大肠杆菌转化农杆菌的实验步骤

互联网2013-08-27

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1、获取目的基因。用限制性核酸内切酶切割下目的基因。

2、基因表达载体的构建。将目的基因与载体(大多数选用质粒)用DNA连接酶连接起来。

3、将目的基因导入受体细胞。将含目的基因的重组质粒导入农杆菌(农杆菌为受体细胞)。

4、目的基因的检测与鉴定。用DNA分子杂交技术/分子杂交技术/抗原 -抗体杂交/个体生物学水平鉴定。

5、最后将成功表达的细胞导入植物体内，对植物体进行个体生物学水平鉴定。

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