经常会有战友在版面上问:高敏 C 反应蛋白和常规 C 反应蛋白的区别,也有很多战友作出了较为科学的解释。但是总体来看,很多解释虽然正确,但过于「学术化」,用词太专业,导致很多战友难以理解。另一方面,我认识的很多临床医生,包括部分心内科的医生,都常常把这两个概念搞混,有时甚至让人哭笑不得。为便于大家理解这两个概念,我特地开个帖子,力争通过通俗易懂的语言来谈谈自己的看法。我不是生化专业的,只是看过一些高敏 C 反应蛋白的文献,所谈及的内容有不妥 ...
「菌落总数」是评价食品卫生质量的重要指标,其检测工作在某种程度上具有相当的不可比性,这就要求检测人员要严格执行科学的操作程序。国家标准GB/T4789.2 中只是简要提到了检测程序,对实际操作过程中容易出现的问题未作详细说明。本人通过实践及多次对比试验,现就检测中容易出现的问题,作一阐述。样品的制备和稀释倍数的选择对于冰冻的样品,在接种前要放到0~4℃的冰箱中解冻。固体样品要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料并混合 ...
1 设备与材料1.1 低温冰箱:-70℃1.2 高压灭菌器。1.3 多孔玻璃珠(或素烧瓷珠):直径2~3 mm。1.4 商业化细胞冻存管(可选)。2 操作步骤2.1 将直径为2-3 mm 的瓷珠分装到小螺旋帽瓶中(每瓶最多装30 粒)制成冷冻管,高压灭菌。2.2 标记冷冻管。2.3 在无菌状态下打开冷冻管。2.4 在所保藏菌种的最适营养条件下将细胞培养至稳定期或成熟期,进行纯度检查后,将菌株新鲜培养物加入到培养基中制成混悬液,无菌操作将混悬液转入到冷冻管中。2.5 封好冷冻管并颠倒四至五 ...
菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株;1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株:挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明;b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色;c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素;d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明,镜检菌体有芽孢。1.2 白色 ...
尿液的主要是由血液通过滤过、重吸收以及排泄后,最终产生的代谢产物。由于尿液的排出对于人体的水、酸碱以及电解质平衡均具有重要的价值,且与血液循环、器官功能、组织稳定性具有密不可分的联系,因此通过对尿液的量、性质、组成进行分析,能够有效诊断疾病。泌尿系统疾病通过尿常规检验即可准确诊断,并为医师选择适宜的治疗方法提供参考价值。传统的尿液检验方法主要可分为肉眼检查、显微镜检查以及化学检查 3 种。而随着科技的发展,尿液化学分析仪 ...
本文来自 1凝血酶原时间(PT) 主要反映外源性凝血系统状况,其中INR常用于监测口服抗凝剂。PT是血栓前状态、DIC及肝病诊断的重要指标,作为外源性凝血系统的过筛试验,也是临床口服抗凝治疗剂量控制的重要手段(表1)。 本文来自PTA<40%提示肝细胞有大片坏死,凝血因子合成减少。如肝衰早期30%<PTA<40%;中期20%< PTA< 30%;晚期PTA<20%。表1: ACCP(美国胸科医师协会)推荐的INR目标值延长见于:a、广泛而严重的肝脏实质 ...
6xHis 标签,也称为多组氨酸标签, His6 标签或 hexa 组氨酸标签, 是一种在转染的细胞中目标蛋白的 C 端或 N 端上由至少 6 个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列。这种标签通常在重组蛋白的纯化中使用,这是因为组氨酸残基的序列可以在特定的缓冲液条件下结合到几种类型固定的离子上(比如镍,钴和铜)从而达到容易检测和纯化 His 标签蛋白的目的。由于它的相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性, 因此在天然和变性的条件下 ...
蛋白样品制备中,在细胞破碎之后,既可以利用特定蛋白质的特性来分离某一类蛋白质,比如亲和纯化,比如前面介绍的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一个考虑方向是去除杂质----去掉样品中某些非目标高丰度蛋白或者杂质的干扰,同样可以达到简化样本的目的。当然要小心「倒洗脚水的时候别把婴儿也倒掉了」,一定要选择可靠的产品。比如,潜在疾病标志物的最好样本来源就是血清或其他体液,此类样本可以提供人蛋白质组中绝大部分组份。然而用蛋 ...
俗话说男怕入错行,女怕嫁错郎。我们这个专业的,每天做实验,大家难免日久生情。该不该选他们做男朋友呢?外出吃饭生化男吃饭和别人不太一样。比如说加调料,别人都是直接倒,他是把筷子先插到碗里,然后将调料沿着筷子缓缓倒入碗中。比如说过夜的饭菜他不吃,因为亚硝酸盐超标了。如果水有异味,他要拿回所里检测一下细菌是否超标。冰牛奶一般不喝,会水浴加热一下。酸牛奶,要买新鲜的,因为久了乳酸菌都死光光了,他可以给你算出个细菌生长曲线,你 ...
ELISA 简介酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称 ELISA)是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。ELISA 过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗体(抗原),再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)--待测抗体(抗原)--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生成 ...
最近一师弟和我抱怨,说是不知道该怎么开始写 SCI 论文。然后我又问他,你的实验结果够发一篇 SCI 了吗?他傻眼了。我又接着追问,你的论文适合发表在啥杂志上?哪种类型,是文章还是综述还是报告还是来信?师弟一头雾水。磨刀不误砍柴工,要清楚自己为何发论文,发啥论文,才能有针对性地写出满意的论文。写作前的准备除了开头提的,还要留意自己要投得杂志的影响因子是多少,每年发表多少文章,是否有过本土中国人在上面发表,等等。以便评价自己的文章被 ...
