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大家都对单核苷酸多态性（SNP）不陌生了，学理学生物的、学医学的、学农学的对此都算是有了一定的了解，这玩意在我的概念中就是检测碱基的变化状况而已（似乎太白话了），虽然只是检测，但是检测方法却是多种多样，如何选择合适的检测方法对整个实验来说确实是个重要的问题，选择无外乎三样：时间、钱、文章档次。目前来说，SNP检测应用比较多而且真正实用的，用来发文章的有测序、限制性片段长度多态性（RFLP）检测、质谱检测、Taqman检测 ...

核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay，RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA；未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA，免受RNA ...

好久没有来发帖了。今日偶然看到一个小tips。帖出来和菜鸟分享。1．溶液I—溶菌液：溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基） ...

质粒提取的原理因为觉得对新人很重要，所以再转贴一次。碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多 ...

2013年诺贝尔生理或医学奖落花落“基础研究”，无疑给了大家一剂兴奋：在最基础的研究上，坚持下去；在小实验室里，自由探索。丁香通试用中心为助力科研，特推出申请试用装，送丁当的活动。活动时间：2013.10.9-10.30活动形式：跟帖附上申请的试用装，每申请一件，送2个丁当。格式：我申请：动物组织总RNA提取试剂盒重点推荐：5款PCR、RNA提取试剂盒产品特点简介：1. 动物组织总RNA提取试剂盒：去除DNA污染；无需担心RNA ...

欢迎您到核酸基因技术讨论版！如果您是新手，在发贴前先明确目的！丁香园的原则是互相帮助，共同进取。如果觉得可以帮助他人，回帖即可。====1.我如何在这个版块得到我需要的信息？===如果你要在本版获取资料，请先检索本版，以节约您的时间和资源，不要盲目发帖，忽视【搜索本版】以及【精华区】的功能，另外请注意旧帖整理和FTP资源为你提供了便利，相信可以节省你的宝贵时间，上面可能有您急需的资料。如果你想了解其他地方你可以了解得更详细。== ...

SAGE 技术在理论上来说可以检测到一个细胞内所有转录体的表达，而且可以给每一个转录体定量，不管它是低丰度还是高丰度。SAGE和基因芯片技术一样，具有高通量、平行性检测细胞内基因表达谱的特点。但SAGE可在未知任何基因或EST序列的情况下对靶细胞进行研究，这一点是基因芯片技术所不具备的。目前关于SAGE技术的文章在国外发表很多，但感觉国内搞SAGE研究的不是很多。本版特地在继10月份推出基因芯片技术大讨论之后， ...

以Trizol说明书介绍的方法，将RNA和DNA的提取方法进行组合，同时提取RNA和DNA，RNA的纯度较高，可过1.9-2.0，而DNA的OD比值仅为1左右，请问各位有什么建议吗？以下是我的实验步骤，请各位指教。1.将培养板置于冰上，吸去培养液2.直接加入TRIZOL试剂(1ml/10cm2)，反复吹打3.将细胞裂解液转移到新的1.5ml Ep管中，室温放置5min4.加氯仿(0.2ml/1mlTrizol)，剧烈混匀15秒5 ...

丁香园专访：《生物实验室安全故事手记》主编孟博《生物实验室安全故事手记》主编孟博主编简介：孟博，华东师范大学脑功能基因组学研究所工作。丁香园荣誉版主Biowind。1978年12月出生，汉族，工程师，在读博士。教育经历：1996、9—2000、6：哈尔滨工业大学生命科学与工程专业，获学士学位。学位论文：以反义RNA技术研究鸡GDF-8基因功能2000、9—2002、6：哈尔滨工业大学生化与分子生物学专业，获硕士学位。学位论文 ...

这两年在美帝净做克隆实验了，以前读PHD时候还觉得自己分子克隆挺牛X的，来这边之后做了各种各样的构建才知道以前是坐井观天，刚才粗粗统计了一下，在美帝一年零八个月，我构建的质粒超过四百个，其中有很简单从PCR构建到拿WB结果的一共不到一周，也有巨难的花了四个月时间换了几次strategy才弄好激动得我半夜給老板发信的品种；有单片段酶切插入这种不用脑型的，也有九个片段逐一插入正反向还不同的。专家不敢说，但是熟能 ...

1、哪种浓度的酒精消毒效果最好？－－－－70%酒精杀菌力最强，它能使蛋白质脱水和变性，在3～5分钟内杀死细菌。因此，它用于消毒和防腐，适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。高浓度的酒精（95～100%）能引起菌体表层蛋白质凝固，形成保护层，使酒精分子不易透入，因此杀菌能力反而弱。2、试剂的等级有哪些？根据化学试剂的纯度，按杂质含量的多少可分为四级：一级试剂为优质纯试剂，通常用G·R表示；二级试剂为分析纯试剂，通常用A·R表示；三级 ...

