蛋白质功能预测一、根据序列预测功能的一般过程如果序列重叠群(contig)包含有蛋白质编码区,则接下来的分析任务是确定表达产物——蛋白质的功能。蛋白质的许多特性可直接从序列上分析获得,如疏水性,它可以用于预测序列是否跨膜螺旋(transmenbrane helix)或是前导序列(leader sequence)。但是,总的来说,我们根据序列预测蛋白质功能的唯一方法是通过数据库搜寻,比较该蛋白是否与已知功能的蛋白质相似。有2 ...
第一章 色谱法概论1第一节 色谱法发展简史1第二节 色谱法中的一些术语3第三节 色谱法的分类3一 、根据分离的原理不同进行分类3二 、根据流动相的不同进行分类4三 、根据支持物的装填方式分类5第四节 不同色谱法的应用范围5第五节 色谱图的一些术语6第二章 蛋白质液相色谱纯化概论6第一节 蛋白质纯化的一般目标和方法6第二节 液相色谱纯化前的预备工作7一 、样品的稳定性实验7二 、样品的预处理及保存7三 、评价每一纯化步骤:9第三节 蛋白质色谱纯化技术理论简介9一 、 ...
蛋白质构象病周剑涛( 黄冈卫生学校生化教研室,湖北黄州 438000 )关键词:构象病;朊病毒;抑丝酶;β-淀粉样蛋白中图分类号:Q51;R373蛋白质结构生物学既从蛋白质一级结构序列,也从蛋白质空间结构及其动态变化去研究蛋白质的性质和功能。生物医学研究表明蛋白质空间构象发生异常变化会引起疾病发生,形成了蛋白质构象病(Protein conformational diseases)这一新的病理学概念。1. 蛋白质构象病及其分子构象病理学 ...
56邮箱免费共享资源整理:croninszl@56.com 生物学mrelite@56.com 化学物理学方面lfang_79@56.com 化学方面wustliang◎56.com 物理相关penicilinum 生命科学-医学方向hwzgj-bio@56.com 生物学wmgkgx@56.com 材料化学wmgkgx1@56.com 特典系列cell01@56.combioskgher@56.com cell杂志文献yanguoliuhen@56.co ...
HUPO 3rd第三届国际人类蛋白质组大会蛋白质组学——基因组的诠释大会组织委员会主席贺福初(中国) 共同主席Samir Hanash (美国)John J.M. Bergeron (加拿大) 秘书长孙建中(中国) 副秘书长徐天昊(中国)雷霆(中国) 委员会成员John J.M. Bergeron (加拿大)杜生明(中国)Samir Hanash (美国)贺福初(中国)马林(中国)马阳(中国)Matthias Mann (丹麦)Young-Ki Paik (韩国)Emanuel Petricoin (美国)P ...
转至于http://www.51protocol.com/pro/WesternBlotting/20071031/38742_2.html初涉WB,与大家一起学习:)样品处理 由于蛋白酶抑制剂可影响蛋白定量,且新鲜蛋白很少降解,故可不加,如加按建议比例即可。提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM)。 注意SDS终浓度勿超过10%。对于心脏,肌肉等碎屑较多的组织可用5%的SDS,肝肾等组织2%即可。培养的细胞(定性) ...
1.一定要在lysis buffer中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使band压出来也会很浅,结果也不可信。2.加一抗后最好4度过夜,保证抗体有充分的结合时间。因为磷酸化的蛋白只占总的蛋白量的极少部分。4度也可使一抗重复使用多次。毕竟磷酸化的抗体都挺贵的。二抗则室温1小时即可。3.磷酸化抗体的好坏是一个关键因素,所以要选择好的厂商。个人认为,Cell signaling公司做的磷酸化抗体不错,尤其 ...
摘要:本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述,Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应,先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来,然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体(NC膜)上,然后再加抗体形成抗原抗体复合物,利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片上。同时对Western bloting在实际操作中应注意的细节问题进行了归纳以及与其它免疫技术就抗体检测方面进行了比 ...
