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我在两处看到GST-融合蛋白表达的方法有些困惑（主要集中在前几步）希望大家讨论。1、 1）将带外源DNA的pGEX载体转化入感受态，LB/Amp生长12-15hr。2）挑克隆于2mlLB/Amp中3-5hr3）加入100mmol/L IPTG至终浓度0.1mmol/L诱导表达，继续3-5hr4）。。。5）。。。2、1）On the first day, transform E. coli strain DH5α with the pGEX2TK–ER fusion expression ve ...

File Name：Protein Structure and Function （中华检验网）Language：EnglishFormat ：PDF6.78 MB Introduction Protein Structure and Function is an introduction for postgenomic biologists to the structural basis for the biological activities of proteins, with special emphasis on the i ...

说明：本版经常有求助血清蛋白质组学的帖子，但是作为一个新学科，很少有人熟悉。故摘录此书下载链接，希望从事相关研究的战友从速下载，以免过期。 Exploring the Human Plasma Proteome形态项：Publisher: Wiley-VCHNumber Of Pages: 394Publication Date: 2006-12-22Sales Rank: 2191348ISBN / ASIN: 3527317570EAN: 9783527317578内容提要：On ...

Isolation and Purification of Proteins 推荐言： 一本不错的书，从理论到实践，非常精彩。全书共670页，PDF格式，8.9Mb。欢迎大家下载。－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－Book Description: This publication details the isolation of proteins from biological materials, techniques for solid-liquid separation, concentrati ...

amazon ：This text takes the reader on a guided tour through the philosophical and physical foundations of protein isolation. Aimed at a student readership, it should also be very useful to life science researchers faced with the task of isolating a protein for the first time. The logic of the overall a ...

这是加拿大生物信息学会举办的蛋白组学workshop的讲义ppt一共为期5天，因为空间有限的问题我将分批贴出供大家下载,请尽快下载。注意这个空间的带宽为每月1GB，所以请尽量不要重复下载以给更多朋友机会。这是国外空间，教育网内朋友请用代理服务器。如果哪位有好的空间，请PM我，多谢。第一天Topic : 2DGESpeaker:David Wishart ProfessorDepartment of Computing Science and ...

首先我的目的就是单纯的Western,要看的是一个膜受体的表达,以前我们做的方法是:提取组织(血管),加入lysis buffer,玻璃匀浆,冰上半小时,12,000rpm离心5min,取上清,加入loading buffer, 煮沸5min,上样........ 实验室所有的人做所有的蛋白都是这个步骤.从来也没有想过选择12,000rpm是什么道理. (大概认为提取的是总蛋白),在我做的过程中,感觉Western结果很不稳定,而且每次都显示这 ...

一次认为最无望的化学转化，结果长出70多个转化子。分析原因，有以下几点不同于以往的做法：我认为关键不同点是以下的2、3、4、6点，但没时间和精力去验证，希望大家给点指示。1、质粒酶切与乙醇沉淀等操作比平时长，都大于12h。2、乙醇37℃挥发3h，当时怕时间过长质粒降解了。3、热激之前的保温和热激温度都比平时高2-3℃，怀疑温度计坏了，歪打正着。以前有次转化长出40多个，温度比较恒定。这次温度又高又不恒定，由此可以排除温度是 ...

56邮箱bio_inf@56.comQuote:一、生物学中文资料医学统计软件使用 617.32Kb数学模型有关知识资料库 4039.87Kb人工神经网络导论 4075.21Kb分子克隆及RNA干扰 5198.56Kb中国草地重要有毒植物_史志诚 29508.91Kb中国油脂植物 20914.90Kb分子生物学实验帮助文档 234.57Kb蛋白质分离纯化指导教材 5084.90Kb基因工程原理与方法 14456.65Kb微生物资源开发利用 10561. ...

1 引言由于冻干药品呈多孔状、能长时间稳定贮存、并易重新复水而恢复活性，因此冷冻干燥技术广泛应用于制备固体蛋白质药物、口服速溶药物及药物包埋剂脂质体等药品。从国家药品监督管理局数据库得知，目前国内已有注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、注射用重组人干扰素α2b、冻干鼠表皮生长因子、外用冻干重组人表皮生长因子、注射用重组链激酶、注射用重组人白介素-2、注射用重组人生长激素、注射用A群链球菌、注射用重组人干扰素α2b ...

