全部

ouwenwang 问下：我知道罔崎片段上的引物是要切除的，那先导链复制时不是也需要RNA引物的么？复制完成后切除么？如果切除了岂不是新合成链的5端少了一小段？ouwenwang 为什么我看课本上画的示意图的意思好像是先导链复制完了根本就不短啊，只说随从链复制完成后5端要短一些，要用端粒酶补齐的？freecell 先导链的合成是从新链5'端连续聚合单核苷酸，模板的方向是3'到5'。哈佛大学网站有个动画，很形象。http://w ...

细胞因子 近日在本版QQ群的讨论中，有战友问到EMEM和MEM的区别是什么，实际上这是同一种培养基，E在这里指的是Eagle（人名）。有鉴于此，特查阅相关文献和参考书，将有关培养基发展的简史介绍如下，并附上常用的几种培养基的使用选择点，期望大家一起讨论并介绍实际运用中的经验和体会。最初进行细胞培养使用的是天然培养基，即组织提取物和体液。随着细胞系的不断增加，对质量更加稳定的培养基的需求也不断增加，由此出现了现在广泛 ...

管树军621 各位大侠，我在论坛上看到大家检测NF/KB与IKBa用的都是WB的方法,我想用免疫组化的方法，好出结果吗，两者相比那种方法更容易出结果呢？我只想只一个好出结果的方法并且试剂相对便宜一些。谢谢！请高手指点。我的邮箱是guanshujun621@163.com00501101 如果你是硕士的话，可以骗过国内的人，蒙混过毕业就行了如果你是博士的话，要发SCI，请不要用组化代替wb，老外没有人这样代替的。lnzyx ...

怪盗小子 我找了很多网站，包括国外的网站都没有找到很多关于这个方面的知识。所以，就只好来求助各位大侠们了……希望能给提供一些图片或者是FLASH的说明，英文的也可以，我看得懂的。谢谢！！！在下只是个医学生，先谢过了！freecell Perhaps the major benefit of split genes is simply the opportunity they provide for making many different proteins from a single gene thr ...

zhuxiangling123 主要有两个问题请高手指教一、我们现有一个单抗，氨基酸序列已知，如何分析其二级结构?如何分析其是否存在游离半胱氨酸及其存在位置。有没有专门分析抗体二级结构的软件？二、现在得到一个新的单抗的重、轻链基因，有没有软件能分析单抗重轻链匹配程度？freecell 1. Try Igblast.http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/igblast/2. http://www.lib.cau ...

榴莲宝宝 问一下“氨基酸序列突变 P194_H195dup"代表什么意思?谢谢！zhanglifei 同问同问，**freecell_在194位插入了脯氨酸，在195位插入了组氨酸。dup是Duplication。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

tyuanc 我用MO Bio的soil DNA Isolation Kit提取土壤总DNA，提取的DNA直接跑胶，看不见任何条带，采用细菌16S rDNA通用引物（27F和1492R)进行PCR扩增，也没有结果，有一次我将试剂盒提取的DNA50倍稀释后，进行细菌16S rDNA的PCR扩增，扩增出了目的条带，我所用的酶为Takara的LA Taq，用普通的Taq酶扩增不出来，但隔了一周后再去重复，什么条件都一样，却再也扩不出来了，我重新提取 ...

veer2 急问，怎样才能使前体miRNA 主要表达 star miRNA (miRNundefined)在下正在作star miRNA 的研究，想把前体miRNA 克隆到载体，然后表达成熟miRNA，但有一个问题，怎样才能使前体miRNA 主要产物为star miRNA (miRNundefined)呢，或者说怎样才能构建主要表达star miRNA (miRNundefined)的克隆呢，先谢谢了freecell My suggestion is using antisense inhibitor to block the domina ...

hyxqs 我是在校研究生，刚刚接触这些实验的问题，希望得到大家的帮助，谢谢。版主freecell留言:1、生化版只讨论理论答疑、学科进展、科研思路和教学方法探讨，不讨论实验技术。2、不要写缩写，要写出英文全名，才有利大家帮助你。freecell Asking google for more help.http://ajpcell.physiology.org/cgi/reprint/263/4/C851http://www.google.com/#h ...

lantianshi 想找一些转录因子的归类方面的相关资料，比如各种转录因子的DNA结合区的特征，结合区的序列，不知道有没有什么数据库什么的？我在分子生物学上看过一点，但是数量比较少。我是因为找到一个基因启动序列上面的很多的转录因子的结合，我只能一个一个查找这些转录因子是什么吗？yaoliduli82 我也想请教这方面的问题lantianshi 顶一下，看是否有回答sunpingli ：转录因子结合位点(Transcrip ...

ykzj1981 请教各位，我曾查阅文献，有人已经证实口腔鳞癌中存在STAT3的高表达，但Tca8113中是否存在，至今未查到相关文献，是Tca8113中不存在，还是没有人做，请教各位！qingguyouquan Tca8113是国产口腔癌肿瘤细胞株，好像是二医的，国外认可度低，楼主用它做实验效果可能不太好，并且最多发国内期刊。http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez建议更换细胞株。by ...

