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急性实验性高血压模型常选用狗、猫、大白鼠、家兔和猴。复制的方法很多，如直接刺激中枢神经系统，通过神经反射、外源性儿茶酚胺类或其它体液加压物质注射等。这类模型造成的高血压时间短，不适于长时间的研究。应复制慢性实验性高血压模型。除遗传性高血压动物模型较能模拟人类高血压病的自然过程外，其它各类慢性实验性高血压动物模型（如神经原型、肾型、内分泌型和饮食型等），大多要经过一定的手术、药物或其他附加因素处理 ...

肿瘤个人化治疗成功与否很大程度上取决于其肿瘤基因的突变类型。在德国一个实验室中，罗氏GS Junior测序系统被用于肿瘤个人化治疗研究中，通过对临床治疗相关的外显子DNA进行测序，鉴定肿瘤组织的基因组突变类型，为后续的抗体治疗药物提供用药指导。

遗传性耳聋是人类听力系统最常见的疾病之一，其中有一部分与X染色体相关。在American Journal of Human Genetics发表的一篇文章中[1]，德国研究人员利用一系列研究方法，包括NimbleGen定制型385K芯片进行序列捕获，从一个西班牙患病家族及一群德国患者的样本中发现了X染色体上一个疾病相关的突变。

抗体稳定剂是许多研究应用中有用的工具。只要抗体能够保持天然构象，抗体就可以特异的结合到靶抗原上并且具有很强 的亲和力。将抗体保存在室温会破坏其结合活性，甚至4°C也不例外。常用的避免破坏活性的方法是冷冻抗体。但是，任何冻融的过程都会减少一部分抗体的活 性。多年来，另一种常用的保存方法是将抗体保存在含有牛血清白蛋白（BSA）的溶液中。但是，许多抗体在冷冻或添加BSA后依然不稳定。 目前，新 ...

验教学中最常用的仪器，频繁使用之后会出现一些故障，使显微镜无法正常使用。由于显微镜是一种精密贵重仪器，不可能随时添置和更新。因此，及时排除故障，使它经常处于完好的工作状态就显得十分重要了。笔者在几年的生物实验教学中，总结了显微镜一些常见故障的修理办法，供大家参考。 一、粗调失灵 故障现象是当转动粗准焦螺旋时，镜筒不能随之升降。显微镜镜简的升降是靠齿轮带动因条来实现的，而齿轮固定在粗调旋钮的转轴上 ...

各种高脂血症、动脉粥样硬化症动物模型的特点：除田鼠和地鼠外，一般温血动物只要用适当的方法，都能形成动脉粥样硬化的 1. 兔 是最早用以制造高脂血症和动脉粥样硬化症模型的动物，至今仍然多被采用。它对外源性胆固醇的吸收率高，可达75～95%，大白鼠仅为40%，对高血脂的清除能力低，静脉注入胆固醇后脂血症可持续3～4天，大鼠仅为12小时，狗介于两者之间。只要给兔含胆固醇较高的饲料，不必附加其它因素，经 ...

在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大 ...

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。这种结构为真核mRNA的提取，提供了极为方便的选择性标志，寡聚（dT）纤维素或寡聚（U）琼脂糖亲合层析分离纯化mRNA的理论基础就在于此。 mRNA的分 ...

限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的DNA序列位点上并在此切割双链DNA。绝大多数限制性内切酶识别长度为4、5或6个核苷酸且呈二重对称的特异序列，切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异。一些酶恰在对称轴处同时切割DNA双链而产生带平端的DNA片段，另一些酶则在对称轴两侧相对的位置上分别切断两条链，产生带有单链突出端（即粘端）的DNA片段。1个单位限制性内切酶是指在最适条件下，在5 ...

一、试剂 1. 试剂甲：碱性铜试剂溶液中，含0.5n NaOH、10%Na2CO3、0.1%酒石酸钾和0.05%硫酸铜，配制时注意硫酸铜用少量蒸馏水溶解后，最后加入。 2. 试剂乙：与前面的基本法相同。临用时加蒸馏水稀释8倍。 3. 标准蛋白质溶液：同基本法。 二、操作步骤 测定标准曲线与样品溶液的操作方法与基本法相同。只是试剂甲改为1毫升，室温放置10分钟后，试剂乙改为4毫升。在55℃恒温水浴 ...