下面是本论坛的关于蛋白质纯化的文章,整理如下:蛋白质复性后进一步纯化时,加入氯化钠即会出现沉淀,怎么办?http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/136508_0.html蛋白质纯化方案http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1100586&sty=3&keywords=%B5%B0%B0%D7%D6%CA+%B4%BF%BB%AF蛋白质纯化、HPLC制 ...
http://www.helixnet.cn/bbs/thread-13191-1-1.html 高效表达外源蛋白的方法 growth-associated方法(08.11.27更新)http://www.helixnet.cn/bbs/thread-4127-1-1.html 毕赤酵母表达的一般策略第一章毕赤酵母表达的一般流程第二章毕赤酵母表达实验步骤第三章阳性重组子的初步筛选第四章对得到阳性菌株的诱导培养http://www.heli ...
做了这么多的电泳一直都是闷着头做,今天突然意识到堆积胶和分离胶pH不同,不知为何。以下内容为转载。SDS-PAGE电泳的原理及浓缩胶浓缩样品的原理(甘氨酸的作用)SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术。下面就SDS-PAGE的基本原理做简单介绍。SDS-PAGE电泳的基本原理?SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS, SDS能断裂分子内和分子间氢键 ...
一、原理细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量,可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液:丙烯酰胺(Acr)29.0g,亚甲双丙烯酰胺(Bis)1 ...
本书主要介绍生物质谱技术与方法。全书共分14章和附录。第1章对生物质谱的发展予以扼要介绍。第2-4章侧重于生物质谱技术,包括生物质谱仪器、电离与接口技术、分离与鉴定联用技术。第5-14章侧重于生物质谱方法,分别为基本分析、氨基酸序列的解析、肤蛋白质分析、蛋白质组学分析、临床医学分析、核酸分析、分子间相互作用分析、药物分析、生物体液分析、样品分析前处理。附录包括数据库检索的一些知识和操作。前言第1章 生物质谱的发展参考文献 ...
①《Cell》更强劲的DNA修复=长寿;②免疫系统增强可以预防肺癌;③中外学者最新Nature发现癌症代谢成瘾新机制;④约翰霍普金斯大学Nature发文发现催产素的新作用
邮箱:proteomics2005@126.com密码:123456在草稿箱中文章目录:Comprehensive Proteomic Analysis of Human Pancreatic JuiceIdentification of metastasis-associated proteins in a human tumor metastasis model using the mass-mapping techniqueThe comparative analysis of serum ...
本内容需要回复后才能下载! 本书版权归作者所有,请于下载后24小时内删除分子克隆实验指南第3版(高清英文版)(molecular_cloning)protocol名称Molecular cloning: a laboratory manual. Vol. 2Molecular Cloning: A Laboratory Manual第 第 1 卷 卷, David William Russell作者John J. Sambrook, David David William Russell版本3, 插图版出版商 ...
1Western blot 方法大全http://www.dxy.cn/bbs/thread/8569374http://www.dxy.cn/bbs/thread/6235976http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/7063455_1.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=30771&sty=3&keywords=western+blothttp:/ ...
Separation Methods in Proteomicsedited by Gary B. Smejkal2006年出版,目录Chapter 1Applications of Pressure Cycling Technology (PCT) in 2DGEChapter 2Applications of Ion-Exchange Chromatography (IEX) to Reduce Sample Complexity Prior to Two-Dimensional Gel Electrophore ...
本人利用该方法制备了高效价的多克隆抗体,与大家分享!AnimalsHealthy male New Zealand rabbits aged 3-6 months (body weight ~ 2.5 kg) lived in animal house at least for 3-4 days for adapting to the new circumstance.Polyclonal antisera productionSample A: Emulsify your aimed protein 200-300 mg in PBS with same volu ...
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