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手把手教您做急性肺损伤(ALI)大鼠模型

原型物种人来源脂多糖(LPS)介导的急性肺损伤模式动物品系Wistar大鼠,SPF级,雄性,体重:180g~220g实验分组随机分组:对照组,模型组,阳性药物组,受试药物组(三个剂量梯度组),15只每组实验周期24hours建模方法将大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾静脉后,按压住尾静脉1/3处,注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理盐水,给药剂量10mg/kg),从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作,但向尾静脉注射等体积的生理盐水。应用用于急性肺炎发病机制研究和相关药物筛选模型评价1.肺损伤后的大体观察:肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出,可以直观的反映肺损伤程度。2.肺的湿/干重比:肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标,也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。建模后,大量液体渗出至肺泡和肺间质,导致肺的重量增大,而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺,称湿重,然后将肺置于65℃恒温箱中干燥,24h 后取出称干重,计算肺湿/干重比值。组织病理学取左肺4固定,然后将肺组织常规脱水,石蜡包埋,切片(厚度为5μm)

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CFS 无细胞蛋白表达体系的原理、优点和应用

CFS 无细胞蛋白表达与传统的基于大肠杆菌系统的蛋白表达相比,速度快,产量高,无包涵体困扰,对于膜蛋白、毒蛋白等特殊蛋白具有很强的适应性。其超高的表达效率和广泛的模板适应性可以大大加速实验流程,免去多次调试实验参数的困扰,特别适合各类蛋白结构和功能研究的客户使用,尤其适合因疫情导致实验延误的老师尽快赶上预期进度。

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04-流式细胞术上样盲点分析

流式细胞术上样盲点

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核酸纯化的原理

核酸纯化是大多数基因相关领域研究工作流程中的第一步。高质量和足够数量的 DNA 和 RNA 对于生物和医学许多领域的下游实验过程至关重要。但是对这一关键技术的原理和细节的了解往往会被大家所忽视。对于核酸纯化原理良好的理解可以极大地帮助您优化工作流程和排除现有实验过程中可能发生的问题。 此外,无论是病毒 RNA、线粒体 DNA 还是质粒的研究,或是在病原排查和癌症研究等领域,对高通量核酸分析的需求不断增加,我们往往需要选择一种适合于自动化的核酸纯化方法。在这次网络报告中,我们向您展示如何帮您实现核酸纯化的自动化,以提高样品通量的同时也提高实验的重复性。

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如何提高反转录的灵敏度

1. 反转录的一般实验流程2. 反转录反应的关键因素 · RNA提取方法的选择 · RNA质量的评价与鉴定 · 反转录引物类型的选择 · 反转录酶的选择

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测试

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Western Blot 小白变身记

如果你对 Western Blot 技术知其然而不知其所以然,如果你希望实现 Western Blot 小白的华丽变身,本节课程,Dr. 赛将带您了解一切。

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蛋白凝胶电泳(上)

如果您正要开始进行蛋白质相关的研究,不知道怎么入手; 如果您需要用到蛋白凝胶电泳,却对其原理和应用不太熟悉;如果您想要了解各类凝胶电泳并灵活使用——Dr. 赛的这堂课定会对您有所帮助!

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WB 技术检测蛋白纯度及相关应用介绍

蛋白质组学研究一直是生物研究领域最基本的和广泛的方向。随着科学研究的深入,高水平期刊和基金项目对蛋白质组学实验数据和结果的要求日趋严谨,定量可重复,具有统计学意义的数据至关重要。Western blotting 技术是蛋白质研究最常用的技术,针对定量可重复的蛋白纯度,WB 技术检测蛋白纯度及相关应用进行介绍和分享。1. 蛋白浓度定量/除杂等样本前处理2. 电泳技术3. WB化学发光成像技术4. 多色荧光成像技术5. 原位蛋白定量/蛋白合成修饰检测

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Science:颉伟 / 陈子江 / 赵涵团队揭示人类早期胚胎翻译组图谱并发现 TPRXs 参与人类合子基因组激活

在哺乳动物卵子向早期胚胎转变的过程(oocyte-to-embryo transition, OET)中,翻译在减数分裂、合子基因组激活和早期胚胎发育过程中扮演了一个重要的角色。合子基因组激活(human zygotic genome activation, ZGA)作为生命起始时的第一次转录事件和启动胚胎发育进程的关键事件,在哺乳动物中仍未被完全理解清楚。尽管启动 ZGA 的关键转录因子在其他物种,如斑马鱼和果蝇等中被陆续发现,启动人类 ZGA 的关键转录因子仍然是一个未解之谜。 2022 年 9 月 8 日,清华大学颉伟教授、山东大学陈子江院士与赵涵教授团队合作在《科学》期刊以长文形式发表题为《翻译组与转录组联合图谱发现 TPRXs 参与人类合子基因组激活》(Translatome and transcriptome co-profiling reveals a role of TPRXs in human zygotic genome activation)的研究论文。研究不仅揭示了人-鼠早期胚胎翻译组动态变化的差异性和保守性以及可能原因,也鉴定出了人类合子基因组激活的关键调控因

