marker2007 心肌组织很难拿到,请问采用检测血液中MicroRNA水平来替代心脏组织的MicroRNA水平检测吗?谢谢!woxingwosu 肯定不行的,两者不一样。marker2007 楼上版主您好,我已检测2对心脏病患者的全血MicroRNA,结果发现hsa-miR-21与hsa-miR-26b在2次实验中均升高近2倍,面对这样的结果,我有点茫然,1)不知道分析hsa-miR-21与hsa-miR-26b的功能,二者 ...
luke_zou 应用什么软件能将多seq文件转换成fasta文件freecell http://www.insilicase.co.uk/Desktop/SeqToMultiFasta.aspxchenhaombb 直接把txt文件改了文件类型。luke_zou 多谢freecell!)tstsw chenhaombb wrote:直接把txt文件改了文件类型。我一般也是这么改的!daiti 这个软件帮我大忙了!本文由丁香园论坛提供,想了解 ...
天使的密码 我想研究camp/PKA/CREB信号通路在糖尿病模型大鼠中的作用,我能否用PKA抑制剂灌胃给模型鼠,但我看很多杂志上都是采用细胞培养的办法,活体试验给予这些抑制剂可以吗?没有经验,请问各位前辈。holywater 不一定是实验问题,有可能是买不起那么多的抑制剂吧kern6549 活体不能用抑制剂。可以用基因敲除小鼠。maldinilee 还是用体外细胞培养吧,同意楼上用基因敲除。tacitlee 这种方法不可行。首先 ...
2425611 刚刚开始做实验 请教一个关于质粒比较基础的问题,质粒转染细胞后,是同细胞内的基因相融合后表达还是仍以质粒的环形形式存在表达?每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊?这个数量和蛋白表达多少有没有关系?还有个问题是请问现在最常用的质粒转染技术是什么?菜鸟级的问题,请大家积极帮忙,多谢!!wanadoo 两种转染。 酶切,基因相融合。非酶切,环形形式存在表达。我用lipofedaminwoxingwosu 2425 ...
termite42 近期做实验需要用到某一基因敲出或者过度表达的实验小鼠,不知道哪里能够购买到这种小鼠?谢谢各位指教~hebrewwolf 1.首先,问问南京模式动物所,如果那边有的话,很快就能搞定,代价一千块左右;2.其次,上JAX看看,从那边买的话,在有可供应小鼠的情况下,三到四个月可到手上,但代价可能需要3万人名币左右;3.还有,就是找具有这种小鼠的作者要,耗时和代价和从JAX买差不多。4.最后,最不济的方法就是需要自己 ...
borderland 搞临床的,不看基础很多年。书上说,微卫星DNA重复次数10-60,为啥么属于高度重复序列,高度重复序列不是重复次数达数百万次么?应该是中度重复序列才对。请专家拍砖borderland ?????borderland ????georgeli 晕:)freecell 参考此文: http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_shxmsytx200404001.aspx本文由丁香园论坛提供,想了解更 ...
lujunping 由于条件所限,标本只能放在-20度冰箱然后集中处理。请问,是否能够从组织中提取基因组DNA,然后通过RT-PCR的方法检测疾病组和对照组目的基因的表达水平吗?常用的方法都是抽提组织RNA然后逆转录为cDNA再检测的。谢谢!wangke80 基因组DNA和RNA是两回事,楼主首先得弄明白你们的研究目的是什么。表达水平肯定要用RNA了,基因组DNA不可能反应出两者之间的所谓表达水平。lujunping 疾 ...
flster 如果知道某染色体的某一区域,如何知道改区域及附近编码了那些基因。如:X染色体上起始位置为72928764,终止区为 72965791的一段DNA都编码哪些基因该如何查?woxingwosu NCBI上有查基因组序列的呀,自己学习吧yake211 在 ucsc 网上查找,不过你先要搞清楚你的数据版本是 hg18 还是 hg19, 不同的版本物理位置有一定的变化。本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法 ...
西地兰的启迪 PPT的链接http://www.biomart.cn/experiment/430/586/587/30549.htm第十二张中,图片中有很多苹果、梨、柠檬,有些我认识是转录因子,那么这个图是要反映什么意思呢?想截个图在下面的,怎奈学校的网到了晚上真是破啊。。。。期待高手指教,谢谢噢~~~西地兰的启迪 图就是这个样子滴,还是早上的网络好,请大家帮忙看看哦~yuxiongying 说明上下游都受到多种转录因子的调控西地兰的 ...
syn2767 请教各位师兄,小弟想研究肿瘤中lncRNA-即长非编码RNA的情况,请问开始用什么方法,用芯片筛选吗,多谢freecell "研究肿瘤中lncRNA-即长非编码RNA的情况", 研究什么情况?wlh0369 我觉得应该先将lncRNA从总RNA中分离出来,再进行下一步研究yaoyao82986 你好,看到你发的这篇帖子是今年年初的,我现在也遇到和你相似的问题,请问你当时是怎么解决的?如何筛选出的lncRNA?非常感谢 ...
