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1．材料试剂：ZipTipMC，ZipTipμ-C18 为millipore公司产品。磷酸化蛋白β-casein蛋白为sigma产品，纯度90％。Trypsin为德国Roche诊断公司经修饰的测序级的酶（产品编号1418025），硝酸鉫（Ga(NO3)3）为Aldrich公司产品；实验用水为Milli-Q纯水器制备的超纯水。色谱纯乙腈为美国Fisher Scientific 产品；a-氰基-4-羟基肉桂酸(a-CCA)为Bruker提 ...

做了两个月的western blot，在跑SDS-PAGE中，几乎遇到了各位战友在站内提到的所有问题（比如胶聚合速度过慢，胶聚合不均匀，胶孔漏样，蛋白带笑脸状等等）。虽然SDS-PAGE做了这么多遍，可每次都有不同的问题出现，所以很是佩服自己“创造”问题的能力。在此把这些问题归纳一下，算是总结经验，也算是给总是失败的自己打打气，更是想把这些经验教训与各位战友分享，希望能给斗争在SDS-PAGE中的战友一些启发，也希望实验 ...

(Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET)技术在活细胞生理条件下无损伤的研究蛋白质-蛋白质间相互作用》FRET基本原理荧光共振能量转移是指两个荧光发色基团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量向邻近的受体分子转移（即发生能量共振转移）。下面以GFP的两个突变体CFP（cyan fluorescent pr ...

watermark分子生物学基础 4.46Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/DNAI.ppt蛋白质和DNA的关系 4.88Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/DNAIII.pptDNA复制（第一讲） 1.28Mhttp://immuneweb.xxmc.edu.cn/havrd%20molecular/Replicatio ...

对蛋白组学方面的新手很有用。MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY REVIEWS, Mar. 2002, p. 39–63Molecular Biologist’s Guide to ProteomicsPaul R. Graves1 and Timothy A. J. Haystead1,undefinedDepartment of Pharmacology and Cancer Biology, Duke University,1 and Serenex Inc.,2 Durham, North Carolina 277 ...

你注意过以下技巧吗?1. Milk-based blockers may contain IgG that can cross-react with anti-goat antibodies. This can significantly increase background and reduce antibody titer. Milk may also contain endogenous biotin or phospho- epitopes that can cause higher background.2.To stretch the O ...

本人原创制作PDF，内容链接十分齐全，阅读十分便利。感谢墨尔本大学分子生物学实验室的网页内容。同时支持icesugar75 Frederic codegreen 三位版主的工作。（read MM ：chhualongdxy）ContentsIsolation of DNA fragments using glass milk (GENE-CLEAN) SOUTHERN BLOTSOUTHERN ANALYSIS OF MOUSE TOE/TAIL DNA Northern transfer p ...

Proteomics in Practice: A Guide to Successful Experimental Design, 2nd, Completely Revised EditionShort descriptionStill the only concise practical guide, this edition combines the best features of a laboratory manual with a concise reference for successful experimental des ...

以下是关于蛋白质测序的论坛帖子,希望有所帮助:蛋白质测序公司http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1424257&sty=3&keywords=%B5%B0%B0%D7%D6%CA+%B2%E2%D0%F2蛋白质测序联系http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/50023_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65 ...

无需破坏胚胎，能够量身定做，没有排异反应，甚至可以克隆某年某月的某一天，脑子坏了，不再识字；从口腔刮点细胞，导进几个转录因子，变成干细胞；回种到脑子里，神经再生，突触再连，恍然大悟—原来这就是今夏炒得沸沸扬扬的诱导干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS cells），为包括Nature在内的各大媒体竞相报道，为大大小小实验室人员广泛研究讨论，丁香园干细胞版亦有精华讨论【新进展】干细胞新进展－－成体细胞 ...

转自科学网论坛 Linxubo 点：free user 下载Molecular Biology Methods Bookshttp://rapidshare.com/files/58795488/201_Combinatorial_Library.pdfhttp://rapidshare.com/files/58796259/202_Thyroid_Hormone_Receptors.pdfhttp://rapidshare.com/files/587 ...

