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为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然不过的了。那么50 mM葡萄糖是干什么的呢？说起来不可思议，加了葡萄糖后最大的好处只是悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。因此，如 ...

多年来，国外已成功的研制了采用Vero细胞生产疫苗并获准上市，包括人用狂犬病纯化疫苗、脊髓灰质炎灭活（纯化）疫苗（IPV），并在中国注册或正在注册申请中。在上世纪九十年代后，国产的采用Vero细胞生产的人用狂犬病纯化疫苗、乙型脑炎纯化疫苗、肾综合征出血热纯化疫苗被批准上市。近年来，又有一些企业申请乙型脑炎纯化疫苗、脊髓灰质炎灭活（纯化）疫苗、甲型肝炎灭活疫苗进行临床研究或上市。随着采用Vero细胞生产疫苗种类的增多， ...

“常见重大疾病全基因组关联分析和药物基因组学研究”重点项目课题申报指南科技部 日期: 2009-03-10关于发布“十一五”国家高技术研究发展计划(863计划)生物和医药技术领域“常见重大疾病全基因组关联分析和药物基因组学研究”重点项目课题申报指南的通知各有关单位：全基因组关联分析和药物基因组学已经成为国际上新的研究热点，对于预防、治疗常见重大疾病具有重要战略意义。根据863 计划“十一五”发展纲要，国家决定实施“常见重大疾病 ...

前一段时间一直在做酶切连接,特别难连,做了两个月,终于被我揪出来了,现就我所遇到的问题和我自己的摸索,经验,教训,一一列出来,希望对大家有所帮肋.我做的是酵母双杂交,需构建的是目的片段B接入载体PM中,以及目的片段A接入载体PVP中.其中B 1130bp,A 3760bp.1.多扩几管,得大量的高保真PCR产物.(多扩几管,因为后面的实验中你会发现每切一次产物越来越少)2.PCR后进行切胶纯化(这步必须切胶纯化,因为决不可在产 ...

1 前言RNA是生物体内最重要的物质基础之一，它与DNA和蛋白质一起构成生命的框架。但长久以来，RNA分子一直被认为是小角色。它从DNA那儿获得自己的顺序，然后将遗传信息转化成蛋白质。然而，一系列发现表明——这些小分子RNA事实上操纵着许多细胞功能。它可通过互补序列的结合反作用于DNA，从而关闭或调节基因的表达。甚至某些小分子RNA可以通过指导基因的开关来调控细胞的发育时钟。2 综述2.1 研究历史与发展前景2.1.1 定义双链 ...

外源DNA和质粒载体的连接反应外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的５'磷酸和３'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的ＤＮＡ连接酶催化，这两种酶 ...

http://61.167.57.67/dwhx/dwhx_26/教育网内都可在线看第八节 分子生物学技术 (1:21)一、 DNA重组技术 (0:48)DNA重组技术定义 (1:37)DNA重组技术别称 (0:11)（一）DNA重组技术的基础 (1:37)1.核酸的制备 (0:52)2.限制性内切酶 (0:36)限制／修饰系统 (0:32)限制性内切酶 (0:16)I型限制性内切酶 (0:31)Ⅱ型限制性内切酶 (1:08)EcoRI的识别序列 (0:47)限制性内切酶切割DNA的方式 (0:2 ...

感谢参与！给出链接即可！如果可能，楼主可以给一个comment。0 引言在功能基因组学(functional genomics)研究中，阐明各种蛋白的结构和生物学功能是其核心任务，不仅是生物学的主要研究方向，而且也是医学研究的主要内容，毕竟细胞的功能和表型是由细胞中的蛋白来主导的，许多疾病都是蛋白结构与功能、表达水平与调节的异常引起的. 研究蛋白的功能，常常通过改变蛋白的表达水平，观察细胞的生物学特性的变化，来研究蛋白相应的 ...

暗室实验暗室实验的操作流程：1. 新鲜配制1-2ml工作液（A液与B液1:1或1:40混合配制）2. 进入暗室，在黑暗的条件下，加入1μl未稀释的二抗（HRP连接物）3. 混合后，可立即在暗室中观察到蓝色光暗室实验的注意事项：? 工作液按正确比例混合，且新鲜配制? 在暗室中加入二抗? 直接使用未稀释的二抗? 加入二抗后，立即观察注：暗室实验可同时检测底物是否有活性，以及二抗是否有活性。如果暗室实验结果阴性：更换其它二抗，再次进行检测；再次检测结果仍为 ...

真核细胞DNA的制备与定量制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等试剂存在下用蛋白酶K消化细胞，随后用酚抽提而实现的。这一方 ...

