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线粒体和液泡系的超活染色与观察

实验六 线粒体和液泡系的超活染色与观察活体染色是能使生活有机体的细胞或组织特异性着色但对活样品又没有毒害作用的一种活体染色方法,其目的是显示生活细胞内的某些结构,而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活体染色技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同,通常把活体染色分为体内活体染色与体外活体染色两类。体内活体染色是以胶体 ...

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PEG介导的动物细胞融合(cell fusion)技术

实验五 PEG介导的动物细胞融合技术 细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代 60年代到70代作为一门新兴的技术 发展非常快 应用范围也极为广泛 除了同种类细胞间可以融合 种间远缘细胞也能融合 细胞与组织不同 不排斥异类、异种细胞 动物细胞如此 ...

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染色体G-带的分带技术

实验四 染色体G-带的分带技术60年代以来,染色体分带技术有了突飞猛进的发展,特别是1970年以来,许多人类染色体分带技术的出现在细胞遗传学的科学研究中开创了一个新的时期。染色体分带技术可使我们准确无误地识别每一条染色体,使人们准确的认识每一个染色体和它们所发生的畸变,这就为染色体遗传疾病的诊断、杂种细胞检定,特殊细胞株的标记、染色体的识别等开创了一种新的方法,有助于染色体研究的发展,在临床上有着 ...

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染色体的标本制作及其组型实验

实验三 染色体的标本制作及其组型实验长期以来,在真核生物中 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体 对生物的遗传、变异、进化和个体发生 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染色体按照其大小、着丝粒位置,以至带型有序地排列起来,此模式图象排列即 ...

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孚尔根反应(Feulgen Reaction)

实验二 孚尔根反应(Feulgen Reaction)Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。实 验 目 的1. 熟悉并掌握Feulgen反应的原理及其实验操作方法2. 对细胞的免疫组化研究方 ...

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透射电子显微镜的原理与演示

实验一 透射电子显微镜的原理与演示 解剖、观察和分析历来是生物学研究的基本手段。用于细胞解剖观察的主要工具就是显微镜,它是我们观察细胞形态最常用的工具。但其分辨率的最小数值不会小于0.2mm(紫外光显微镜的分辨率也只能达到0.1mm) 这一数值是光学显微镜分辨率的极限。限制显微镜分辨率的关键因素是光的波长(光的衍射效应),显微镜无论制作得如何精密都无法突破这一极限 一般显微镜设计的最大放大倍数为1 ...

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细胞的显微与亚显微结构观察

一、相关基础知识 生物体的一切生命活动,都是以细胞作为基本结构和功能单位来进行的。由于其内在结构和自身表面张力以及外部机械压力,细胞表现具有不同的形态,有圆球形、圆盘形、肾形、多边形、纺锤形等。更重要的是,细胞的形态与其功能密切相关,如红细胞是圆盘形的,有利于其在血管内流动及气体交换;肌细胞按收缩方向是细长的纤维状结构,适于细胞的收缩运动。精子细胞核小,具有一条能运动的尾或鞭毛,以利于其受精 ...

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减数分裂实验原理和步骤

一、目的 学习生殖细胞的取材和染色体制片,认识减数分裂各时期的形态特征。二、原理生物秀细胞实验论坛交流 减数分裂是形成生殖细胞的一种特殊方式的细胞分裂。它是遗传学中一个特别重要的事件,是维持大多数动植物品种染色体数目世代稳定传递的根本机制。同时,基因的分离、自由组合以及交换无不是通过减数分裂发生的。可以说减数分裂是经典遗传学的根本,动植物都是通过减数分裂形成配子,所以减数分裂通常以植 ...

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Basic Fluorescent in situ Hybridization (FISH)

实验概要Fluorescence in situ hybridization method is a kind of physical map drawing method use fluorescent element mark probe to detect probe and split the chromosome or split between the middle period of ...

