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喜欢转贴的，请注明来自中国生命科学第一网：丁香园。根据自己体会和蛋白版的既往精华帖子，总结了没有发现蛋白质表达的原因，或者蛋白质不表达的原因，欢迎大家拍砖。1.载体构建错误。 这个屡见不鲜，很多克隆新人经常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体，其克隆位点常有一两个碱基的区别；另外有些酶产生粘端有些酶产生平端，这些都容易导致读码框错误，从而表达不出来。2.宿主菌选择不当。不同的宿主菌其基因型是不一样的。有些经过特 ...

1． Oligo 6是目前使用最为广泛的一款引物设计软件，除了可以简单快捷地完成各种引物和探针的设计与分析外，还具有很多其他同类软件所不具有的高级功能： a) 已知一个PCR引物的序列，搜寻和设计另一个引物的序列。b) 按照不同的物种对MM子的偏好性设计简并引物。 c) 对环型DNA片段，设计反向PCR引物。d) 设计多重PCR引物。e) 为LCR反应设计探针，以检测某个突变是否出现。f) 分析和评价用其他途径设计的引物是否合理。 g) 同源序列查找，并根据同源区 ...

不是我自己整理的，但是我觉得很不错转载 from ccebbs友情建议：crtl+F 先搜索你所需要的资源，不然眼睛都花了前面是书名，后面是共享邮箱名1 Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical... 2006.01.15 16:30 14082.65Kb hwzgj-chem,hwzgj-chem2 dragen2 01关节镜下使用..　2006.01.01 11:49　10845.83Kb ang6166303 01关节镜下使用..　2006.01.01 11:49　1 ...

成功经验听多了，偶尔也要谈谈失败的经验，大家引以为戒。师弟师妹们试验出了问题，凡是我犯过错的都能很快指正。大家做过什么失败的实验，都来分享一下吧~最好附上解决的办法，错了没事，改了就好。你有啥不开心的啊，说出来大家高兴高兴~~1、SDS-PAGE不拆胶条电压调到120V,电流就是上不去，跑了三四个小时之后，师姐过来一看，你胶条都没拆呢！还跑那么久！2、内外板放反。低的一面冲外。不知道大家用的电泳槽是不是一样，里面低一些的 ...

1. 在western实验中，通常有人采用TBS，有人采用PBS，在使用中有什么区别？　　选择合适的缓冲液对于维持一定PH值下蛋白质的稳定及保证实验的重复性是很重要的。PBS的缓冲能力强于TBS（因为混合缓冲液在一定的离子强度下常常具有更宽的缓冲范围），TBS在PH7.0以下缓冲能力较弱（不过PBS易污染）。但我们常常要根据我们实验目的选用合适的缓冲液，如在蛋白纯化中进行阴离子交换层析，阳离子缓冲液首选TBS；阳离子交换层 ...

xinxinmp3@56.com临床皮肤科杂志200403－04 13985.03Kb临床医师指南皮肤性病学分册 2340.80Kb国家基本药物临床手册（西药）.pdf 10953.50Kb皮肤科疾病诊断与治疗 13051.32Kb老年皮肤病学 王树椿jin.yi.xiao2@56.com化学工程师技术手册.part3.rar 10538.27Kb化学工程师技术手册.part2.rar 18534.02Kb液相色谱检测方法 9571.49Kb色谱柱 ...

一.通过Email在论坛索取资料的管理1、对提供资料者，我们表示感谢，希望您遵守以下规定：1）认真介绍自己拥有的资源；2）资料不涉及版权等法律问题；3）提供资料时注明：“不接受回帖索取，感兴趣者请直接给我的Email信箱：abc@dxy.cn来信索取”2、对于索取资料者，希望您遵守以下规定：1）保证不将在丁香园免费获得的任何资源用于商业目的2）不回帖子索取资料，而是通过Email向作者联系，保持学术论坛的氛围。此规定自即 ...

又开始新的一年了…………首先代表蛋白版全体版主祝愿广大战友工作顺利，学习好好，生活美满……经过了几年的努力，丁香园越来越繁荣，丁香园的战友越来越多，我们来这里的意义也就越来越大。作为丁香园的超级大版之一，蛋白质技术讨论版欢迎越来越多的战友来到这里说出您的疑问，贡献您的知识。您来这里得到帮助了，您是幸福的，同样，如果您来这里给与帮助了，您也一样是快乐的。在此新年到来之际，蛋白质技术讨论版征集蛋白版热心战友，目的在于能够在 ...

最近2个月一直在研究studier的auto-induction Protein Expression System.他今天三月份在Protein expression and purification上发表了一篇长达28页的文章“Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures。 Protein Expression and Purification 41 (2005) 207–234” 综述了3 ...

