酸性磷酸酶重氮盐后偶联法
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酸性磷酸酶重氮盐后偶联法：
1)孵育液配制
磷酸―6―苯酰-2-萘钠 25rug
蒸馏水 80ml
Wapoll醋酸缓冲液(pH 5．0) 20ml
氯化钠 2g
重氮盐溶液配制：
坚牢蓝B盐 50rug
蒸馏水 50ml
加碳酸氢钠使之碱化。
2)染色程序：
①用新鲜或冷福尔马林固定的组织进行恒冷箱切片：
②切片人孵育液中，室温孵育10―60分钟(新鲜组织切片)，或1～2小时(固定后组织切片)；
③新鲜组织切片用冷生理盐水洗3次，固定后的组织切片用蒸馏水洗3次；
④放人新鲜配制的冷重氮液中，搅动3～5分钟；
⑤用冷生理盐水或蒸馏水洗3次，每次5分钟；
⑥甘油明胶封固。
3)结果：酶活性部位显示蓝色。
4)对照实验：与铅法相同。