happy_m_lucky 想通过直接测序的方法检测一个基因的SNP,只检测外显子、5'UTR、3'UTR区,共三十多个已知位点,对照组和病例组共394个样本,不知道样本量够不够,查了很多资料也没找到,想请教一下怎样确定样本含量,能麻烦大家帮我解答一下吗?非常感谢!yyyantopbt 可参考一下帖子:如何计算作SNP需要的病例数:http://genetics.dxy.cn/bbs/topic/8096982SNP与病例数:ht ...
qingyu2010 我是分子菜鸟一只。。。查基因序列的时候发现有些基因有两个polyA,这是为啥呢?望各位师兄师姐解惑啊~苍山暮雪 基因序列没polyA吧,A尾巴是在RNA加工中添加的吧qingyu2010 呃。。。我说的是polyA signal。。。苍山暮雪 有些基因有多个polyA位点的,通过不同剪接方式产生不同的蛋白,大鼠降钙素基因神马的就是这样本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你, ...
real_madrid_146 有个选择性剪接的问题不是很懂,想请教下大家一个完整的mRNA个外显子,起始密码子在第一个外显子,终止密码子在第十一个外显子。第二个外显子选择性剪切缺失之后,随后的序列发生移码,终止密码子出现在第三个外显子了,那后面4-11个外显子还能翻译不?有没有可能后面的外显子内重新出现个起始密码子,也同样翻译?类似于原核生物的多顺反子那样。因为在genebank上可以查询到相应的序列,里面标注的 ...
ono1180 求助各位同道:我想过表达一个基因,想选用一个质粒载体连接此基因再转染入细胞,选用的载体需要有绿色荧光标记,而且能筛选出稳定转染的细胞系,上网查了一下觉得pEGFP系列的好像符合我的要求。请问这个载体怎么样,大家还有什么载体觉得挺好,请指教,感谢了。xiaokangkuaile 我用的是pEGFP-C1表达载体,但我的目的基因对GFP表达有影响,转染效果很差xiaokangkuaile 现在正在做其他的目的 ...
wzmchxz 求助各位战友:factor-related apoptosis inducing ligand指的是什么,它和TNF-α的关系?感谢您的帮助。kern6549 你这个不完整吧,应该是tumor necrosis factor(TNF)-related apoptosis inducing ligand。这个分子简称TRAIL,与相应受体结合后能够诱导细胞凋亡。目前,诱导细胞凋亡的配体主要有TNF、FasL和TRAIL 3种。wzmchxz 感谢 ...
zaiju512 请问有没有人知道哪能买到所有TLRs敲除的小鼠或大鼠?zaiju512 想法有点天真呵呵hzyyy zaiju512 wrote:想法有点天真呵呵文献上有报道的!C3H/Hej小鼠,去上海斯莱克问一下吧!hzyyy 补充一下,C3H/Hej小鼠是TLR4抑制的小鼠,但所有TLR敲除的没法搞,因为老鼠几乎不会活,所以从这个角度讲,2楼的兄台还是有一定道理的!洄游的鱼 大鼠基因敲除研究才刚刚开始,肯定是没有的。前面几位说 ...
huahualian7 急急急问:DNA复制时连接冈崎片断的酶是聚合酶还是连接酶?谢谢啊!zhujoker 聚合酶yuxiongying DNA聚合酶1填补冈崎片段引物切除后的空隙,然后连接酶连接两个相邻的冈崎片段本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming
zhanghai123 大家好!我最近在做一个受体对一种靶蛋白的调节作用。通过WB分析表明这个受体被激活后能够上调靶蛋白的水平。Realtime PCR 分析发现受体激活后,该靶蛋白的mRNA不仅没有上升,反而是在下降的。这也能理解,因为这种靶蛋白是一种转录因子,本身对自己的mRNA具有负性调控作用。于是我分析可能这种调控作用是发生在翻译水平或者蛋白稳定性方面。我用放线菌素D预处理细胞,之后再加入受体激动剂,然后再WB分 ...
银钥灵 大家好~~我准备写毕业论文,可是就一个题目就把我难倒了,想请大家帮帮我,我的实验是将一种牛的DNA的一部分与一对引物结合,最后测序,就这样,怎样起名字呢?麻烦大家帮帮我~biolinkphilic 你连实验目的都没说清楚,怎么起题目呢?你说的貌似是实验手段,实验题目一般是实验的目的和用途。银钥灵 其实我都没有弄的太清楚实验就做完了,我做的大概是这样的,从那种牛的血液中提取DNA,然后老师给我一对引物,对加入引物的DNA ...
吴佰霖 我的基因过表达,结合文献,推理应该是IKb alpha下降,而NFKB升高 (IKb可磷酸化NFKB,使后者降低)但现在我的结果是两者同时升高,请问可能的原因有哪些呢?谢谢woxingwosu 可否检测一下NFKB的磷酸化情况?erik NFKB是检测核内的吗?检测p65还是p50/吴佰霖 检测总蛋白,为P65本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:sh ...