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Taq Talk 荧光定量 PCR 系列课程之【如何评价检测中的 PCR 效率】扩增效率对实时荧光定量 PCR 数据的准确度极为重要，任何效率偏差均可能导致错误的结果。本期 TaqTalk 带您学习如何准确评估 qPCR 反应的扩增效率

1、载体基本介绍2、载体分类及应用3、载体构建及应用注意事项

本期将通过讲解逆转录技术的原理方法、逆转录常用方法选择、逆转录常用方法及解决方案，帮助科研工作者更好地应用逆转录技术。

慢病毒包装实验

采用了公司最亲斤发明的特殊中和液Buffer N8，可使用户在8分钟内快速从1～5 ml细菌培养物（LB培养基）中提取多至30 mg高纯度的质粒DNA，适用于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化、强壮细胞转染等分子生物学实验。

1. RNA提取的核心问题2. 样本的前处理3. 样本的裂解4. RNA的提取和纯化（TRNzol法&吸附柱法）5. RNA提取产物的检测

为大家介绍qPCR引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享qPCR引物实验验证，更多干货与你分享！

本期为大家介绍 qPCR 引物设计的相关原则，并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件，最后和大家分享 qPCR 引物实验验证，更多干货与你分享！

课程亮点1、微生物与人类健康的关系2、微生物组学技术简介3、微生物组学数据解析4、研究思路及案例分享

本视频介绍了 ELISA 的实验技术、开发方法、常规应用等内容，对 ELISA 使用过程中常规问题进行了解答。

免疫组织化学染色是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术，但随着精准化治疗的进展和蛋白组学研究的深入，传统的免疫组化单染因具有一定的局限性，在某些方面已无法满足需求，而免疫组化多重染色可以在同一张组织切片上对多种抗原蛋白进行共定位和共表达，这对于理解组织微环境中各种细胞间的关系，推演信号通路上下游蛋白表达的关系，制定临床诊断和治疗方案都有着非常重要的意义。本次讲座内容主要包括两大部分，一是介绍免疫组化酶双染的原理、方法以及实战案例；二是免疫组化多重荧光染色的原理、方法并结合案例进行分享。

原型物种人来源脂多糖（LPS）介导的急性肺损伤模式动物品系Wistar大鼠，SPF级，雄性，体重：180g~220g实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组(三个剂量梯度组)，15只每组实验周期24hours建模方法将大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾静脉后，按压住尾静脉1/3处，注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理盐水，给药剂量10mg/kg），从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作，但向尾静脉注射等体积的生理盐水。应用用于急性肺炎发病机制研究和相关药物筛选模型评价1.肺损伤后的大体观察：肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。2.肺的湿/干重比：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。建模后，大量液体渗出至肺泡和肺间质，导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h 后取出称干重，计算肺湿/干重比值。组织病理学取左肺4固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm）

CFS 无细胞蛋白表达与传统的基于大肠杆菌系统的蛋白表达相比，速度快，产量高，无包涵体困扰，对于膜蛋白、毒蛋白等特殊蛋白具有很强的适应性。其超高的表达效率和广泛的模板适应性可以大大加速实验流程，免去多次调试实验参数的困扰，特别适合各类蛋白结构和功能研究的客户使用，尤其适合因疫情导致实验延误的老师尽快赶上预期进度。

流式细胞术上样盲点

核酸纯化是大多数基因相关领域研究工作流程中的第一步。高质量和足够数量的 DNA 和 RNA 对于生物和医学许多领域的下游实验过程至关重要。但是对这一关键技术的原理和细节的了解往往会被大家所忽视。对于核酸纯化原理良好的理解可以极大地帮助您优化工作流程和排除现有实验过程中可能发生的问题。 此外，无论是病毒 RNA、线粒体 DNA 还是质粒的研究，或是在病原排查和癌症研究等领域，对高通量核酸分析的需求不断增加，我们往往需要选择一种适合于自动化的核酸纯化方法。在这次网络报告中，我们向您展示如何帮您实现核酸纯化的自动化，以提高样品通量的同时也提高实验的重复性。

1. 反转录的一般实验流程2. 反转录反应的关键因素 · RNA提取方法的选择 · RNA质量的评价与鉴定 · 反转录引物类型的选择 · 反转录酶的选择

测试

如果你对 Western Blot 技术知其然而不知其所以然，如果你希望实现 Western Blot 小白的华丽变身，本节课程，Dr. 赛将带您了解一切。

如果您正要开始进行蛋白质相关的研究，不知道怎么入手; 如果您需要用到蛋白凝胶电泳，却对其原理和应用不太熟悉；如果您想要了解各类凝胶电泳并灵活使用——Dr. 赛的这堂课定会对您有所帮助！

蛋白质组学研究一直是生物研究领域最基本的和广泛的方向。随着科学研究的深入，高水平期刊和基金项目对蛋白质组学实验数据和结果的要求日趋严谨，定量可重复，具有统计学意义的数据至关重要。Western blotting 技术是蛋白质研究最常用的技术，针对定量可重复的蛋白纯度，WB 技术检测蛋白纯度及相关应用进行介绍和分享。1. 蛋白浓度定量/除杂等样本前处理2. 电泳技术3. WB化学发光成像技术4. 多色荧光成像技术5. 原位蛋白定量/蛋白合成修饰检测