如题。本书全面介绍目前蛋白质技术理论及应用，全书共 3843 页，够厚的吧。目录如下。Chapter 1 Strategies of Protein Purification and CharacterizationUnit 1.1 Overview of Protein Purification and CharacterizationUnit 1.2 Strategies for Protein PurificationUnit 1.3 Protein Purification Flow ChartsU ...

～～～蛋白质技术讨论版170000帖庆典活动～～～蛋白质技术讨论版作为实验技术讨论区一个重要的板块，长久以来得到众多热心的战友厚爱和支持。为了答谢战友们的关心和维护，现举办十七万帖有奖抓图活动，希望广大战友在这个充满激情的夏天变得更加富有活力。我们有信心把蛋白版办成丁香园的精品版块，我们将向更高的目标迈进！我们期待每一位战友的参与！在这里感谢大家长久以来的热心和关爱，你们才是蛋白版的支柱和主人～～～第十七万帖抓图 ...

来自 Research Laboratory for Biotechnology and Biochemistry ( RLABB)，不知道那个兄弟可以 翻译 一下：HOW DOES AN SDS PAGE GEL REALLY WORK? 06/06/2007The system most people use for separating proteins by gel electrophoresis was formulated by Laemmli (Nature 227:680-685 ). It is such a commonly used laborat ...

一、质粒绝大多数的生物都是以DNA的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication，或译为复制起点)，使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon，我们姑且把它译为为复制体吧！。原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。其中质粒的基因体和原核染色体类似，是由双 ...

酪安酸差色光谱法1.打开分光光度剂，预热30分钟，是紫外灯处于稳定发光状态2.在2容积为1mlde 微量石英比色杯中分别加入900ulPH7.4,PH12.0的0.1mol/l磷酸缓冲液，把盛有PH12.0缓冲液的比色杯放入样品杯中放入支架上，把盛有PH7.4缓冲液的比色杯放入到参比杯的支架上，然后准确的测出295nm波长下的光吸收值，或用250－350nm扫描3.在上述的2个比色杯中分别加入100UL的待测样品液，小 ...

外源基因在宿主细胞中的高效表达1．有效的转录起始与基因的高效表达有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键性步骤之一，也可以说，转录起始的速率是基因表达的主要的限速步骤。因此，选择强的可调控的启动子及相关的调控序列，是组建一个高效表达载体首先要考虑的问题。最理想的强的可调控的启动子应该是：在发酵的早期阶段表达载体的启动子被紧紧地阻遏，这样可以避免出现表达载体不稳定，细胞生长缓慢或由于产物表达而引 ...

转自http://www.51protocol.com/pro/WesternBlotting/20071031/38744.html1. 在western实验中，通常有人采用TBS，有人采用PBS，能否有人解释一下二者在使用中的区别？　　选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很重要的。PBS的缓冲能力强于TBS（因为混合缓冲液在一定的离子强度下常常具有更宽的缓冲范围），TBS在PH7.0以下缓冲 ...

双向电泳实验前一天将所需的烧杯,试瓶,玻棒,量筒等泡酸.并向准备间要求大量的双蒸水.第一天,准备试剂.1.水化液Reagent Quantityurea12gChaps0.5gBromphendblue50μl 1%solution加双蒸水定容至25ml,1ml分装贮存于-20℃1)加双蒸水搅拌均匀,要求没有气泡和颗粒,否则会影响实验结果.尿素可以在27℃水浴中溶解,温度不可过高.2)DTT和IPGbuffer临用前加:1ml ...

我总结了一下：具体有几类，但有些问题想请教大家。1，由于很多蛋白有各自的特性，我们遇到需要检测磷酸化的时候，可以检索文献资料，看看是否有可靠的方法可选择。2，一些蛋白磷酸化后其生物学功能会发生改变，可以通过检测生物学功能的变化来间接检测其磷酸化是否发生。但是这个办法操作性很差，因为需要提取蛋白并且需要保证其活性，同时也需要一定量才可以达到可以检测到活性变化的水平。3，此外有非特异性的丝，酪氨酸磷酸化抗体，具体情形 ...