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市场上供应的大多数培养液的配方非常接近，这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法，这个方法是保守的，在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中，观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞，不过也很容易扩展到贴壁细胞。 细胞的生长参数 1．翻倍时间（Doubling Time） 细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的 ...

一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培养中一开始就长得很好，染色体分析大多用这类细胞。F细胞在再培养中潜在的生长期最长，在较老的羊水培养 ...

一、原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分DNA，Giemsa染色后可见效果良好的C带。抽取DNA的过程由三个连续操作形成。首先，酸处理 ...

重组人TFAR19 蛋白对羟基喜树碱诱导人7721肝癌细胞凋亡的增敏作用李惠平1 曹志敏2 邵玉霞1 孙　武1 贾廷珍1(11 北京大学第三医院肿瘤化疗放射病科北京　100083 ; 21 北京大学基础医学院免疫学系) 癌基因;癌肝细胞/ 遗传学;荧光2差异显示;基因表达目的:探讨新的人凋亡相关基因产物TFAR19 蛋白对羟基喜树碱诱导人7721 肝癌细胞凋亡的增敏作用。方法:将不同浓度的rhTF ...

1.　标本采集　在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带， 挤出脐带血管中的血液，放入装有含青链霉素的PBS液瓶中，2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗：青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS：KCl 0.2 g/L KH2PO4 0.24 g/L NaCl 8.0g/L Na2HPO4•7H2O 1.56g/L或Na2HPO4 1.44 g/L。 在800ml蒸馏 ...

　　提要: 目的　比较牛鲍式计数板、血球计数分析仪和Nageotte 血细胞计数板3 种白细胞计数法测定血液中微量白细胞的效果。方法　将1 份血液标本重复用3 种方法计数得出标准计数值并将此标本稀释至不同浓度以3 种计数法分别测定这些样品中白细胞的含量比较测试值与期望值。同时用这3 种方法检测了30 份过滤白细胞的血样中的微量白细胞。结果　牛鲍式计数板、血球计数分析仪在白细胞牛鲍式计数板测试值为“ ...

细胞凋亡相关基因与人类肿瘤杨银峰　李家林( 昆明医学院生化教研室 昆明650031 )摘要: 介绍细胞凋亡相关的基因以及这些基因的改变在恶性肿瘤的发生、发展及治疗中的作用。关键词: 细胞凋亡; 基因; 恶性肿瘤1. 细胞凋亡概述细胞凋亡(apoptosis) 即程序性细胞死亡(pro~grammed cell death PCD) 是在生理或病理条件下由基因调控的细胞主动程序化死亡过程。不同组织细 ...

摘要: 　目的: 探讨一氧化氮(nitric oxide NO) 、总抗氧化能力(total antioxide capacity T2AOC) 对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的影响。　方法: 健康SD 雄性大鼠20 只日龄22 d 时复制单侧隐睾模型。生物素2dUTP/ 酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡采用硝酸还原酶法测定睾丸组织中NO 含量化学比色法测定睾丸组织中T2AOC。结果: 术后第7 ...

摘要：据文献报道c2erbB22可以介导细胞凋亡 为检验这一结论是否具有普遍性 用52氟尿嘧啶(52Fu) 诱导小鼠成纤维细胞NC3H10 TC3H10及人乳腺癌细胞MCF27的凋亡. 用Northern印迹法检测c2erbB22的表达状况1结果显示: c2erbB22基因表达在52Fu 作用6 h 开始降低 12 h降低更为明显. 作用24～ 48 h 出现细胞存活率下降DNA 梯状断裂及细胞周 ...

新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京　100083) 细胞因子;凋亡;CKLF1 ; PDCD5 ; TFAR19 在人类基因组完成工作框架图以后人类功能基因组学成为最重要的任务之一。我们目前正在重点研究编码细胞因子和凋亡相关分子的人类功能基因。本综述介绍其中的2 个首先由我们实验室克隆的分子即趋化素样因子1 (CKLF1) 和程序化细胞死亡分子5 ( ...

陈钟，丁义涛，南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科 江苏省南京市 210008 张鹤云，南京大学生化系 江苏省南京市 210093陈钟，男，1963-07-04生，江苏省靖江市人，汉族.1983年南通医学院医疗系本科毕业，1988年南通医学院外科硕士研究生毕业，1999年南京大学医学院肝胆外科博士生，副教授，副主任医师，主要从事肝胆外科及生物人工肝研究.江苏省卫生厅重点发展项目基金资助 ...