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Cell Metab:南京大学毕艳团队首次发现外泌体介导脂肪-大脑间通讯

糖尿病会显著增加认知障碍(包括轻度认知损伤和痴呆)的风险,严重威胁老年健康生存。然而,临床研究表明,控制血糖不能保护认知功能。因此,迫切需要进一步揭示糖尿病认知功能障碍的机制,寻找能够治疗糖尿病认知障碍的新策略。 脂肪组织功能异常在认知障碍发生发展过程中起着重要作用。脂肪组织产生的细胞因子如瘦素、脂联素等与大脑认知记忆功能的维持相关;同时,脂肪产生的炎症因子可通过诱导慢性中枢炎症反应,损伤海马神经功能,促进认知障碍发生。然而,目前针对这些脂肪组织相关机制的干预方法尚未能逆转认知障碍的进程。 除了可溶性的脂肪因子外,最新研究发现,脂肪组织也可分泌细胞外囊泡(EVs)作为新型脂肪因子在器官间通讯中发挥重要作用,如肝脏和骨骼肌,并参与了非酒精性脂肪性肝病和 2 型糖尿病的发展。然而,EVs 能否介导脂肪组织-大脑间通讯,尚不得而知。 2022 年 9 月 6 日,南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科毕艳教授团队和南京大学生命科学院张辰宇教授、李靓副教授团队合作,在 Cell Metabolism 期刊发表了题为:Extracellular vesicles mediate the commun

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清理「垃圾」、延长寿命的溶酶体,科学家找到了它的全新修复机制,并以这所大学命名!

溶酶体损伤是机体衰老和多种疾病发生的标志,已有研究表明,细胞的寿命取决于溶酶体功能,溶酶体可以被定位为控制衰老的中央细胞枢纽。 作为细胞的回收系统,溶酶体中含有多种水解酶类,可以降解分子废物,因此被比喻成细胞中的「消化系统」。这些水解酶类被隔离在溶酶体当中,以防止损坏细胞的其他部分。溶酶体膜的作用类似于危险物周围设置的链条围栏,虽然这个围栏可能会断裂,但健康的细胞可以迅速地修复损伤。 先前的研究表明,发生严重溶酶体膜透化(LMP)的溶酶体会通过溶酶体自噬(lysophagy)选择性降解,而轻度 LMP 可以通过转运所需的内体分选复合体(ESCRT)更快、更直接地进行修复。然而,在 ESCRT 亚基缺失的情况下,细胞仍然能够修复溶酶体损伤,这一结果表明溶酶体中还存在其他的修复机制。 2022 年 9 月 7 日,来自匹兹堡大学的谭小军(Jay Xiaojun Tan)博士和衰老研究所所长 Toren Finkel 博士在顶尖期刊 Nature 杂志上发表了一篇以 A phosphoinositide signalling pathway mediates rapid lysosomal

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三句话读懂一篇 CNS:一次醉酒,也会永久改变大脑;年轻时短期服用雷帕霉素,或可终身抗衰老

1. Nature Plants:首次破译铁线蕨基因组 植物在漫长的陆地生境演化史中占有重要的地位,目前对于真蕨植物研究处于初级阶段。 2022 年 9 月 1 日,中国农业科学院农业基因组所闫建斌团队等多个单位在 Nature Plants 杂志以封面论文形式发表研究论文 The genome of homosporous maidenhair fern sheds light on the euphyllophyte evolution and defences。 该研究首次绘制了染色体级别的铁线蕨基因组,拼接基因组达到 4.83 Gb,发现同型孢子发育过程与异型孢子的花粉粒具有相似性,为蕨类植物孢子发育、真叶植物起源和种子演化、茉莉素信号通路进化等提供了新见解。图 1:来源 Nature Plants 2. Cell Host & Microbe:揭示细菌激活动物食物消化的机制 动物是如何消化食物,及消化道中的微生物如何影响动物的消化能力,其机制不明。 2022 年 9 月 2 日,云南大学生命科学中心祁斌团队在 Cell Host & Microbe 杂志发表研

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为什么蚁后多子多孙还长寿?最新 Science 揭示让蚂蚁寿命延长 5 倍的奥秘

