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Yeast Gene knockouts using Oligo/PCR

Yeast Gene KO using Oligo/PCRUniversal primers for gene knock-out using dominant drug markers: Kan Clonat and Hygromisin-B. Forward primer: 5’ TCAGGGGCATGATGTGACT 3’Reverse primer: 5’ AGCTCGTTTTCGACAC ...

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非洲爪蟾 African clawed toad

科名:负子蟾科   中文名:非洲爪蟾   学名:Xenopus laevis 属名:Xenopus   食 性:由于没有舌头只能利用其前肢搅食水中的无脊椎动物。   分 布:由南非的热带草原起,北至肯尼亚,乌干达西至喀麦隆。   形态特征:体长100mm。雄性会比雌性小一截,后肢具有3对角质脚爪。   生活习性:为完全水生种,广栖于淡水水域中,尤其喜好静止水域的环境。白天多潜藏于水底深处,夜晚则会 ...

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拟南芥定位克隆中的几个问题

在过去十多年里,拟南芥(Arabidopsis thaliana)遗传学在植物生物化学、生理学、病理学和发育生物学研究中发挥着越来越重要的作用。许多研究者想知道某种性状是由那个基因改变产生的。如果突变是由T-DNA或转座子插入引起,插入序列会提供一个直接指向基因的标签。但是绝大多数遗传变异不属于这种情形。由于多种原因,化学诱变剂和辐射广泛用于诱导突变,以EMS为例,它比其他诱变剂更简单易行、效率更 ...

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酵母细胞转化表面物理化学研究

★ PEG is a minimal requirement for the binding of DNA to yeast cell surfaces ★ Li+ only has an effect on yeast cell wall instead of the cell membrane Effect of PEG and Li+ on yeast transformationBindi ...

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酵母:一种模式生物

刘擎, 余龙( 复旦大学遗传学研究所,上海)关键词:酵母;模式生物;基因组1996年4月,在国际互联网的公共数据库中公布了酿酒酵母(以下简称酵母)的完整基因组顺序,它被称为遗传学上的里程碑。因为首先,这是人们第一次获得真核生物基因组的完整核苷酸序列;其次,这是人们第一次获得一种易于操作的实验生物系统的完整基因组。酵母是一种较好的模式生物,通过对其基因组的深入研究将有助于人们了解高等真核生物基因组的 ...

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模式生物与发育生物学——童话般的科学故事

螟蛉有子,蜾蠃负之——《诗经·小雅·小宛》  七月在野,八月在户,九月在宇,十月蟋蟀,入我床下——《诗经·豳风·七月》 今夜偏知春气暖,虫声新透绿窗纱——刘方平(唐)《春夜》    有这样一些生命,亿万年来,它们或栖身于朽木败叶之下,或飞舞于山花野果丛中,或在山溪浅水中徜徉,或在大海惊涛下蜷缩,或在荒野上荣枯,或在污秽中滋生。它们的家族,从未在生命进化激流中独领风骚,而是随着进化车轮的远去,在草际 ...

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拟南芥——一把打开植物生命奥秘大门的钥匙

张振桢12,许煜泉2,黄 海undefined(1 中国科学院上海生命科学研究院上海植物生理生态研究所,上海 200032;2 上海交通大学生命科学技术学院,上海200030)摘 要:在过去的20 年中,拟南芥作为模式植物广泛用于植物生命科学研究。历时10 年的模式植物拟南芥的全基因组测序工作于2000 年完成,通过测序获得的拟南芥基因组核苷酸序列全部公布在互联网上,有力地推动了植物生命科学研究向前发展。科学家 ...

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利用爪蟾卵母细胞建立人类低密度脂蛋白受体基因表达系统

沃兴德1 范春雷1 罗艳2 钱颖1 卢德赵1 唐利华1(1. 浙江中医学院生命科学系 浙江省杭州市310053 ; 2. 杭州师范学院生物化学教研室 浙江省杭州市310008)  细胞生物学;  低密度脂蛋白受体基因表达系统;  细胞核显微注射;  爪蟾卵母细胞;  低密度脂蛋白;  动脉粥样硬化;  质粒构建  目的 在爪蟾卵母细胞中建立人类低密度脂蛋白受体基因的表达系统此系统可被用于 ...

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A Guide to Yeast Two-Hybrid Experiments(酵母双杂交实验指南)

Russell L. Finley Jr.undefined1Center for Molecular Medicine and Genetics and Department of Biochemistry and Molecular Biology Wayne State UniversitySchool of Medicine Detroit MI 48201 USundefinedCorrespondence: rf ...

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定量分析拟南芥根系生长

生长的植物根系很容易测量,尤其在拟南芥中,因为增加的器官大小基本上限于一定范围。精确测量根尖生长,可用于在突变体生长过程中、转基因背景、或是实验处理响应方面,来确定生长活性(在某一特定时间的增长速度)。根系生长衡量方法有多种方式,最简单的就是将种子种在培养皿中,实时记录根尖生长,用直尺测量根系长度,然后将数据后输入Microsoft Excel分析,但这种方法在处理大量的幼苗时是繁琐,不正确的。另 ...