1、目的 临床上为红细胞增多、贫血或贫血的鉴别诊断提供依据。 2、适用范围 　本法适用于人体血液中红细胞的测定。 3、职责 检测人员：负责按照本检测细则对样品进行检测。 复核人员：负责对检测操作是否规范以及检测结果是否准确进行复核。 科室负责人：负责对科室综合管理和检测报告的签收。 4、主要仪器 　OLYMPUS显微镜 5、方法及操作过程　 5.1稀释液的配制：NaCL1.0g、Na2SO4·10 ...

内分泌干扰物诱导睾丸生精细胞凋亡的研究进展王　晟　综述; 秦达念　审校(汕头大学医学院生理学教研室 广东汕头515031)摘要: 睾丸生精细胞存在着自发性和化学物质诱发性凋亡。现代工业造成大量污染物涌入环境中 而这其中许多物质被证实具有生殖毒性能够影响机体的生殖和发育。这类污染物被归属为内分泌干扰物( EDCsPEDs) 。研究EDCs 所诱导的生精细胞凋亡将丰富和拓展其甄别的依据及其途径并对作用 ...

凋亡相关蛋白TFAR19 在TF21 细胞凋亡中出现细胞核转位陈英玉孙荣华韩文玲张颖妹宋泉声狄春辉马大龙(北京大学人类疾病基因研究中心北京　100083) TFAR19 ; TF21 细胞;凋亡;核转位;核蛋白类 目的:探讨凋亡相关分子TFAR19 在TF21 细胞凋亡过程中的表达及定位。方法:以TFAR19 的单克隆抗体为工具采用荧光显微镜、共聚焦激光扫描显微镜、流式细胞仪等研究手段观察细胞凋亡 ...

一、 目的与要求1. 掌握用血球计数板进行细胞直接镜检计数的方法。2. 学习测量细胞大小的方法。二、 实验原理动物组织细胞的体外培养、血液中血细胞数量的变动、许多产品的细菌学检查、微生物培养等科研、生产和临床上常常需要检测细胞的数量。测定细胞数量的方法有很多种，其中，用血细胞计数板于显微镜下直接计数的方法样品用量少，操作简便、快速、直观，是一种较常用的细胞计数方法。血细胞计数板由一块长约7.5cm ...

一、原理 生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面，主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。 二、操作步骤 (一)拍摄前准备 1．光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。 2．柯勒氏照明 使观察的视野获碍均匀而又充分的照明；防止杂散光对照相系统产生影响；使被摄物体不受热，影象清 ...

基本原理 通过在支持物（如盖玻片）上培养贴壁细胞，可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固，能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液； 6孔平底组织培养板，或φ60 mm培养皿； 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于75%乙醇中的盖玻片； 含血清培养基（通常为 RMPI 1640含10% 小牛血清，100U/ ...

一、原理 扫描电镜用于观察标本的表面形态。用戊二醛和锇酸处理的染色体标本，经单宁酸(或硫卡巴肼)还原可获得较好的导电染色效果。在扫描电镜下可观察到染色体的三维结构，也可用于常规染色体核型、G带染色体核型、高分辨染色体核型的分析及染色体结构异常识别，以弥补光镜的许多不足。在扫描电镜下还可清楚地观察到肿瘤细胞癌基因扩增结构—双微体。因而此方法广泛用于细胞生物学和遗传学的许多研究。 二、染色 ...

基本原理： 在长期的细胞培养过程中可能会出现微生物污染或基因型改变等情况，会导致具有优良特性细胞系的丢失。为防止这些细胞的丢失，细胞可以经快速冷冻并几乎无限期保存在非常低的温度下，如液氮（-176℃）。试剂和设备：冷冻液: 90%灭活血清+10%DMSO（或甘油），用0.45μm微孔滤膜过滤除菌，4℃保存； 培养液； 台盼蓝溶液（0.4%溶解于PBS）； 70%乙醇； 组织培养瓶； 15-50 ...

1. 原理： 1.1. 计算细胞数目可用血球计数盘或是Coulter counter 粒子计数器自动计数。 1.2. 血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber 中细刻9 个1 mm2 大正方形，其中4 个角落之正方形再细刻16 个小格，深度均为0.1 mm。当chamber 上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1 mm2 x 0.1 mm=1.0 x 10-4 ml。使用时，计数 ...