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Transfecting Suspension Cells(悬浮细胞转染)

实验概要将转移基因整合到细胞染色体DNA上形成稳定表达转移基因的细胞系。实验原理细胞转染技术是目前广泛应用于病毒基因结构与功能以及基因调控等的研究。细胞转染可分为短暂转染和稳定(或永久)转染两种。在短暂转染中被转染基因并不整合至细胞染色体中因而不能随细胞分裂而传代。转入病毒基因的转录或复制可在DNA导入后1~4天通过收集被转染的细胞进行分析。如果病毒基因整合至细胞染色体中则可随细胞分裂而传代就能 ...

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Culture of Peripheral Blood Lymphocytes for Chromosome Analysis

实验概要Provide information about chromosomal abnormalities.实验原理The blood cell karyotyping method was developed to provide information about chromosomal abnormalities. Lymphocyte cells do not normally und ...

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流式细胞术检测细胞凋亡

实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis.实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part of development. Inappropriately regulated apoptosis is ...

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Dissociation of Cells from Primary Tissue

实验概要Obtain single cell suspensions from primary tissue.主要试剂0.25% trypsinsoybean trypsin inhibitor主要设备stainless steel mesh 实验步骤1.After dissecting off unusable tissue mince the remaining tissue into 3 ...

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Mouse B cell isolation with magnetic beads

实验概要Isolate B cells from total mouse cells实验步骤细胞实验技术论坛http://bbs.bbioo.com/forum-138-1.htmlPraparation:1.Enough MACS; put RPMI into water bath.2.Put some MACS in 15 ml tube or 1.5 ml tube from cell ...

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Competent Cell Preparation

实验概要Competent cells are those that possess more easily altered cell walls that DNA can be passed through easily. These cells readily incorporate foreign DNA. On example of a competent cell is E. coli. ...

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细胞和细胞器及间质的分离

细胞内各种结构的比重、大小不同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,所以常用不同介质、不同转速、不同时间,通过分级离心,将细胞内各种结构组分(细胞核、核仁、线立体、高尔基复合体、溶酶体、染色体等)分离出来。主要方法是:组织匀浆的制备、离心分级分离各组分、分析鉴定三个步骤。一、细胞的分离 根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直 ...

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细胞的分离

根据细胞的大小、密度常可分离不同具有不同生物学特征的各种细胞亚群。其原理是处于悬液中的细胞沉降率与细胞的直径成比例,也与细胞密度和分离介质密度之间差异成比例,假设细胞为球形,则其在溶液中在引力场内的沉降速度以下列公式表示V= 2g(ρc–ρs)r² ...

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细胞核的分离

细胞核作为一个功能单位,完整地保留细胞物质,并指导RNA合成,后者为蛋白质其它细胞组分合成所必需。因此,细胞的分离是研究基因表达及细胞核形态结构的首要步骤。不同组织来源的细胞经匀浆后,用分级离心或声波处理等方法进行分离纯化。操作方法:1.制备巨噬细胞:取体重约200g大鼠一只,腹腔注射0.2%配制的1%巯基乙酸钾5~6ml两次,5天后处死。冰浴中用生理盐水收集腹腔细胞,生理盐水洗涤细胞、1500r ...

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膜蛋白质的分离

在生物膜(biological membrane)双脂层的结构中,镶嵌着不同类型的蛋白质分子,统称为膜蛋白质。它执行着不同的功能,并构成细胞骨架(cytoskeleton),其分子量分布在1万至24万。 生物膜的主要化学成分是脂类和蛋白质,此外还有糖类,它是以糖蛋白和糖脂的形式存在,生物膜不仅是细胞间的分隔物质和构成细胞的骨架,而且它与机体和细胞内的许多主要功能有关,如物质运输、信息交换、能 ...

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层粘连蛋白(Laminin,LN)的分离

层粘连蛋白(Laminin,LN)是一种主要存在于上皮细胞外基质中的大分子非胶原性糖蛋白(分子量约为20~40万)。其功能与FN相似,影响着胚胎细胞的发育和胚胎团块的形成。现已发现LN与神经细胞的运动、分化及肿瘤的转移关系密切。许多研究都表明LN是机体中一种重要的糖蛋白组分。因此,分离提纯LN将为我们深入地研究细胞外环境与细胞运动、增殖、分化之间的关系,研究肿瘤转移的机制提供方便。基于LN主要存在 ...

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