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        Cell Lysates For Western Blotting

        互联网

        1108

         

        <center> <h1> Cell Lysates For Western Blotting</h1> </center>

        Cell Lysates For Western Blotting

        Reagents / Solutions

        Lysis Buffer:
        10ml 10% Sodium dodecyl sulphate (SDS)
        10ml Glycerol
        10ml b-mercaptoethanol
        8ml 0.5M Tris pH6.8
        1ml 0.1% bromophenol blue
        51ml H2 O
        Cell Lysates For Western Blotting

        Protocol

        1. Spin down 106 cells and wash, if required, in phosphate buffered saline.
        2. Resuspend cells in 100µl warmed lysis buffer, vortex then boil for 5 - 10 minutes to break up DNA.
        3. Cool (not on ice - the SDS will precipitate) and centrifuge to collect droplets.
        4. Vortex briefly to mix.
        5. The samples may now be analysed by SDS - PAGE and Western Blotting , or
        6. Store samples at -20°C until required.

         

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