原核表达研究者关心的10个问题 (3)pET 是目前应用最为广泛的原核表达系统，已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。经pET系统过与使用过和正在使用这个系统的科学家的交流，我们发现了一些在使用pET系统的过程中以及原核表达中的一些常见问题。在此，我们选取了其中一些比较有代表性的问题，附上我们的建议改进方案，并期待和你一起分享成功的喜悦。7. 如果IPTG诱导后细胞停止了生长，是不是表示细胞死了？T7 RNA聚合酶 ...

总结了论坛现有的sds-page及相关方面的绝大部分帖子，并没有进一步筛选精华，因为，可能每个人遇到的情况不同，一个人认为是精华不一定代表对所有人都适用，因此，集合了这么多帖子，也许里面某个小小的问题就是困扰实验的症结所在，主题后面的数字代表了回帖数目，可以据此决定是否有必要浏览该帖子。希望能够对大家有用，如有任何建议，欢迎提出。据说考马斯亮兰能染出颜色就能做出Western是么？SDS－PAGE中用琼脂糖封边有 ...

以下为有关于gst的帖子，供大家参阅：大肠杆菌表达的GST和人的GST有同源性么http://www.dxy.cn/bbs/thread/402809如何去除GST融合蛋白以外的GST的表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/711228请教GST蛋白的纯化http://www.dxy.cn/bbs/thread/585739GST pull downhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/496 ...

8.20会议大会报告以及疾病蛋白质组学分会信息可以在本帖中获得。8.21大会会议报告以及疾病蛋白质组学分会部分信息可以在本帖中获得，如需要全部资料可以看看以下信息：8.20和8.21的会场报告已经全部发到福区建立的共享资源区了。请感兴趣的战友到以下网址下载：http://biodxy.ys168.com/file name：第五届蛋白质组学大会信息－dxy蛋白质技术讨论版 蛋白质技术讨论版第五届中国蛋白质组学大会暨首届粤 ...

蛋白质芯片技术是继基因芯片技术后发展起来的生物检测技术,是蛋白质组学研究中除了酵母双杂交、双向电泳技术、质谱技术等之外的一种重要的工具。蛋白质芯片技术具有平行、快速、自动化的优点，并且检测到的平行数据误差更 小,更准确,这对于高通量的研究具有非常重要的意义。它的出现对于生物学、临床检验医学、遗传学、肿瘤学等多学科的进步具有极大的推动作用。蛋白质芯片技术根据芯片上固定的物质不同又分为抗体芯片与蛋白芯片。近几年来，随着抗 ...

好的抗体对做好Western blot非常重要，但新手在刚接触Western blot时，会面临一抗选择的困惑：单抗还是多抗？这个问题，不同的人又有不同的回答，究竟选择的依据是怎样的？欢迎大家按格式跟帖讨论，我们会评选出10名回答出色的幸运网友，送上10个丁当。跟帖格式：示例：从实验室经费是否充裕这个角度出发，经费宽裕选单抗，资金不宽裕就选多抗。（仅供参考格式）提供部分站友的回答，抛砖引玉：@frankcai ，认为：一般来说单 ...

1.抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），而且说是100微升，但至多 ...

华中农业大学02年研究生考试试题A华中农业大学02年研究生考试试题A答案华中农业大学02年研究生考试试题B华中农业大学02年研究生考试试题B答案西北农林科技大学02年研究生考试试题及答案中科院1999年生化A、B卷、01生化B卷、02年试题中科院生化与分子生物学试题03/04年广州医学院1998年攻读硕士学位研究生入学考试试生物化学广州医学院2000年攻读硕士研究生入学考试试题中山大学医学院硕士生物化 ...

求助：DTT的化学结构式。求助：急寻cayman公司国内代理Purification of a therapeutic recombinant protein using expanded bed adsorption chromatography:protoOptimal solubilization screening strategies for GST-fusion membrane proteins:protocol请教原核表达的问题，为啥没见表达针对蛋白测序 ...

鉴于原核表达的两大热门系统，his tag系统和gst系统，从园子里归纳出以下帖子，以方便大家参考。这是关于his tag的讨论贴蛋白纯化高手请指点（his）http://www.dxy.cn/bbs/thread/276543请问哪位做过6-His蛋白？http://www.dxy.cn/bbs/thread/36760his融合表达问题！再问载体！http://www.dxy.cn/bbs/thread/633019his-tag标签 ...

很多战友（包括我）对“复杂”的生物学软件和厚厚的软件使用说明书充满了恐惧，以至于始终不能够用它们来提高自己的工作效率。很多不太懂电脑的战友就是被这些复杂的东西吓得永远不敢去用软件的。我们做StepByStep的初衷就是让初学者按图索骥地几分钟之内就学会怎么用一个生物学软件，而更进一步的功能可以在使用中自己去慢慢摸索。StepByStep的中心思想：++++几分钟，一个例子学会一个软件的基本使用！++++目标读者：生命 ...