一个高人的实验注意事项——超级有用记不得是在哪里看得了对我的用处相当的大，拿出来同大家分享：实验中的每个环节都很重要忽略任何一个都可能导致实验的失败每个人在实验中都有自己的一些好的细小的习惯例如tip头吸完后马上从移液器上取下来以免忙乱的时候又以同一tip汲取另一种试剂用完量桶或者烧杯后，及时清洗，并放入烘箱。不管大小实验，做完后都要认真做记录。一个枪头如果可以连续吸两次的话，也不能吸，主要是第二次吸时不准， ...

水是实验室内一个常常被忽视但至关重要的试剂。实验室用水有那些种类？能达到什么级别？不同实验对水的要求有那些？这些问题以前对我来说具有一些模糊的概念，前几天参加学校的纯水装置的招标，阅读有关的一些资料，初步了解了相关的知识，现在拿来和大家分享，绝大多数都是本人从外文资料翻译过来的，不当之处还望各位批评。这些资料也包括freecell战友在该版块的精华贴，在此也表示感谢！实验室常见的水的种类：1、蒸馏水（Distil ...

我索要质粒前也是参考了很多丁香园的帖子，所以有些语句可能和以往的范本雷同，请大家见谅哦2007年3月20日主题：explore the possibility of getting *** from your laboratory信件：Dear Dr. **,I am a post graduate student in ***Institute, Chinese Academy of Sciences. And one of my projects focuses on ***. It seemed that the mechanism you ind ...

有句话说得好：试用，是一种生活态度！能让我们的生活换一种方式，无所谓成功与否，尝试着申请都会让工作和生活充满快乐和期待。试了，才会发现快乐，未知，才有更广的世界。丁香通试用中心聚集了各类业界有名的商家所提供的试用机会以及业内人员最真实客观的试用报告，好东西就该亮出来，试用中心9月免费试用装精品来袭，小伙伴们接招吧！新活动：凡申请2件试用装送1个丁当，申请3件送2个丁当，赶快行动吧！参与方式：申请后将对应试用装申请记 ...

核酸基因版作为最热的基础医学版之一，战友们表现都比较热心。为发展本版的中坚及后备力量，繁荣本版，及方便大家以后晋级，专业不错的战友请到此自荐；同时加强交流学习，增进感情，共同提高！凡在本版已发50帖且得分10分以上的战友,为核酸版中坚人才,加1分鼓励.我们拟邀请这些战友参加本版的聚会或网络会议等活动.在此跟帖的战友,当达到上述条件时,自动升为中坚人才，同时加分鼓励。以下列格式进行：①用户名②简单介绍(年级专业及研究方向 ...

1 基因表达调控简介所谓基因调控，是指生物体内控制基因表达的机制。基因调控主要发生在3个水平上，即一是：DNA水平上的调控、转录控制和翻译控制；二是：微生物通过基因调控可以改变代谢方式以适应环境的变化，这类基因调控一般是短暂而可逆的；三是：多细胞生物的基因调控是细胞分化、形态发生和个体发育的基础，这类调控一般是长期而不可逆的。基因调控的研究有广泛的生物学意义，是发生遗传学和分子遗传学的重要研究领域。生物体内决定细胞 ...

《生物实验室安全故事手记》隆重登场！国内第一本依靠网络力量、由专业人士编写而成的实验室安全类书籍!主编 孟博 ID：Biowind实验室通则 副主编 田智 ID：tianx775分子实验室 副主编 向征 ID：jnuxz细胞实验室 副主编　 吴瑨 ID：b01191111微生物实验室 副主编 裴得胜 ID：kaige88动物实验室 副主编　 孙世顷 ID：shiqingsun出版单位：科学出版社原　价：￥ 36.00 元丁香园优惠价：￥ 28.80 元购买方式：丁香淘宝在线购买银行汇款：建设银行　1540 2099 ...

分子生物学研究尤其是病毒研究的过程中，通常要构建cDNA文库。分子克隆（第二版，中文版）介绍的方法一般不能得到全长的cDNA文库；undefined***55i5Fu7Q44wd5J17Rk5zL4xB7xD4w64u04ug8lL5927RIFyC4z66Ol6Dk8ka4uw6L87E74uD6Ol5$89hOFy89TU6Si4ww8d272vFyC6Si4ww7Rk59D8@O6oX6S951Q8@7cDNA文库）。下面这篇文章讲的是一种新的技术，因此将之介绍给大家，但愿对各位有所帮助。首先声明的是，本人在这里不是为某些公司做广告，请勿误会！！！文章来源：www.ebiotrade.com 科研社区 ...

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