全部

1 引言由于冻干药品呈多孔状、能长时间稳定贮存、并易重新复水而恢复活性，因此冷冻干燥技术广泛应用于制备固体蛋白质药物、口服速溶药物及药物包埋剂脂质体等药品。从国家药品监督管理局数据库得知，目前国内已有注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、注射用重组人干扰素α2b、冻干鼠表皮生长因子、外用冻干重组人表皮生长因子、注射用重组链激酶、注射用重组人白介素-2、注射用重组人生长激素、注射用A群链球菌、注射用重组人干扰素α2b ...

物理性质预测：Compute PI/MW http://expaxy.hcuge.ch/ch2d/pi-tool.html Peptidemass http://expaxy.hcuge.ch/sprot/peptide-mass.html TGREASE ftp://ftp.virginia.edu/pub/fasta/ SAPS http://ulrec3.unil.ch/software/SAPS_form.html基于组成的蛋白质识别预测AACompIde ...

因为自己实验后期需要使用这方面的技术,所以最近在查阅这方面的资料,想拿出来和大家一起分享.后期会把更详细的东西贴出来.英文水平一般,所以翻译的有点差,请海涵.Rac1 Activation Assay Kit被设计来鉴定贴壁细胞或非贴壁细胞的细胞裂解液中Rac活性数量(i.e. Rac-GTP, rather than the inactive Rac-GDP). 使用的glutathione (GST) pull-down方法，采用GST-agarose bead ...

在广大站友的支持下，蛋白版日益繁荣，不断有新站友加入。同时也有一些站友对本版加分规则不大了解。特此重申加分规则如下：本版倡导，发贴能真正让提问者获益。应助的时候有时只指个方向，对初学者或发问者来说也许受益有限。版主会根据应助者的应助权重相应加分。加分规则的要点：1。分数是对站友劳动的承认，是衡量站友对丁香园贡献大小的标志之一，同时也是分享别人某些高级劳动成果的前提之一。2。本讨论版的加分的目的是公正公平、鼓励原创、 ...

什么是转录因子？l 转录因子（Transcription factor，TF）是一类能与特异性DNA序列结合并调节基因转录的调控蛋白。l 转录因子通常是细胞内信号通路的核心蛋白，是将外界刺激转化为基因表达变化的关键调控者。为什么要研究转录因子？l 人体的35000多个基因在不同的组织、不同的时间具有表达差异性，转录因子的调控起到重要的作用。l 2012年的诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥，在小鼠成纤维细胞中表达Oct3/4、Sox ...

胶上酶切方法1．用1.5mm3切胶笔切下胶点，置于96孔板或1.5ml Appendorf试管中。2．用50ul双蒸水洗2次，每次10分钟（如用1.5ml试管, 则用500ul）。3．加考染胶色液（50mM NH4HCO3/CH3CN(1:1)）50ul，超声脱色5分钟或37℃ 20分钟，吸干。（若为银染胶点，可以不脱色，也可以加15mM K3Fe(CN)6/50mM Na2S2O3轻摇至变为淡黄色透明，再用水反复洗至无色）。4．重复步骤３，至蓝色褪去。5 ...

2010年11月8日人卫社专著《实验技术中的惑与获》在丁香园招募副主编和编者：http://article.dxy.cn/bbs/topic/18694164?tpg=1&age=012月5日，第一批入选编者的名单已经公布：http://article.dxy.cn/bbs/topic/18909982?tpg=1&age=0人卫社专著《实验技术中的惑与获》招募蛋白质技术领域编者，真诚期待您的加盟！目前，各研究单位、高校和医院对科 ...

如何阅读质粒图谱最近由于实验需要,需要查阅载体图谱,到园子里搜罗一番,发现虽然有人问载体图谱阅读的问题,也有前辈回答,但都不详细,借自己也在琢磨这个问题的机会,将我学到的东西整理一下,于大家分享。载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。一、一个合格质粒的组成要素复制起始位点Oril 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。＃ ...

蛋白质复性史晋辉(天津大学化工学院生物化工系，天津 300072)关键词：蛋白质复性；环糊精；分子伴侣重组DNA技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难：很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶、人胰岛素、人生长激素、白介素-6、人γ-干扰素等，不仅不能分泌到细胞外，反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约0.1～3.0μm的固体颗粒棗包含体［1］。这些 ...

如何选择凝胶生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。1.测定------分子量、PI当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简 ...

