【求助】请教聚丙烯酰胺凝胶嗲用问题
丁香园论坛
922
请教各位:为什么条带这么不清晰呢?而Marker还可以,是电泳的问题,胶的问题还是染色的问题呢?刚开始做,是在搞不明白~·电泳是非变性聚丙烯,染色步骤如下:
染色步骤:
1. 固定液:100%冰醋酸2ml,无水乙醇40ml加水至400ml,摇7-8min
2. 银染液:0.6g硝酸银加水至300ml,摇12-15min
3. 加水洗1-2次,每次1min
4. 显色液:6g NaOH,4ml甲醛,1%硫代硫酸钠800ul,加水至400ml,摇至条带清晰为止
5. 水冲洗一次
6. 统计条带,照相

染色步骤:
1. 固定液:100%冰醋酸2ml,无水乙醇40ml加水至400ml,摇7-8min
2. 银染液:0.6g硝酸银加水至300ml,摇12-15min
3. 加水洗1-2次,每次1min
4. 显色液:6g NaOH,4ml甲醛,1%硫代硫酸钠800ul,加水至400ml,摇至条带清晰为止
5. 水冲洗一次
6. 统计条带,照相

marker可以,电泳没问题
就是显色有点过了
就是显色有点过了
那请问怎么解决呢?
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming