全部

DNA上所携带的遗传信息，需要通过RNA为中介体，合成出组织和正常生理功能所需要的蛋白质，这个过程被称为基因的表达。在生物体中不同的组织和器官所表达的基因群是不一样的，我们把基因群的表达状况称为基因表达谱。目前，高通量地研究基因表达谱的方法主要有两种，即生物芯片和基因表达串联分析（serial analysis of gene expression, SAGE）。基因芯片所能检测的基因必须是已知的基因，放在芯片上几种基因的探针就 ...

密歇根大学医学院副教授Ormond A. MacDougald常年针对Wnt10b在脂质细胞发育过程中的作用从事研究。他领导的研究小组2000年曾在《Science》发表文章，证明Wnt10b基因在组织培养中抑制脂肪细胞形成。而这次他们在小鼠上证明了该基因的作用，实验中无论用高脂肪或低脂肪饲料饲喂，高表达的转Wnt10b基因小鼠的脂肪组织都比对照组减少50%，有关研究结果发表在2004年6月份的《Journal of Bi ...

原始出处： 商业周刊 b20191c生物科学倍受关注，生物技术股票上扬。生物技术业还需作何承诺？基因技术公司（Genetech）治疗结肠癌的药物“Avastin”不是一夜之间研制成功的。13年前，公司的一位科学家发现了一种可以控制向肿瘤供血的基因，并开始研究如何杀死这种基因。公司用了5年的时间研制出一种抗体，通过对老鼠的试验，发现这种抗体可以在老鼠身上起到一个类似开关的作用，同时又开发了另外3种抗体，使之形成药物。然后，该 ...

接手一个2.9kb的克隆构建，装入到EGFP-N3上，选择Xhol/BamhI,片断和质粒酶且完毕，可是怎么也连不上，无奈换酶切位点，换为SalI/BamhI，可是同样问题出现了，怎么也连不上! 无奈先换成克隆半段1.5kb，SalI/BamhI的位点，非常容易得得到克隆， 可是还要全长的啊，在中间靠上的位置找了个unique的酶切位点ppumI，然后把下半段的P出来，使用ppumI/BamhI切好，把构建好的上半段的克隆也使 ...

siRNA的设计要点一、体外合成siRNA的设计:如何设计有效的siRNA一直是当前RNAi研究的热点话题.基因抑制的有效性很大程度取决于目的基因序列的选择。目的序列可以随机选择也可以通过在目的基因的不同区域上测试不同的序列以决定何种序列是最有效的。以下所述几条对于siRNA设计的成功极为重要。1. 从转录本（mRNA）的AUG起始密码开始，寻找“AA”二连序列，并记下其3''端的19个碱基序列，作为潜在的siRNA ...

【xx】既然是摘抄的就共享吧，不要原创了。谢谢！我发现比较好得超星书籍，但是无法复制和拷贝，只有自己写了，我摘抄了一些大家平时关注得问题，谢谢支持！从组织培养细胞中同时分离DNA和RNA1.PBS:0.137MOL/L NACL,2.68mmol/l KCL,7.98mmol/l NA2HPO4,1.47mmol/l KH2PO4,PH7.22.二乙其焦炭酸盐（DEPC）处理水，1mlDEPC加入到1L得重蒸水中（0.1%DEPCv/v）后搅拌 ...

DNA测序技术上的快速发展，加快了我们对不同物种和生物体的基因组序列和结构的研究步伐。在已有GS 20的技术基础上，罗氏诊断公司和454公司不断加大创新投入，又于2007年推出了通量更大，读长更长，准确性更高的第二代基因组测序系统——Genome Sequencer FLX System (GS FLX)，相信它的出现，必将掀起测序技术的进一步革命；对整个基因组学的研究将产生巨大的推动作用。GS FLX是世界上第一个可以提供超高通量基因 ...

来源：生物通儿童交替性偏瘫AHC是一种罕见的严重的神经发育综合症，症状是周期性的偏瘫发作，在发作时患者身体一侧瘫痪，而后又会换成另一侧瘫痪，其发病间隔无法预测。这一疾病的患者通常还伴随有癫痫、学习障碍和行踪困难等症状。Duke大学医学中心的研究人员通过外显子测序发现，大多数AHC患者的疾病是由于一个基因上的突变引起的，并由此给治愈这一疾病带来了新希望。该研究发表在7月29日的Nature Genetics杂志上。 ...

RNAi，RNA interference，RNA干扰，是被认为最有前途的一种实验方法。下面是简介，然后是资源汇集。1995年，康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达，而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA（sense RNA）以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样地切断了par-1 ...

最近在做质粒提取方面的实验，搜集了相关资料与大家分享，这是传统提质粒的方法，与试剂盒提质粒不同，通过这个过程大家可以更好的明白实验原理。1．目的学会最常用的小量制备质粒DNA的碱裂解方法。2．原理根据共价闭合环状质粒DNA与线性DNA在拓扑学上的差异来分离。在pH12.0~12.5这个狭窄的范围内，线性DNA双螺旋结构解开而被变性。尽管在这项的条件下共价闭合环状质粒DNA也会变性，但两条互补链彼此互相盘绕，仍会紧 ...

最近看了一篇关于碱法抽提质粒的文章，觉得很好，特拿出来和各位分享。碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究 ...

1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近，必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列两端有多个碱基的，则必须先切，否则就可能造成酶切失败。2、 回收PCR产物：回收的PCR产物片段=1：10　，一般取前者0.03pmol，后者取0.3pmol。pmol为单位的DNA转换为为?g单位的DNA：（X pmoles×长度bp×650）/ 1,000,000 （注：长度bp× ...

关于PCR假阴性问题总结（建议大家看看）PCR的假阳性问题深受重视，但我个人认为PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它涉及了与PCR实验的几乎所有人员和技术环节，十分复杂。就临床而言， ...

不知道那些大侠做过,可以一起讨论一下.我试了几种转染试剂 ( JetpET, Lipofectine), 转染效率都极低 .只有电转的时候,转染效率也至多达到5%.不知道怎么拿这个细胞做luciferase.筛选浓度我已经用到1mg/ml了,不知道大家都用的多少?常规用FUGEGE6效果好点, 想效率高用逆转录病毒!"筛选浓度"你指什么? G418 我用过1200ug/ml, 1500ug/ml.对，就是指的G418.大侠你用过Fugene6吗?转染效率有 ...

一般常识，单拷贝克隆产量低，高拷贝克隆稳定性差，一直让研究者在克隆表达时难以选择。蛋白的表达就有诱导表达系统，可以实现人为地控制蛋白的表达时间和表达量——现在连质粒的拷贝数可以借助诱导的方法来人为控制了！Epicentre的专利技术——CopyControl克隆系统能够让您共享单拷贝和高拷贝的优点。CopyControl克隆首先以单拷贝形式生长——单拷贝可以确保插入稳定及成功克隆编码毒性基因序列——在需要的时候， ...

1．目的学会用酶切法或PCR法筛选重组质粒转化成功的克隆菌。2．原理利用转化后宿主菌所获得的抗菌素抗性性状筛选出获得质粒的菌落克隆。再从这些菌落中鉴定出质粒上带有外源基因插入片段的克隆菌落。3．器材旋涡混合器，小镊子，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴（或恒温水浴锅），制冰机，恒温摇床，超净工作台，酒精灯，无菌牙签，摇菌管。4．试剂LB培养基（加抗菌素），PCR用试剂，引物，质粒提 ...

我想请教大家：我的PCR跑出四条带，亮度不相上下，包括目的基因，其余杂带比目的带短，退火温度52-58都试过，没改善。接着调高退火温度有可能得到特异条带吗？会不会引物设计有问题？我用的是PRIMER DESIGNER 1.01.烦劳看看我的基因序列，引物，要真有问题，就死心塌地重订引物了。1 cggcagcagc gggaggcgag gggcgccacc gaggagccga gcccgccgag ccgggcgctc61 tatttcagcg gg ...

小弟弟一次做电转，完全按照毕氏酵母说明书来，居然没长出来。第二次，按老板出国前留下的做，效果甚好！现贡献出来，望对大家有所帮助！小弟刚做酵母表达，在DXY受益匪浅！看到不少关于酵母电转的PROTOCOL,但基本上是按INVITROGEN上的步骤来的。小弟第一次也是照本宣科，可是没出来，后来又按导师留给小弟的PROTOCOL做了一次，转化效果特好。先将其贡献给大家，希望对大家有所帮助：Yeast Transformati ...

Nucleic AcidsGel electrophoresisAgarose Gel ElectrophoresisPulse-field Gel ElectrophoresisPolyacrylamide Gel ElectrophoresisRestriction Enzyme (RE) DigestionWhat are RE?Enzymes that cut dsDNA, usually palindromic sequences. RE recognize 4-8bp.A RE that ...

Forensic DNA Typing, Second Edition: Biology, Technology, and Genetics of STR MarkersBook Description:Since the enormously successful first edition of Forensic DNA Typing was published, the Human Genome Project has published a draft sequence of the human genome and completed the fin ...