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抗体保存指南

抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。本指南以abcam 抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗体产品! 请谨记!无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体! 1. 收到抗体后请务必在12 000 rpm 离心20-30 s 后再打开管盖进行分装和保存! 质优的抗体使用非常特殊的储 ...

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抗体选择指南

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑如下几种因素: 1. 分析或应用的类型 2. 样本蛋白的结构性质 3. 样本的种属 4. 抗体宿主的种类 5. 抗体的标记和检测 一、分析试验的应用类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,如:可以应用于WB IHC ICC ELASA 分析等,如果抗体说明书没有提及的应用 ...

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浅谈各类不同样本的制备方法

作者:胡珺、王隽、伍约红 随着代谢组学的发展,已经有越来越多的领域开始在用代谢组学方法来进行研究,因此用于代谢组分析的样本也多种多样。本文拟从动物、植物、微生物等几个主要方面,对这些不同样本的制备方法做出相应介绍,旨在为各位研究人员的实验提供一个具体参考。 1、动物样本的制备方法 a) 血液样本制备 i. 采集血液样本,通常会在采集后于室温下放置30 min以上,等待蛋白质的凝结 ...

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C2C12细胞的分化心得

原来是担心细胞状态不好,所以是分别从两个地方要来的细胞,做这个细胞的分化做了小半年,一直在换各种诱导方法,怎么都诱导不起来,细胞只是一个劲儿疯长,怎么都不分化,诱导方法和细胞密度都做出个矩阵来,都找不到合适的条件。 后来一咬牙直接去购买了一株,做了两次就做出来了。 总体来说: 1. 定要用代数低的细胞,有条件就购买好了,几百一株,不贵; 2. 是诱导密度最好 ...

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细胞培养中常见的污染情况总结

一、常见的污染如下: 1. 细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗 ...

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单克隆抗体制备详述

1、动物免疫 (1) 抗原制备 制备单克隆抗体的免疫抗原,从纯度上说虽不要求很高,但高纯度的抗原使得到所需单抗的机会增加,同时可以减轻筛选的工作量。因此,免疫抗原是越纯越好,应根据所研究的抗原和实验室的条件来决定。一般来说,抗原的来源有限,或性质不稳定,提纯时易变性,或其免疫原性很强,或所需单抗是用于抗原不同组分的纯化或分析等,免疫用的抗原只需初步提纯甚至不提纯,但抗原中混杂物很多,特别是如果这 ...

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单克隆抗体的研制概述

一、单克隆抗体的概念 抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的,因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇,所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体,仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。因而,常规血清抗体 ...

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微生物基础

微生物的家族 最早将生物界分为两界系统,包括动物界和植物界。以后相继分为三界系统,即动物界、植物界和原生生物界。四界系统,即动物界、植物界和原生生物界(或真菌界)和原核生物界。五界系统,即动物界、植物界、真菌界、原生生物界和原核生物界。 植物与其它生物的区别主要是:植物含有叶绿素,可进行光合作用,具有细胞壁,而且是营固着生活。植物界通常划分为七个大类群,即藻类、菌类、地衣、苔藓、蕨 ...

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DC-CIK细胞的制备方法

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群, 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性,又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

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CIK细胞的制备方法

【背景】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-g IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群, 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性,又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非M ...

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DNA纯化去杂质

这周讨论一项常用的技术,即使常用但仍引起部分人核酸分离焦虑症。那就是基因组DNA的纯化去杂质。 场景是这样的:你有一份采自南太平洋中部一个偏僻小岛上首次发现的古老兰花品种根际土壤样品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最终DNA含有太多杂质,无法PCR扩增。因此需要去除腐植酸等PCR抑制因子。你需要所有的核酸分子通过全基因组鸟枪测序…&he ...

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PCR反应仪器、耗材的重要性

PCR基本原理: PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构 成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结 合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降 ...

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第三代PCR技术--纪念Kary Mullis获得诺奖30周年

Mullis博士在发明PCR技术后曾这样描述:“用一个单分子DNA,PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。反应很容易进行,只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”(Beginning with a single molecule of the genetic material DNA the PCR can generate 100 billio ...

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快速PCR浅见 --纪念Kary Mullis获得诺奖30周年

对于PCR实验来说,如何在得到理想的扩增产物的前提下尽可能加快反应进度、缩短反应时间是每个PCR实验人员关心的热点。下面我就这一问题谈谈自己的看法,以便抛砖引玉。 PCR实验所耗的时间大体上可分为三个方面:模板制备、PCR加样与上机反应、反应后的电泳检测和拍照。 一.模板制备 对于模板制备阶段,尽量缩短模板提取时间既有利于缩短整个PCR反应时间又可以尽可能的减少模板降 ...

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PCR 芯片技术 --纪念 Kary Mullis 获得诺奖 30 周年

PCR仪器发展的趋势之一变得更加微型化, PCR芯片就是在这种趋势下诞生的。PCR芯片就是在微型的载体上进行PCR反应,是微型化的PCR仪。芯片PCR不仅节省了大量反应试剂因此降低了实验成本,还有助于提高反应速度。下面就让我们回顾下PCR芯片的发展历史: 早在1994年Peter Wilding等人就通过在硅表面蚀刻的三维小室放入PCR反应物,然后通过半导体加热制冷片控制温度,扩增 ...

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食品中检测丽春红的方法

食品色素又称食用染料、着色剂,是以食品着色为目的的食品添加剂。食品色素按来源可分为天然食用色素和人工合成食用色素。我国允许在食品中用的合成色素有胭脂红、柠檬黄、靛蓝、赤藓红、晚霞黄和亮蓝等色素,它们都是合成偶氮染料,对其使用国家有严格的卫生标准。丽春红2R 和3R 曾用作食品染色剂,也作为药品和化妆品染色。由于丽春红染色效果好,使食品色泽鲜亮,富有新鲜感,能激起人们的食欲,也被当做食品染料。 & ...

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细胞培养之无菌技术注意事项汇总

简介 细胞培养的成功很大程度上取决于保护细胞免受细菌、真菌和病毒等微生物的污染。非无菌物品、培养基和试剂、带有微生物的空气颗粒、不干净的培养箱和污染的工作台面均是导致微生物污染的来源。 无菌技术的作用是在环境微生物与无菌的细胞培养物之间形成一道屏障,它通过一套操作流程来降低培养物被上述污染源污染的可能。无菌技术的组成要素包括:无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操 ...

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细胞培养实验室

除了大多数日常工作场所共有的一些安全风险例如电击和火灾之外,细胞培养实验室由于要操作和处理人或动物细胞和组织以及一些有毒、有腐蚀性或者有致突变性的溶剂和试剂,因而还具有一些特殊的危险。其中,最常见的一些危险包括:注射器针头或者其他污染锐器刺伤、液体泼溅到皮肤和粘膜上、经口吞入毒物以及吸入感染性气体挥发。任何生物安全程序的基本目的都是为了减少或避免实验室工作人员和外部环境与潜在危害性生物物质的接触 ...

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细胞培养简介

什么是细胞培养? 细胞培养是指从动物或植物中取出细胞,然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离,或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。 原代培养 原代培养是指将细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增殖直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态) 的培养阶段。在此阶段,必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基,从而对细胞 ...

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细菌基因组测序常见问题

关键词:细菌基因组测序;Roche 454测序平台;HiSeq 2000测序平台 Roche 454测序平台 HiSeq 2000测序平台 测序读长 300~700bp 100bp 对样品要求 2μg ...

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