• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        热酚法抽提酵母总RNA的方法

        互联网

        4213

        1. 将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30℃过夜旋转培养。

        2. 稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。

        3. OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。

        4. 将细胞悬浮于400μlAE缓冲液(50mMSodiumAcetate,10mMEDTA调整pH值至5.2)。

        5. 加入1/10体积的10%SDS,充分混合。

        6. 加入等体积在65℃预热的酸性酚(pH4.5),混合。

        7. 65℃加热5min,冰上放置10min。

        8. 在室温下8000rpm/min离心10min。

        9. 取水相,加入等体积的酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1),10000rpm/min离心8min。

        10. 取水相,加入等体积氯仿/异戊醇(49∶1)10000rpm/min离心8min。

        11. 加入1/10体积3MpH5.2的醋酸钠,2.5倍体积的纯乙醇,-20℃过夜沉淀。

        12. 沉淀样品于4℃离心5min,去除液体。

        13. 在冰上干燥RNA(放置15min),最后用适量DEPC水溶解RNA。

        (生技网 www.biogo.net)

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序