大数据技术的战略意义不在于掌握庞大的数据信息,而在于对这些含有特定意义的数据进行专业化处理。从某种程度上说,大数据是数据分析的前沿技术,是需要新处理模式才能具有更强的决策力、洞察发现力和流程优化能力的海量、高增长率和多样化的信息资产。大数据技术是从各种各样类型的数据中,快速获得有价值信息的能力。对于大数据时代,目前通常认为有下述四大基本特征,称为“四V”特征:第一,数据规模大(Volume),可称海量;第二,数据类型 ...
作者:怀化市第二人民医院 张廷华定量检测室内质控相对定性检测而言,一般会比较容易上手,很长一段时间都能让质控保持稳定状态,这是因为定量检测的质控多为纯数据化的格式,有一个确定的数字,处理起来比较方便,而且定量质控品商业化已经很成熟了,也就是说,在市场上很容易买到价格实惠,性质稳定的定量质控品,并且还有多个水平的质控品,使用起来就更为全面了。然而,定性检测就不是那么容易了,定性检测是非“0”即“1”的概念,而且定性检测质控 ...
肝脏血液检测是最常见的血液检测,可用于评估肝脏功能或肝损伤。肝损伤检测的第一步是进行简单的血液检测,以确定血液中特定肝酶(蛋白质)的水平。目前临床上最敏感、应用最广泛的肝酶是转氨酶,包括门冬氨酸转氨酶(AST或 SGOT)和丙氨酸转氨酶 (ALT 或 SGPT)。这些酶主要存在于肝细胞内,一小部分存在于肌肉细胞内。如果肝脏受损或损坏,肝细胞中的转氨酶便进入血液,血液中ALT和AST水平升高,提示肝脏疾病信号。其他有关的肝脏血液检测 ...
Clinical Chemistry 5 月 27 日在线发表了欧洲动脉粥样硬化协会和欧洲临床化学和实验医学联合会的联合共识声明:推荐常规的血脂检测并不需要空腹。传统观念中测血脂需要空腹似乎是天经地义的,那么这篇文章主要讲了什么内容呢?今天我们就学习下这篇共识,当然只是简要介绍,这篇共识的内容是非常丰富的,详细的内容建议大家阅读文献的原文。 使用空腹及非空腹标本检测血脂的主要原因多年来临床实验室测定血脂(CHOL、LDL、HDL 和 TG) ...
本文来自知乎(http://www.zhihu.com/question/20829666)1. 查找、阅读文献,用文献管理软件管理。一般一个完整的研究都是从查找和阅读文献开始的,通过阅读大量的文献,你才有关于做什么研究(主题)、怎么做研究(方法)和研究假设的想法。找文献,国内学校基本上是百链 (http://edu.blyun.com)+google scholar,国外学校就是学校图书馆+google scholar。然后文献管理软件推荐 Me ...
7 月 29 日,《自然》报道了分子生物学最新技术突破——基因工程师们开发出一种工具,通过控制细胞合成蛋白质的过程,让人们更好地理解蛋白质合成,探讨抗生素作用原理,并将细胞改造成合成化学物质的工厂。核糖体是细胞中的一种细胞器,除哺乳动物成熟的红细胞外,细胞中都有核糖体存在。一般而言,原核细胞只有一种核糖体,而真核细胞具有两种核糖体。细胞利用核糖体阅读转录自 DNA 的 mRNA 信息,利用氨基酸翻译成蛋白质。核糖体是细胞维持生存的基础,但是很 ...
免疫组化技术已经渗透到医学研究的各个领域,它在蛋白抗原的细胞准确定位上是其它蛋白检测方法无与伦比的。然而,要做好一张漂亮的染色切片,也不是十分容易的事。我做免疫组化方面的实验多年,积累了很多经典案例。下面我把这些案例列举出来,并附上我们发现的问题以及如何解决这些问题的解决方法,以供大家实验参考和实验交流。实验背景以前做免疫组化,我一直用中杉金桥的 SP 三步法染色试剂盒,效果不错。在奥运会期间我准备做同批实验分不同批 ...
经常看到别人论文中画出各种绚烂的插图,是用什么软件画出来的呢?分享一下我的绘画思路和常用软件。1. 绘画思路论文插图终归是内容导向,数据少/逻辑简单很难画出炫酷的图。专业图尽量用对应的专业软件画。大力出奇迹,插图最终效果跟投入的时间成本(学习软件+绘制+调试)成正比,只要耐心好学多尝试,哪怕 Office 系列也不会让你失望。绘图最重要的是专业性,其次关注「矢量+配色+字体+布局」。有时瓶颈在于思路而非工具,做科研的多浏览 Nature 和 ...
我最近两个月一直在做 ECL western,非常困难,都快做疯了。但是,功夫不负有心人,最终还是把困难的非特异条带和背景问题解决了。经过此番,我总结了几条心得与大家分享:第一条不要用平底小盒或杂交袋,用可以旋转的杂交管(可以用 50 ml 塑料离心管做成),我刚刚得到了比较结果,效果大不一样。第二条膜在 blocking 前先用 stripping buffer 处理一下(当然也在杂交管中进行,注意要通过旋转使处理均匀)。我偶然发现经过该处理后背景 ...