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        细菌的生化反应检测

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        不同细菌 由于所含的酶系统不完全相同,因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致,据此,可用以鉴别细菌的种类。
        一、单糖发酵试验
        【原理】
        单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18~24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成,小倒管内则聚集有气泡;不分解,则指示剂不变色。
        【材料】
        1.菌种:大肠杆菌,伤寒杆菌18~24小时琼脂 斜面培养物。
        2.培养基:葡萄糖发酵管,乳糖发酵管等。
        【方法】
        1.将伤寒杆菌,大肠杆菌 按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。
        2.置37℃孵箱培养18~24小时。
        3.观察结果:由于一些细菌能分解某种糖类产酸,所以培养基中PH下降到7.0以下,在酚红指示剂的显示下,培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示,如果同时产生气体,则培养基中小倒管内有气泡出现,此乃产酸又产气,以“⊕”表示,不分解,则指示剂不变色,用“-”表示。
        【结果】
        伤寒杆菌大肠杆菌
        葡萄糖+⊕
        乳 糖-⊕
        二、V-P(Voges-Proskauer)试验
        【原理】
        有些细菌如产气杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧,生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中被氧化为二乙酰,再与培养基内胍基结合,生成红色化合物,V—P试验阳性。
        【材料】
        1.菌种:大肠杆菌,产气杆菌18~24小时琼脂斜面培养物。
        2.培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。
        3.试剂:V-P试剂
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