整理蛋白版2006年06月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区：蛋白羧基酰胺甲基化后酶切的道理？？？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6330676&sty=1&tpg=4&age=0【求助】蛋白质在生物体内从产生到降解的调节机制？？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65& ...

蛋白组学----ITRAQ技术简述1994年，Marc Wilkins在Siena双向凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）会议上最早提出了蛋白质组（proteome）概念，并于1995年7月的Electrophoresis杂志上发表。随着高通量、高灵敏度、高分辨率生物质谱技术的出现，蛋白质组学技术取得飞速发展，人们不再满足于对一个细胞或组织的蛋白质进行定性研究，而是着眼于蛋白 ...

新手向各位大虾请教我采用蒽酮硫酸法检测多糖，看文献上是直接采用葡萄糖的结果当成多糖含量。但后来又采用不同的方法将多糖水解后测单糖，所测的单糖含量远远高于用葡萄糖所测的多糖含量。后来又看了一下苯酚硫酸法测多糖，有个葡萄糖和多糖的转换因子，所以请教各位蒽酮硫酸法的转换因子怎么计算。 这是苯酚硫酸法中的葡萄糖标准曲线 精确量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥试管中，分别加水使成1.0ml ...

PTD介导的蛋白质转导技术及其在神经系统疾病治疗中的应用生理状态下，真核生物细胞膜仅对少量小分子具有通透性，大大限制了生物大分子药物对疾病的治疗。由于转基因技术可操作性差、转运效率低、具有潜在的生物毒性作用、并且并非所有细胞均能被转染等缺点，限制了其实际应用。PTD介导的蛋白质转导技术则使大分子蛋白质或多肽自由通透细胞膜成为可能，随之产生疾病蛋白质治疗技术。本文就这一技术及其在神经系统疾病治疗中的意义作一综 ...

我的实验：将400ul的matrigel胶注入小鼠皮下形成的那么一个黄豆大的像凝胶一样的东西，会有血管长入。然后活体动物注射荧光素标记的Isolectin，可与新生血管内皮细胞结合，然后取出组织，溶解在RIPA裂解液中，匀浆后离心取上清再测定荧光强度。该操作原文献只说用RIPA裂解液，没有给出成分。我用“RIPA”这个词检索，从一篇无关的英语文献中找到了配方。国内再查RPIA，共查到3-4种，大体成分均与英文文献 ...

一般性网站生物谷 http://www.bioon.com中国生物论坛 www.biooo.com丁香园论坛 http://www.dxy.cn/bbs/西陆生物探索者 http://www.bioprober.xilubbs.com（西陆）全文数据库检索论坛 http://ttpp.xilubbs.com/21世纪生物论坛 http://www.bio21st.com/中国生物论坛 http://www.biooo.com/Bio-Engine论坛 www.bio-e ...

整理蛋白版2006年05月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区 【求助】如何主动聚焦 请教http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6133724&sty=1&tpg=4&age=0【求助】求助http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6206917&sty=1&tpg=3&age=0【 ...

包涵体的纯化和复性总结信息来源：本站原创　更新时间：2004-10-19 3:49:00关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题，包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈，关于包涵体的处理一般包括这么几步：菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化，内容比较庞杂一、菌体的裂解1、怎样裂解细菌？细胞的破碎方法1.高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适 ...

翻译调控——连接基因组学和蛋白质组学的有效手段摘要：在细胞内，蛋白质水平和mRNA水平是不一致吻合的。对蛋白质合成的 调控不仅局限于转录过程，翻译阶段也有一部分调节作用，mRNA的水平不能完全代表蛋白质水平。应用蛋白质双向电泳等方法分离蛋白质存在许多缺点，因此，利用蔗糖密度梯度离心的方法研究在翻译过程中的蛋白质调控是有意义的。只有核糖体结合的mRNA才可以翻译成蛋白质，而游离的mRNA在翻译中不起作用。关键词 翻译调控 ...

摘要:蛋白质组研究目的在于从蛋白水平阐明基因的功能，这对于探索生命的奥秘具有重要的意义。蛋白质芯片是近年来兴起的一种强有力的高通量研究方法，能够一次平行分析成千上万的蛋白样品， 具有很高的敏感度与准确性。它将成为蛋白质组学研究中的强有力的研究方法，并最终架起基因组学与蛋白质组学的桥梁。1 　研究现状蛋白质组(proteome)是指一个基因，一个细胞或组织所表达的全部蛋白质成分。蛋白质组学研究的是在不同时间和空间发挥功能 ...