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        免疫组织化学:几种溶液的配制方法

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        1、PBS :

        取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,测pH值应在7.2~7.4之间,若偏离此范围,请用0.1N的HCL或NaOH调整。

         

         

        2、TBS:

        2.1 Tris缓冲液配方:(0.5 M pH7.6)

        Tris(三羟甲基氨基甲烷)

        60.57g

        1N HCL

        约420ml

        双蒸水

        加至1000ml

        Tris缓冲液配制方法:

        先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6, 最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液,4℃冰箱中保存。

        2.2 TBS配方:

        Tris-HCI缓冲液(0.5M pH7.6)

        100ml

        NaCI

        8.5~9g (0.15mol/L)

        双蒸水

        加至1000ml

        TBS配制方法:

        先以少量双蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl缓冲液,最后加双蒸水至1000ml,充分摇匀。

         

         

        3、枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer):

        3.1 储存液:

        A. 0.1 M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸馏水中。

        B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸馏水中。

        3.2 工作液:

        取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0±0.1

         

         

        4、胰酶(Trypsin):

        4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液:

        常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。

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