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总结了论坛现有的sds-page及相关方面的绝大部分帖子，并没有进一步筛选精华，因为，可能每个人遇到的情况不同，一个人认为是精华不一定代表对所有人都适用，因此，集合了这么多帖子，也许里面某个小小的问题就是困扰实验的症结所在，主题后面的数字代表了回帖数目，可以据此决定是否有必要浏览该帖子。希望能够对大家有用，如有任何建议，欢迎提出。据说考马斯亮兰能染出颜色就能做出Western是么？SDS－PAGE中用琼脂糖封边有 ...

以下为有关于gst的帖子，供大家参阅：大肠杆菌表达的GST和人的GST有同源性么http://www.dxy.cn/bbs/thread/402809如何去除GST融合蛋白以外的GST的表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/711228请教GST蛋白的纯化http://www.dxy.cn/bbs/thread/585739GST pull downhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/496 ...

8.20会议大会报告以及疾病蛋白质组学分会信息可以在本帖中获得。8.21大会会议报告以及疾病蛋白质组学分会部分信息可以在本帖中获得，如需要全部资料可以看看以下信息：8.20和8.21的会场报告已经全部发到福区建立的共享资源区了。请感兴趣的战友到以下网址下载：http://biodxy.ys168.com/file name：第五届蛋白质组学大会信息－dxy蛋白质技术讨论版 蛋白质技术讨论版第五届中国蛋白质组学大会暨首届粤 ...

蛋白质芯片技术是继基因芯片技术后发展起来的生物检测技术,是蛋白质组学研究中除了酵母双杂交、双向电泳技术、质谱技术等之外的一种重要的工具。蛋白质芯片技术具有平行、快速、自动化的优点，并且检测到的平行数据误差更 小,更准确,这对于高通量的研究具有非常重要的意义。它的出现对于生物学、临床检验医学、遗传学、肿瘤学等多学科的进步具有极大的推动作用。蛋白质芯片技术根据芯片上固定的物质不同又分为抗体芯片与蛋白芯片。近几年来，随着抗 ...

好的抗体对做好Western blot非常重要，但新手在刚接触Western blot时，会面临一抗选择的困惑：单抗还是多抗？这个问题，不同的人又有不同的回答，究竟选择的依据是怎样的？欢迎大家按格式跟帖讨论，我们会评选出10名回答出色的幸运网友，送上10个丁当。跟帖格式：示例：从实验室经费是否充裕这个角度出发，经费宽裕选单抗，资金不宽裕就选多抗。（仅供参考格式）提供部分站友的回答，抛砖引玉：@frankcai ，认为：一般来说单 ...

1.抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），而且说是100微升，但至多 ...

华中农业大学02年研究生考试试题A华中农业大学02年研究生考试试题A答案华中农业大学02年研究生考试试题B华中农业大学02年研究生考试试题B答案西北农林科技大学02年研究生考试试题及答案中科院1999年生化A、B卷、01生化B卷、02年试题中科院生化与分子生物学试题03/04年广州医学院1998年攻读硕士学位研究生入学考试试生物化学广州医学院2000年攻读硕士研究生入学考试试题中山大学医学院硕士生物化 ...

求助：DTT的化学结构式。求助：急寻cayman公司国内代理Purification of a therapeutic recombinant protein using expanded bed adsorption chromatography:protoOptimal solubilization screening strategies for GST-fusion membrane proteins:protocol请教原核表达的问题，为啥没见表达针对蛋白测序 ...

鉴于原核表达的两大热门系统，his tag系统和gst系统，从园子里归纳出以下帖子，以方便大家参考。这是关于his tag的讨论贴蛋白纯化高手请指点（his）http://www.dxy.cn/bbs/thread/276543请问哪位做过6-His蛋白？http://www.dxy.cn/bbs/thread/36760his融合表达问题！再问载体！http://www.dxy.cn/bbs/thread/633019his-tag标签 ...

很多战友（包括我）对“复杂”的生物学软件和厚厚的软件使用说明书充满了恐惧，以至于始终不能够用它们来提高自己的工作效率。很多不太懂电脑的战友就是被这些复杂的东西吓得永远不敢去用软件的。我们做StepByStep的初衷就是让初学者按图索骥地几分钟之内就学会怎么用一个生物学软件，而更进一步的功能可以在使用中自己去慢慢摸索。StepByStep的中心思想：++++几分钟，一个例子学会一个软件的基本使用！++++目标读者：生命 ...

离心原理　当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比，颗粒越小扩散越严重。而沉降 ...