物理性质预测：Compute PI/MW http://expaxy.hcuge.ch/ch2d/pi-tool.html Peptidemass http://expaxy.hcuge.ch/sprot/peptide-mass.html TGREASE ftp://ftp.virginia.edu/pub/fasta/ SAPS http://ulrec3.unil.ch/software/SAPS_form.html基于组成的蛋白质识别预测AACompIde ...

因为自己实验后期需要使用这方面的技术,所以最近在查阅这方面的资料,想拿出来和大家一起分享.后期会把更详细的东西贴出来.英文水平一般,所以翻译的有点差,请海涵.Rac1 Activation Assay Kit被设计来鉴定贴壁细胞或非贴壁细胞的细胞裂解液中Rac活性数量(i.e. Rac-GTP, rather than the inactive Rac-GDP). 使用的glutathione (GST) pull-down方法，采用GST-agarose bead ...

在广大站友的支持下，蛋白版日益繁荣，不断有新站友加入。同时也有一些站友对本版加分规则不大了解。特此重申加分规则如下：本版倡导，发贴能真正让提问者获益。应助的时候有时只指个方向，对初学者或发问者来说也许受益有限。版主会根据应助者的应助权重相应加分。加分规则的要点：1。分数是对站友劳动的承认，是衡量站友对丁香园贡献大小的标志之一，同时也是分享别人某些高级劳动成果的前提之一。2。本讨论版的加分的目的是公正公平、鼓励原创、 ...

什么是转录因子？l 转录因子（Transcription factor，TF）是一类能与特异性DNA序列结合并调节基因转录的调控蛋白。l 转录因子通常是细胞内信号通路的核心蛋白，是将外界刺激转化为基因表达变化的关键调控者。为什么要研究转录因子？l 人体的35000多个基因在不同的组织、不同的时间具有表达差异性，转录因子的调控起到重要的作用。l 2012年的诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥，在小鼠成纤维细胞中表达Oct3/4、Sox ...

胶上酶切方法1．用1.5mm3切胶笔切下胶点，置于96孔板或1.5ml Appendorf试管中。2．用50ul双蒸水洗2次，每次10分钟（如用1.5ml试管, 则用500ul）。3．加考染胶色液（50mM NH4HCO3/CH3CN(1:1)）50ul，超声脱色5分钟或37℃ 20分钟，吸干。（若为银染胶点，可以不脱色，也可以加15mM K3Fe(CN)6/50mM Na2S2O3轻摇至变为淡黄色透明，再用水反复洗至无色）。4．重复步骤３，至蓝色褪去。5 ...

2010年11月8日人卫社专著《实验技术中的惑与获》在丁香园招募副主编和编者：http://article.dxy.cn/bbs/topic/18694164?tpg=1&age=012月5日，第一批入选编者的名单已经公布：http://article.dxy.cn/bbs/topic/18909982?tpg=1&age=0人卫社专著《实验技术中的惑与获》招募蛋白质技术领域编者，真诚期待您的加盟！目前，各研究单位、高校和医院对科 ...

如何阅读质粒图谱最近由于实验需要,需要查阅载体图谱,到园子里搜罗一番,发现虽然有人问载体图谱阅读的问题,也有前辈回答,但都不详细,借自己也在琢磨这个问题的机会,将我学到的东西整理一下,于大家分享。载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。一、一个合格质粒的组成要素复制起始位点Oril 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。＃ ...

蛋白质复性史晋辉(天津大学化工学院生物化工系，天津 300072)关键词：蛋白质复性；环糊精；分子伴侣重组DNA技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难：很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶、人胰岛素、人生长激素、白介素-6、人γ-干扰素等，不仅不能分泌到细胞外，反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约0.1～3.0μm的固体颗粒棗包含体［1］。这些 ...

如何选择凝胶生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。1.测定------分子量、PI当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简 ...

整理蛋白版2006年06月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区：蛋白羧基酰胺甲基化后酶切的道理？？？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6330676&sty=1&tpg=4&age=0【求助】蛋白质在生物体内从产生到降解的调节机制？？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65& ...