在大多数动物世界中,都有一个可悲的权衡取舍:你生下的后代越多,你的寿命就越短。然而,蚂蚁挑战了这个规则。蚁后——蚁巢中唯一能繁殖的个体——的寿命比基因相同的工蚁长 5 倍、10 倍甚至 30 倍。他们是如何做到其他动物无法完成的事情的呢?这背后又存在着怎样的调控机制?近日,由纽约大学医学院生物化学与分子药理学系的 Danny Reinberg 领衔的团队在 Science 发表了一篇题为 Insulin signaling in the long-lived reproductive caste of ants 的文章。该研究中发现,蚁后通过产生一种抗胰岛素蛋白,仅阻断导致衰老的部分胰岛素途径,减缓衰老过程,而同时又可以保持高的繁殖代谢。图片来源:Science 研究内容 工蚁转变成蚁后之后,寿命延长 在一种叫做 Harpegnathos saltator 的蚂蚁中,蚁后通常能活 5 年,而工蚁的平均寿命是 7 个月。当蚁群中的蚁后死亡或是被移走后,工蚁就会开始相互决斗并选出获胜者成为新的蚁后。变成蚁后之后,它会开始产卵,并且寿命延长五倍。当蚁后被放置在已经有蚁后的群落中时,蚁后也可以

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不同血型还会影响中风的几率?新研究发现这种血型的人,在 60 岁前中风的风险更高……

关于血型,有着多种多样的讨论,有些甚至听起来十分「玄学」。比如,O 型血的人更招蚊子,B 型血的人容易发胖……在临床研究中,也有不少研究发现不同的血型与疾病之间存在着某些联系。 2022 年 8 月 31 日,一篇发表在 Neurology 上的最新研究将一个人的血型与早期中风的风险联系了起来。发现 A 型血的人患早发性中风的风险比其他血型的人更高。图片来源:Neurology 研究人员通过对 48 项关于遗传和缺血性中风的过往研究进行了荟萃分析,其中包含了近 17000 名中风患者和近 600000 名从未经历过中风的健康对照人群的数据。在中风患者中,又分为早发性中风(发生在 60 岁之前的中风)和晚发性中风(发生在 60 岁以上)。 他们研究了所收集的遗传信息,以确定与中风相关的遗传变异,最终发现了早发性中风与一个染色体区域有关,这个染色体区域中包含了决定 ABO 血型的基因。 ABO 血型是根据人的红细胞膜上是否存在抗原 A 与抗原 B 而将血液分成 4 种血型。红细胞膜上仅有抗原 A 为 A 型血,只有抗原 B 为 B 型血,同时存在 A 和 B 抗原则为 AB 型血,而 O

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Cell Reports:天津医科大学王荃 / 姚智发现肠道共生细菌参与肠道稳态调控新机制

炎性肠病(IBD)是一种全球性疾病,在我国发病率呈显著上升趋势。IBD 发病机制仍不清楚,认为与肠道菌群和遗传等多种因素相关。肠道菌群对宿主生理和病理具有重要影响,特别在免疫发育和稳态调节方面具有多种效应。肠道菌群及相关代谢物对宿主的免疫调节机制研究处于起步阶段,大量效应菌株和相关代谢物有待挖掘。 北京时间 2022 年 8 月 30 日晚 23 时,天津医科大学基础医学院、天津市免疫学研究所王荃教授和姚智教授合作在 Cell Reports 杂志上在线发表论文 Enterobacter ludwigii protects DSS-induced colitis through choline-mediated immune tolerance。 该研究通过筛选获得了一株具有缓解实验性结肠炎的菌株 Enterobacter ludwigii。研究人员发现该菌培养上清中小于 3KD 的代谢物具有直接诱导 DC 免疫耐受效应,并证明其中一种代谢物胆碱可通过 α7nAChR 介导的 RA 和 TGF-β 上调诱导 DC 对 Treg 分化的免疫耐受能力,从而保护小鼠耐受 DSS 诱导的结肠炎

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比起脂肪,糖才是让人肥胖的真凶?Cell 揭示食物中的糖如何「改造」肠道促肥胖

导读 肥胖和代谢综合征是复杂的生理状况,会导致许多病理性改变,包括心血管疾病、中风和 2 型糖尿病(T2D)。饮食结构是肥胖和代谢综合征发病率增加的一个主要因素,如西式高脂肪饮食(HFD)会引发一系列健康问题,最终导致肥胖和肥胖相关的代谢并发症。虽然人们对这些疾病的后期病理生理学了解甚多,但疾病如何发生尚不完全清楚,饮食中的不同成分在其中的作用也还未被解析。 微生物群是肠道免疫的重要调节因子,微生物群可以通过调节免疫反应影响代谢综合征。不过,代谢综合征中调节宿主免疫的饮食和微生物种类,以及相关的细胞和分子机制尚不清楚。 2022 年 8 月 29 日,来自美国哥伦比亚大学等单位的科研人员在 Cell 发表了题为 Microbiota imbalance induced by dietary sugar disrupts immune-mediated protection from metabolic syndrome 的文章。他们重点研究了微生物调控的肠道免疫,发现微生物诱导辅助性 T 细胞 17(Th17)对饮食诱导的肥胖和代谢综合征具有保护作用。并确定了饮食中的糖会改变肠道微生物

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抗衰老神药真的来了?《自然-衰老》:青壮年时短期服用,获得终身抗衰老效果!

