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        【原创】蛋白提取步骤(逐步提取胞浆蛋白,核蛋白和膜/骨架蛋白)

        这个protocol应该可以满足大部分人的需求。我孤陋寡闻,因需要检测可以溶于两种不同去污剂的蛋白,看到一篇文献里蛋白提取方法,完全被折服了。太强悍了,蛋白还可以这样提。我以前一直以为裂解液裂解后,沉淀里面没有蛋白了,现在才发现沉淀里还含有大量不溶于裂解液里去污剂的蛋白。故将这个protocol发出来供我和一样的新手学习。我以前是裂解细胞,离心,测浓度,然后直接往整管里加loading buffer,再离心取上清,看 ...

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        【资源】(新书下载 2011.6.6已重新上传)Proteomics: Methods and Protocols 蛋白质组学方法和技术

        Proteomics: Methods and Protocols 2009-6蛋白质组学方法和技术by J?rg Reinders and Albert SickmannProduct DescriptionSince the development of the concept of “proteomics”, great progress has granted deeper insight into the cellular network, but the enormous range of protein abundance, ...

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        【分享】生物化学的经典宝书《Lehninger Principles of Biochemistry》电子书

        请到下面这个贴子处认真学习发贴规范,并改正后归还积分!http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=154&id=4562313&tpg=1&ppg=1&sty=3QUOTE:基于生物化学的经典宝书《Lehninger Principles of Biochemistry》第二版的电子网站,语言:英文。每章内容包括正文、概要、进一步的阅读参考文献、习题及解答,还包括名词解释镜象站点打包下载QUOTE:Lehnin ...

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        【资源】蛋白质技术新书分享

        Protein Targeting Protocols(Second Edition)Publisher: Humana PressNumber Of Pages: 558Publication Date: 2007-03-30 ISBN / ASIN: 1588297020EAN: 9781588297020Binding: HardcoverManufacturer: Humana PressStudio: Humana Press----------------------------------------------------- ...

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        层析纯化蛋白讨论集成

        以下是蛋白论坛关于层析纯化蛋白的大部分有一定深度的帖子(其中大多数讨论对于接触蛋白纯化的新手及做纯化工作的同仁来说都有积极意义),包括亲和层析、疏水层析、离子交换等几个系列,罗列主题多有概括以方便大家寻找。此项工作将一直进行下去直至版块有新的安排为止。层析纯化蛋白讨论集成之一(亲和层析)关于亲和层析的纯度问题CNBr-Sepharose 4B 的再生离子交换层析与亲和层析 离子交换?亲和层析?亲和层析间隔手臂分子的选择关 ...

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        关于<非变性/native-PAGE及相关的蛋白回收>帖子总结.

        1. 一般Native-PAGE方法非变性电泳非变性胶蛋白电泳求助:Native-PAGE方法Native-PAGE Protocol2. Native PAGE 分离碱性蛋白求助:碱性小肽非变性电泳非变性电泳的高手请进! 3. 回收目的蛋白如何从凝胶中提取蛋白,谢谢求助:关于从电泳凝胶中如何萃取蛋白质?水平SDS电泳求助有没有方便省钱的方法从PAGE胶回收蛋白想从sds胶里面回收蛋白,几个相关的问题SDS-PAGE电泳后可以回收再复性吗 ...

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        关于利用毕赤酵母表达外源基因的帖子集成(完成)

        1.毕赤酵母表达实验手册总结 2.关于毕赤酵母喜好密码子3.几篇关于毕赤酵母的文章 4.毕赤酵母发酵问题5.Help!毕赤酵母破壁问题?6.毕赤酵母转化问题7.毕赤酵母表达实验手册总结 8.关于毕赤酵母菌表达的大作修改稿 9.毕赤酵母分泌表达出现问题~~求救~~10.急!急!关于毕赤酵母表达小肽的技术11.影响外源基因在巴氏毕赤酵母中表达的因素 12.毕赤酵母电转化 13.再谈毕赤酵母的表达问题14.有用pPICZaA做毕赤酵母表达的吗?15. ...