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 一、原理 与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记 ...

λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染；其二是溶源性生长，即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体DNA中与之一起复制，并遗传给子代细胞，宿主细胞不裂解。平板培养 ...

1. 限制性内切酶反应一般在灭菌的0.5ml离心管中进行。 2. 20μl体积反应体系如下：

1．高胆固醇、高脂肪饲料喂养法 是目前比较常用的方法，特点是死亡率低，可长期观察，但费时久。一般在家兔、鸽、鸡等，经数周喂养就可产生明显的高脂血症，经数月就能形成早期的动脉粥样硬化病变。大白鼠、小白鼠及犬则较难形成，如果饲料中增加蛋黄、胆酸和猪油等，可用促进作用。为了促进病变的形成，在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等。 具体复制方法：兔诱发模型 ...

实验之前应熟悉果蝇的生活史，雌雄的鉴别和果蝇的一些突变性状辨别。果蝇生长的最适温度 20℃，30℃以上高温对果蝇致死，10～20℃生活期延长。实验过程中要随时记录观察结果，便于实验结果的深入分析。 第一周 1. 确定实验方案拟定杂交组合，明确预期目标，选取合适的亲本。 2. 收集所需的处女蝇。 3. 将所需亲本麻醉后挑选 5～10 对放入培养瓶中，25℃培养，(正反交都做)贴好标签，注明杂交组合 ...

染色体组型分析是对染色体组中处于有丝分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征作一描述.将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该细胞的组型。 1. 染色体制片》显微照相》放大。 2. 测量 测量染色体的长短臂长度，并记录。 3. 计算 臂比值、相对长度，根据臂比值确定染色体类型。 4. 配对 根据测量和计算数据，以及染色体的形态特征对同 ...

染色体制片技术显示染色体一般的形态和结构成功的关键是获得大量染色体缩短适宜的分裂细胞。 1. 压片法 ① 取材：在适当的时间选取细胞分裂旺盛的组织。 ② 预处理：秋水仙素进行活体或离体处理。 ③ 固定：卡诺固定液固定，迅速杀死生活细胞使染色体的组成蛋白变性，保持染色体形态和结构。 ④ 解离：1mol/L HCl60℃进行酸解，不同的材料的酸解时间不同。 ⑤ 染色：改良石炭酸品红染色。 ⑥ 压片染 ...

传统的空斑实验方法测呼吸道合胞病毒的PFU值由于其空斑形成较小且需要借助特异性的表面融合蛋白抗体来确定故操作繁琐费用较高。这里介绍给大家三种简单易行的空斑形成实验操作方法： 方法一 1、以5×10e5/ml的密度接种Hep－2细胞到6孔板中，每孔加入3ml细胞悬液； 2、待细胞长成单层后（不得超过48hr），移去营养液，每孔加入400ul的PBS和100ul毒液（10倍系列稀释）； ...

一、试剂盒的选择： 3’RACE从原理上就能明白，它比5’RACE 要容易得多，所以并不一定需要用进口试剂盒。于是根据 Invitrogen GeneRacer Kit 自己DIY了，效果不错。找来了：Invitrogen的SuperScript III反转酶，TAKaRa　LA Taq酶、Pyrobest高保真酶。并根据 Invitrogen GeneRacer Kit ...

1. 基化特异性PCR。 甲基化特异性PCR(MSP)是Herman等首先提出的一种检测基因组DNA甲基化水平的常用方法。该法是将DNA经亚硫酸氢钠处理，非甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变。在PCR反应时，设计两套不同的引物对：一对引物序列针对经亚硫酸氢钠处理后的甲基化DNA链设计，若用该对引物能扩增出片段，说明该检测位点发生了甲基化；另一引物针对经亚硫酸氢钠处理后的非甲基化 ...