分子彼此相连。 优点： 1、没有连不上的，只有切不开的。平末端连接不牵扯到粘性末端的碱基突出问题，所以，理论上任何两条DNA序列都能 ...

和光纯药工业株式会社 基因研究所 西部隆宏、吉居华子 前言 免疫沉淀法，是利用固相化在磁珠上的抗体与抗原（目的蛋白质）发生沉淀反应原理使蛋白分离、纯化。此方法不仅用于抗原蛋白质的纯化，还可以与抗原蛋白质相互作用，令蛋白质、核酸共沉淀，可应用于蛋白质间的相互作用、染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation: ChIP）、RNA免疫沉淀（RNA Immunopreci ...

为让中国用户能够更好的熟悉和掌握PeproTech的ELISA试剂盒及其技术，PeproTech专门制作了"ELISA操作指南视频 "，供各位老师和同学观摩！ 视频网址为 ：http://v.youku.com/v_show/id_XMzQ3Mzk3NTg4.html 或 http://www.tudou.com/programs/view/tzU8m93o0tI ...

1．引言 细胞培养液提供了细胞或细菌生长和繁殖所需的各种营养物质，包括葡萄糖、乳糖、氨基酸、蛋白质等，指示着细胞或细菌实时的生长状况。为了保持细胞或细菌的正常生长，对体系内的营养物质含量进行实时、快速地在线监测就显得至关重要。 传统的检测手段通过取样，采用生化分析仪等方法得到各营养物质的含量，分析一个样品大概需要20～30分钟，显然无法满足实时监控的要求。拉曼光谱法分析的是分子的非弹性散射光，可 ...

一、第一向等电聚焦 1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。 3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。 4. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条（17cm pH 4-7），室 ...

一、实验原理 双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与cuso4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质 ...

1、铺平板感染培养物的制备： 对直径为10cm的培养皿，取105pfu的噬菌体（通常约为一个噬菌斑重悬液的1/10或一个大噬菌斑重悬液的1/100）与0.1ml铺平板细菌混匀。 对直径为15cm的培养皿，去2×105pfu的噬菌体与0.2ml铺平板细菌混匀。 至少要置一个含为感染细胞的对照管，将感染培养物和对照均置于37℃培养20min，将病毒吸附到细胞上。 如果制备不易生长的&la ...