如果你时常关注抗衰老饮食和药物类的研究,就会发现几乎所有的此类抗衰老疗法,其核心都是一直坚持才能达到长期提升老年健康状况的效果。例如大家熟知的热量限制: 研究人员人在不同实验动物中都发现,坚持节食大半辈子,一旦停止,几乎所有的健康效果立马消失。所谓一朝懒惰,前功尽弃。最近,德国马普衰老生物所(Max Planck Institute for Biology of Ageing)的科学家可能发现了「懒人版」抗衰老福星。他们发表在《自然-衰老》的一篇研究论文指出,实验动物在成年早期短暂服用雷帕霉素(rapamycin),就能获得延长寿命和减少衰老相关疾病的效果。雷帕霉素被发现几十年来,一直在临床医学中用来抗器官移植排斥和治疗癌症。最近十年,研究人员在从蠕虫到啮齿动物的不同实验动物上都发现,使用雷帕霉素能获得寿命延长的神奇效果,因此这种分子被衰老生物学家们公认为目前最有前途的抗衰老药物候选之一。为了达到抗衰老的最大效能,研究专家一般推荐终身服用此药物。然而,长期服用这种药物会不可避免地产生一些副作用,同时对大部分人来说服药一辈子也很难坚持。这项新研究中,衰老界领军人物之一的 Linda Pa

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Cell Rep:复旦大学朱棣 / 附属中山医院许剑民联合团队揭示结肠癌肝转移机制

2022 年 8 月 30 日,复旦大学基础医学院朱棣团队联合复旦大学附属中山医院许剑民团队,在 Cell Reports 发表了题为 Tumor-infiltrated activated B cells suppress liver metastasis of colorectal cancers 的研究论文。通过单细胞测序,发现了 B 细胞及其亚群在左半、右半结肠癌肝转移中发挥的重要作用及机制。肝转移是影响结肠癌预后最重要的原因之一,其发生率和死亡率均较高。结肠癌肝转移的治疗已成为世界医学难题,亟待突破。因此,研究结肠癌肝转移的机制并改善患者预后显得尤为重要。由于左半结肠和右半结肠胚胎来源、解剖结构、生理功能等不同,左半、右半结肠癌表现出很大的异质性。左半结肠癌和右半结肠癌肝转移的治疗方案、患者预后也不同,然而其机制仍不明确。 近年来研究显示肿瘤免疫微环境在癌症的进展中发挥重要作用。然而,目前对于结肠癌肝转移,以及左半结肠、右半结肠癌肝转移之间的免疫微环境研究仍较为缺乏。其次,哪些重要免疫细胞影响了结肠癌肝转移,并且影响了左半、右半结肠癌的差异,目前仍不明确。 作者首先通过单细胞

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Cell Rep:梁洪青 / 刘琬璐 / 张丹等团队揭秘 ERV 不同亚家族在人类早期胚胎中的特异性调控机制和功能

转座子(Transposable elements, TEs)是一类可以在基因组移动的 DNA 序列,是人类基因组的重要组成部分(占比接近 43%), 分为 DNA 转座子和逆转座子。 内源性逆转录病毒(ERV)是逆转座子的一个主要分支,可能是进化过程中逆转录病毒感染宿主并整合至宿主基因组的产物,ERV 在哺乳动物基因组中大量扩增,虽然目前大都失去了转座能力,但其残留在基因组中的序列仍以不同方式影响着基因组的结构和基因的表达。与其他逆转座子相比,ERVs 的序列具有更多的复杂性和较小的重复性,从而使其在基因组中发挥特异性更强、独立性更高的转录调控功能。 根据 DNA 序列的差异 ERV 又分为不同的亚家族,它们与哺乳动物的配子形成、早期胚胎发育、免疫疾病、神经系统疾病和肿瘤发生等具有高度相关性,可能广泛参与发育和病理条件下的转录调控过程。然而目前针对 ERV 不同亚家族的特异性调控机制,及其对细胞状态和功能的影响,相关的研究还非常有限。以往的研究表明,大多 ERV 在早期胚胎发育过程中高度激活,并且不同 ERV 在胚胎发育的不同阶段具有特异性的表达。越来越多的证据提示 ERV 可能参与

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