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        提议:双向电泳工作者联会

        我有个提议:我们做双向电泳的的人不妨在此留下联系方式,以便以后大家交流经验,共同进步。斑竹语:现在整理一下大家的联系方式是:happyf jordanjie@163.com.dyz2002 szwjie@sohu.compengkp pengkp@yahoo.com.cnyglky yglky@sohu.commutongfeige guog@mail.tmmu.com.cnflyingheart liuzy87@sohu.com菊开那夜 dre ...

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        《蛋白质技术讨论版导读》之 [搜索本版]以及本版资源的使用

        在发贴之前先,请各位新老站友一定先检索一下相关话题的帖子,以避免对您时间和资源的浪费。目前在蛋白板块中有许多非常好的专业讨论帖子。许多求助的朋友在第一时间选择的可能是发新贴,忽视了以及的功能。您可以在通过键入keyword或者在Poster中输入站友的ID对本版以往的帖子进行检索。一定能在第一时间获取您所需要的信息。在icesugar75、codegreen主任积极倡议下,《蛋白质技术讨论版》中已有众多战友从 ...

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        【资源】163公用信箱,1个多G的生物资源!

        163公用信箱,1个多G的生物资源!又上传了大量生物资源到我的公用163信箱,同时做了简单的整理,同广大虫友共享,大家可以随意下载,只是希望大家不要随意对资源进行改动,更不要对信箱密码进行修改,我已对信箱采取了密码保护,希望大家与人方便,自己方便,也希望大家在下载资源的同时,能多顶顶此贴,别让我辛苦上传的资源沉了!大家有什么要求尽可以在此提出来,我会尽量满足大家的要求!!emuchgtj-1@163.com 密码:emu ...

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        【原创】蛋白质不表达:常见原因及分析

        喜欢转贴的,请注明来自中国生命科学第一网:丁香园。根据自己体会和蛋白版的既往精华帖子,总结了没有发现蛋白质表达的原因,或者蛋白质不表达的原因,欢迎大家拍砖。1.载体构建错误。 这个屡见不鲜,很多克隆新人经常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体,其克隆位点常有一两个碱基的区别;另外有些酶产生粘端有些酶产生平端,这些都容易导致读码框错误,从而表达不出来。2.宿主菌选择不当。不同的宿主菌其基因型是不一样的。有些经过特 ...

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        【资源】常用生物学软件简介

        1. Oligo 6是目前使用最为广泛的一款引物设计软件,除了可以简单快捷地完成各种引物和探针的设计与分析外,还具有很多其他同类软件所不具有的高级功能: a) 已知一个PCR引物的序列,搜寻和设计另一个引物的序列。b) 按照不同的物种对MM子的偏好性设计简并引物。 c) 对环型DNA片段,设计反向PCR引物。d) 设计多重PCR引物。e) 为LCR反应设计探针,以检测某个突变是否出现。f) 分析和评价用其他途径设计的引物是否合理。 g) 同源序列查找,并根据同源区 ...

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        【分享】强烈推荐---各类学习资源的56@邮箱的汇总(共2975条)

        不是我自己整理的,但是我觉得很不错转载 from ccebbs友情建议:crtl+F 先搜索你所需要的资源,不然眼睛都花了前面是书名,后面是共享邮箱名1 Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical... 2006.01.15 16:30 14082.65Kb hwzgj-chem,hwzgj-chem2 dragen2 01关节镜下使用.. 2006.01.01 11:49 10845.83Kb ang6166303 01关节镜下使用.. 2006.01.01 11:49 1 ...