在分子生物学领域里摸爬滚打了两年多，在园子里也逛了一年多，没写过什么原创贴子，这算是第一个，只是浅显的经验，希望与大家交流、分享、共勉！！！我看到了很多帖子，大家在查找Gene序列的时候，有些战友总是弄不明白那个是自己想要的序列，因为在NCBI的GeneBank里面搜索以后，实在是有太多的序列出现，而且长短不一，名称各异，DNA，mRNA ……，有点让人眼花缭乱，下面就是我的一点小经验：通常大家都是在Nucleotide里 ...

我的题目是鸡Mx基因的克隆，我的策略是先根据该基因家族(dynamin family)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因cDNA的部分片段，然后根据该片段序列设计基因特异性引物，利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端，然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA.我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp, 测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因 ...

Transheep小编发现GraphPad Prism不仅简单易学而且可以搞定大部分医学研究所需的统计与作图，所以今天总结了几种常用统计图的做法，教您轻松快速地做出漂亮的统计图，您只需花很少的时间看完这个教程就可以彻底摆脱excel笨拙的作图功能了。废话不多说让我们正式开始。 1. 折线图折线图最为统计图中很常见的一类图，它的特点是可以显示随时间而变化的连续数据，因此每个数据点都有一个相应的X轴值和Y轴值，所以我们在 ...

Solexa 高通量测序法原理Solexa 方法是利用单分子阵列测试 genotyping ，此种测序法首先是将 DNA 从细胞中提取，然后将其打断到约 100 － 200bp 大小，再将接头连接到片段上，经 PCR 扩增后制成 Library 。随后在含有接头的芯片（ flow cell ）上将已加入接头的 DNA 片段绑定在 flow cell 上，经反应，将不同片段扩增。在下一步反应中，四种荧光标记的染料应用边合成边测序（ Sequencing By Synthesis ）的原理，在每个循环过程里，荧光 ...

核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是检测核酸蛋白质的重要工具。以下是说明书的内容。检 测 仪 使 用 说 明 书一．概述　 核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液湘色谱仪中的一种紫外检测装置，核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是根据生命科学的发展对于现代色谱仪器的要求而改进设计的一种新型紫外检测仪。该仪器在创新方面的主要特点为：1. 该仪器除配有输出10ｍV记录仪信号外，还配有输出适合计算机积分仪的输口，这样很方便构成色谱工作站系统。（可同时进行计算机和记录仪信号输出，亦 ...

核酸分析软件下载软件名称　 AnnHyb2.22 软件大小 207k 立即下载AnnHyb2.22是设计PCR引物和DNA探针的辅助软件。主要功能有： 1.对寡核苷酸序列，计算溶解温度(nearest-neighbour algorithm，可以设定盐浓度和引物浓度), 序列长度、GC百分比,分子量, 摩尔消光系数,IUB/IUPAC序列、反向序列、互补序列。 2.对50个bp以上的序列, 计算长度,GC百分比、不同盐浓度下的溶解温度 3.对长序列可以进行反向互补序 ...

原文见：http://www.ebiotrade.com/newsf/2003-12/B20031219174450.htmRNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。RNA干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化/替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具，因 ...

诺贝尔奖得主最新发表新方法来自斯坦福大学医学院病理学和遗传学系，约翰霍普金斯医学院生物学系，以及华盛顿Carnegie学院（Carnegie Institution of Washington）等处的研究人员发展了一种能帮助观测体内细胞质中蛋白和蛋白相互作用的分析方法：differential cytolocalization assay（DCLA），这一方法已证实可以检测线虫RNA干扰和无意义介导衰变(nonsense-me ...

主要试剂及溶液的配制细菌培养基:1)LB液体培养基:胰蛋白胨10克酵母提取物5克氯化钠10克以950ml去离子水溶解，用5M的NaOH 调pH值至7.0(约0.2ml)，最后以去离子水定容至1L。高压灭菌15磅 20分钟，4℃保存。2)LB固体选择性培养基:LB液体培养基 1L琼脂 15g高压灭菌后，室温放置，待液体温度约50℃时， 加入50mg/ml的氨苄青霉素1ml，使氨苄青霉素的终浓度为50ug/ml。将培养基混匀后在超净台内分别倒 ...

大肠杆菌的基因型甲基化相关的基因型dam (DNA adenine methylase)Map position: 74 min功能：dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶，它能催化特异序列GATC中A的甲基化，保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断，同时在DNA复制时也起一定的辅助作用。dam基因的变异导致腺嘌呤（A）甲基化酶活性的缺失，使腺嘌呤 (A) 不被甲基化，易于获得非甲基化质粒。dcm (DNA cytosine methylase)Map po ...