做了五个月的Western Blot ，有一点点小心得，给新手点经验．蛋白提取：１． 总蛋白提取（胞膜，胞浆，胞核）：组织匀浆后,15000g, 4度, 20分钟后,取上清.Buffer:NP40 750ul, 脱氧胆酸钠0.5克, SDS 0.1克, 加undefinedPBS 至100ml. 再加入PMSF(7.4mg/ml) 0.1ml. (现用现加)7.4mg/ml PMSP异丙醇溶液: 取A mg PMSF 加 A/7.4 ml 异丙醇.工厂-20度储存２．组织膜蛋白提取：所在操作冰上进行（1）取组织，用PBS冲洗干净组织上的 ...

【兴趣小组】《Guide to Protein Purification, 2nd Edition》读书笔记（二）http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=16631165&sty=1&tpg=1&age=0下载千本书不如好好读一本书，承蒙FreeCell版主提供的资源，《Guide to Protein Purification, 2nd Edition》Methods in Enzymology, Volume 463http://www. ...

本篇虽然是《蛋白质纯化武器》系列中的第三篇，但它属于全体战友，属于伟大的互联网。系列前两篇分别为：蛋白质纯化武器－设备篇http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=15120322&sty=1&tpg=1&age=-1蛋白质纯化武器－工艺篇http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=15298689&sty=1&tpg=1&age=-1与前两篇为本 ...

【转帖】染色质免疫沉淀（ChIP）技术的难点及应用本文转自密理博中国博客，转载请注明出处作者：柴晶晶序言随着人类基因组测序工作的基本完成，功能基因组学的研究逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域。研究某个蛋白因子的调控功能，可以通过对蛋白活性（激活或抑制其活性），蛋白数量（过表达Overexpression或基因缺陷型Knockout）, 以及蛋白功能（功能缺陷型蛋白Dominant- ...

膜分离是在20世纪初出现，20世纪60年代后迅速崛起的一门分离新技术。膜分离技术由于兼有分离、浓缩、纯化和精制的功能，又有高效、节能、环保、分子级过滤及过滤过程简单、易于控制等特征，因此，目前已广泛应用于食品、医药、生物、环保等各个领域。康宁生命科学的过滤、超滤产品在生物医学及制药研究领域有着及其广泛的应用，适合药品及生物制品的澄清、分离、纯化和浓缩等各个环节。本人有多年的膜过滤技术经验，受丁香园和Corning（康宁 ...

首先欢迎您到蛋白质技术版块来，头次为客，下次为主，希望您在本版有收获，也希望您伸出热情的双手帮助处在实验困难中的战友。如果您已阅读了本版的规则，您已经不全是一名新手了。本话题祝贺您进入下一个阶段，如何使用丁香园资源。这只是一个简装本，更详细更具体的指南，您可在丁香园 --- FTP 资源讨论版找到。链接是：http://www.dxy.cn/bbs/post/page?bid=86&sty=1&age=0进入话题前重申：丁香园资源都由热心 ...

很遗憾，dxyprotein@163.com 邮箱已经由于不正当使用遭禁用：http://www.dxy.cn/bbs/thread/3590569http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3705030&sty=3&age=0&tpg=1&ppg=3请需要下面资料的朋友耐心等待，我们将将以下资料上传到老赵FTP，请以后直接从老赵航母下载，具体使用参照老赵航母规则，谢谢理解！邮箱中具有的资料：pi ...

~ ~ ~ ~ ~ 蛋 白 版 一 周 无 人 应 助 帖 ~ ~ ~ ~ ~ 1. 本帖仅每周更新本楼一周无人应助帖和每月更新2楼一月无人应助帖，既往帖请于跟帖中寻找。2. 原则上自发帖之日起超出3天无人应助（本人顶帖亦算作应助）则归入无人应助帖，应助战友请于原帖后发帖应助,应助48h后自认为应该加分而未能加分的战友可到积分申诉区给出应助链接以便加分。3. 非整理员跟帖者一律删除。如有良策或纠错或其他可pm整理者，我们将专辟4楼用于回应。4. 已应助帖不代表求助已经解决，鼓励战友继续积极应助，加分机会与尚 ...

2011年鄙人做western的时候，发现目前的资料都很老，网上的资料也大多互相传抄，说法各异，于是综合了目前网上所能找到的资料和个人实际经验，编辑了这份western blot操作步骤2012版，内容包括主要操作步骤和所需要注意的有用的细节，并附上参考文献（原谅我无法像Endnote那样一一注明文献出处，只能大概标注出引用的参考资料），希望对大家有帮助。鄙人按下文的步骤操作已经做出来了稳定可重复的、背景干净的w ...