角色方向 我想问一下，基因转染是什么意思啊？例如Apt6i转染脊髓基质干细胞 能否详细解释一下？多谢！freecell 基因转染，通俗地说就是将核酸分子导入细胞。说得学究一点，就是将具有生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能。小舟儿 补充一点，我个人理解是：1.转染是把目的基因转入靶细胞（真核细胞）后，进而研究该基因功能的一种常见方法。2.与此过程相似的一个名词“转化”——把目的基因转入原核细胞后，进而研究该 ...

ws88523758 小弟对于实验处于纯菜鸟，糊里糊涂的做了半年多了，结果数据参差不齐，临近毕业，焦虑万分，特停高手们指导求救！我做的是大鼠的系膜细胞，用TNF-α刺激后，再用中药干预24h，测细胞上清中的ikb和NF-KB,用的都是ELISA法。ikb测值很低，据查当IKBα被磷酸化后分解后，P65和P50才能解离激活。所以，当刺激开始的时候，磷酸化的IKBα上调，IKBα下调。由于P65活化后又可以上调IKBα表达， ...

zhangzhen66 在一篇文章中看到如下一段话，怎么看也没明白怎么测得基因分型，请教下Activity phenotype methodRates of POase activity and DZOase activity were measured spectrophotometrically in serum according to the method described by Richter and Furlong (24). Briefly, POase and DZOase activities we ...

lantianshi 请教大家一下，如果我在ncbi上查找启动子时，发现基因有很多的mRNA joins和cd joins，那是不是说明该基因有很多的varient,那会有不同的启动子吗？我还是要取这个转录起始位点上游的序列来作为我的研究序列吗？初学者，敬待解答 ，说明一下我要查的这个基因没有相关文献报道过启动子的相关信息。阿呆硕士 基因的具体具有启动功能的序列并不是一定的，有启动功能的序列或许都有着启动功能，而且启动子的功能 ...

euniceyeh 想请问一下各位大侠？:?)做单核苷酸多态性位点分析时，要做Hardy-Weinberg平衡检验的原因是什么？是证明这个抽样样本来自于一个符合Hardy-Weinberg平衡的群体吗？为什么做SNP分析，一定要确保人群符合Hardy-Weinberg平衡呢？另外，是不是只要对照需做Hardy-Weinberg平衡检验，病例组就不必了？hj841023 同问哦freecell 是为了说明研究所选取的样本具有群 ...

dcr_80 细胞内信号蛋白 ：其功能是从细胞浆到细胞核的转位完成，量没有变化。除了SMAD家族外还有那些呢？好心的战友，帮帮我下。toddy99 STAT, nuclear receptors, NF-kB, beta-catinin,dcr_80 谢谢！！zfyyzz00 smad本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

littlekaka 我手头有一个胞浆蛋白，是一个离子通道的辅助亚基，我的实验设计希望它表达后上膜，现在我的初步设想是在这个蛋白的N端挂一个CD4，但是我担心CD4太大会影响我这个蛋白的本身功能（也许通过改变linker的长度可以减小影响），请问是否有人知道，有没有什么比较经典的改造方式，比如连一个其他什么蛋白甚至某段domain，而对蛋白本身的表达和功能没有影响，不胜感激！zhuqueleee 我记得以前看到一篇文 ...

pmlt 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。doctormy pmlt wrote:我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？细胞因子 wrote:可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里 ...

海边海鸥 偶的题目大致是研究某一细菌产生ESBLs,其基因组中含有耐药基因，但是表型（药敏试验仍对该类抗生素敏感）阴性。可能存在某些机制使该耐药基因未表达。打算进行该两株的全基因组测序，想请教一下主要从哪几方面考虑未表达的可能性。谢谢大家:)海边海鸥 怎么没有建议呢？zhujoker 我来胡说2句吧，不知道细菌基因组有没有甲基化修饰，自己不做细菌，所以不能确定（但是偶刚才查一下的确好像有这个东西）。你的耐药基因存在不表达是不 ...