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        【原创】Western Blot 傻事儿集合-教训讨论贴

        成功经验听多了,偶尔也要谈谈失败的经验,大家引以为戒。师弟师妹们试验出了问题,凡是我犯过错的都能很快指正。大家做过什么失败的实验,都来分享一下吧~最好附上解决的办法,错了没事,改了就好。你有啥不开心的啊,说出来大家高兴高兴~~1、SDS-PAGE不拆胶条电压调到120V,电流就是上不去,跑了三四个小时之后,师姐过来一看,你胶条都没拆呢!还跑那么久!2、内外板放反。低的一面冲外。不知道大家用的电泳槽是不是一样,里面低一些的 ...

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        【建议】Western Blot 常见问题分析

        1. 在western实验中,通常有人采用TBS,有人采用PBS,在使用中有什么区别?  选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很重要的。PBS的缓冲能力强于TBS(因为混合缓冲液在一定的离子强度下常常具有更宽的缓冲范围),TBS在PH7.0以下缓冲能力较弱(不过PBS易污染)。但我们常常要根据我们实验目的选用合适的缓冲液,如在蛋白纯化中进行阴离子交换层析,阳离子缓冲液首选TBS;阳离子交换层 ...

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        【转帖】史上最强的56邮箱共享资源各个学科合集,相信总有一些你想要的资料!!!

        xinxinmp3@56.com临床皮肤科杂志200403-04 13985.03Kb临床医师指南皮肤性病学分册 2340.80Kb国家基本药物临床手册(西药).pdf 10953.50Kb皮肤科疾病诊断与治疗 13051.32Kb老年皮肤病学 王树椿jin.yi.xiao2@56.com化学工程师技术手册.part3.rar 10538.27Kb化学工程师技术手册.part2.rar 18534.02Kb液相色谱检测方法 9571.49Kb色谱柱 ...

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        《蛋白质技术讨论版导读》之 关于索取资料的说明

        一.通过Email在论坛索取资料的管理1、对提供资料者,我们表示感谢,希望您遵守以下规定:1)认真介绍自己拥有的资源;2)资料不涉及版权等法律问题;3)提供资料时注明:“不接受回帖索取,感兴趣者请直接给我的Email信箱:abc@dxy.cn来信索取”2、对于索取资料者,希望您遵守以下规定:1)保证不将在丁香园免费获得的任何资源用于商业目的2)不回帖子索取资料,而是通过Email向作者联系,保持学术论坛的氛围。此规定自即 ...

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        【公告】蛋白版热心战友征集令~~~

        又开始新的一年了…………首先代表蛋白版全体版主祝愿广大战友工作顺利,学习好好,生活美满……经过了几年的努力,丁香园越来越繁荣,丁香园的战友越来越多,我们来这里的意义也就越来越大。作为丁香园的超级大版之一,蛋白质技术讨论版欢迎越来越多的战友来到这里说出您的疑问,贡献您的知识。您来这里得到帮助了,您是幸福的,同样,如果您来这里给与帮助了,您也一样是快乐的。在此新年到来之际,蛋白质技术讨论版征集蛋白版热心战友,目的在于能够在 ...

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        【专题讨论】蛋白表达自动诱导系统以及大幅度提高产量

        最近2个月一直在研究studier的auto-induction Protein Expression System.他今天三月份在Protein expression and purification上发表了一篇长达28页的文章“Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures。 Protein Expression and Purification 41 (2005) 207–234” 综述了3 ...

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        [连载]原核表达研究者关心的10个问题(3)

        原核表达研究者关心的10个问题 (3)pET 是目前应用最为广泛的原核表达系统,已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。经pET系统过与使用过和正在使用这个系统的科学家的交流,我们发现了一些在使用pET系统的过程中以及原核表达中的一些常见问题。在此,我们选取了其中一些比较有代表性的问题,附上我们的建议改进方案,并期待和你一起分享成功的喜悦。7. 如果IPTG诱导后细胞停止了生长,是不是表示细胞死了?T7 RNA聚合酶 ...

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