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爪蟾中期提取物制备

提提取物之前一天注射绒促酶,用0.65%生理盐水配制,每管以500ul溶解。14:00进行第一针注射,100ul/只。放在暗室静置6h。20:00注射第二针,450ul/只,将蛤蟆放入0.65%盐水中,暗室,静置12h(不超过)。第二天收卵。1. 冷却离心机至16oC2. 配工作液(MMR、XB、XEB2),准备玻璃容器,用蒸馏水冲洗3. 收卵在玻璃容器中(烧杯、或者锥形瓶),将水去除。卵不可以暴 ...

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在小鼠进行基因打靶的研究进展

杨 晓 黄培堂 黄翠芬(军事医学科学院生物工程研究所 100071. Email: yangx@nic. bmi.ac.cn)摘要 基因打靶是在生物活体研究基因功能的有效手段. 通过基因打靶可以对小鼠染色体组进行特异性的遗传修饰包括简单的基因剔除点突变的引入染色体组大片段的删除和重排以及外源基因的定位整合等. 近年来的研究表明 对基因打靶进行时间和空间上的调控已成为可能.关键词 基因打靶 基因剔除 ...

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小鼠的遗传学研究(Genetic research of mouse)

林兆宇,高 翔(南京大学模式动物研究所,南京210063)摘 要:自20 世纪初,小鼠的遗传学研究从宠物农场进入哈佛大学的实验室只有短短一百年的历史;但是,由于小鼠基因组与人类基因组高度同源、小鼠基因组改造手段非常成熟以及小鼠近交系、突变系和工具小鼠品系种类繁多,小鼠遗传学已成为发育生物学、功能基因组学和疾病机理研究的核心研究领域,小鼠也成为最重要的模式生物之一。近年来,随着小鼠基因组序列测序的 ...

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非洲爪蟾具有与人类相似的胚胎干细胞

爱丁堡大学的研究人员发现一种在近年来越来越受欢迎的家庭宠物非洲爪蛙(African clawed frog)具有与人类相似的胚胎干细胞无限分裂遗传机制。这个赋予胚胎干细胞变成身体中200中细胞类型的能力的过程是生物学领域所有研究的基础。这听起来似乎像出现在野生动物记录片中的一个奇闻,但事实上这种青蛙可能成为人类研究干细胞关键领域的一个强大的支持者。直到现在,人类已经从小鼠、灵长类动物和人类 ...

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小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验

目的要求1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合,将 ...

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豚鼠(土拨鼠)

土拨鼠,英文名字是guinea pig。通常被叫做豚鼠或者天竺鼠。原产地是南美洲秘鲁一带,天然食物是青草,植物的根以及果实种子,是绝对的素食主义者。野生的土拨鼠身材苗条运动灵活,长期被人类当作宠物饲养以来由于好吃懒做缺乏运动因而变得胖乎乎的,很招人喜爱。土拨鼠的肉还是很好的食物。喜欢多只挤在一起,这是因为野生状态下多只生活在一起可以增加发现敌人的机率。会通过轻微的叫声相互沟通。 如果你居住的空间太 ...

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没有爹娘的非洲爪蟾

1952年美国费城癌症研究院的2名生物学家布里格斯(R. W. Briggs)和金(T. J. King)开始用两栖类动物豹纹蛙进行无性生殖的研究,采用的方法是“细胞核移植”。他们用这种无性繁殖的方法在1955年培育出了可以摄食的蝌蚪。但在以后的同类试验中遇到了挫折。1962年,英国生物学家格登(J. B. Gurdon)成功地用核移植的方法培育出了健康的非洲蟾成体。具体步骤如下(如图)。图 非洲 ...

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小鼠骨髓染色体的快速制备

目的要求掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法,识别小鼠染色体的数目及特点。实验原理骨髓细胞具有高度的分裂活性,经秋水仙素或秋水酰胺处理后,使分裂细胞阻断在有丝分裂中期,再经低渗处理、固定、滴片、染色等步骤,可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。实验用品1.器材:解剖器具、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、载玻片、酒精灯等;2.试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoy’s固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、0 ...

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NOD小鼠生物学特性

通过病理学观察发现,NOD小鼠自身免疫性胰岛炎最早发生于4周龄,因而可能影响受孕率,导致早期发病小鼠不孕,发病较晚的小鼠受孕后平均初产天数、平均产仔数、平均离乳数、平均离乳率以及平均胎间隔都未受影响。对该晶系小鼠的选种,宜将离乳幼鼠均予保留,发现亲代发病,则需及时交配。 NOD小鼠发病后,充分呈现该品系小鼠糖尿病的生理生化特征即:尿频、多饮、高血糖的症状。在几周的时间内,血糖迅速升高,饮水 ...

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Guidelines for Egg and Oocyte Harvesting in Xenopus laevis

Amphibian oocytes are used for studies in molecular biology embryology and biochemistry.Unfertilized eggs are collected by gently squeezing eggs from females which have been injected with human chorio ...

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