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        细胞消化胰酶的配制

        互联网

        25310

        适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者

        对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin)
        配方:100ml PBS,0.25g胰酶
        步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O
        /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)
        2 称胰酶0.25g
        3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜
        低速搅拌0.5h冰浴中
        4 调PH7.4
        5 仍在冰浴中
        6 过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完
        tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,
        酶就变性了。低温,防止酶失活
        对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)
        tip:因为EDTA可以络合Ca2+,增加消化效力

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